【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物复合材料，特别涉及一种双层结构的复合脱细胞真皮基质的制备方法。
技术介绍
1、皮肤是人体最大的器官，具有保护、调节和感觉的功能。全层和慢性皮肤伤口严重影响患者的生活质量，并给卫生服务增加极大的治疗和费用负担。创伤、烧伤等类型的皮肤损伤患者正逐年增加，全球每年约有1100万人需要接受治疗，并造成26.5万人死亡。
2、目前，临床上治疗全层皮肤创面的金标准是自体皮肤移植。移植物来自于患者本身，因此没有免疫风险。然而，在治疗较大面积的损伤时，将会面临患者自身可提供皮肤不足的问题。当自体皮肤不足时，可考虑同种异体皮肤移植，如尸体皮肤，但该方法同样面临供体来源不足的难题。
3、随着现代组织工程的发展，组织工程人工皮肤为自体皮肤移植物不足提供了新的解决方案。然而，现有的人工皮肤常常面临着三维结构仿真度低、制作方法复杂、生物相容性低、不能有效隔绝外界污染等问题。
4、理想的人工皮肤应具备如下特征：制备方法简单；生物相容性佳；孔隙率适宜，仿生的三维结构；能够有效阻隔外界细菌侵袭；降解时间能够匹配自体皮肤长出时间。
5、中国专利cn200810017603.7公开了一种无细胞复合型人工皮肤及其制备方法，具有真皮层和表皮层双层结构，真皮层是由细胞外基质制作形成的疏松多孔结构，表皮层是用凝胶状的类表皮材料覆涂于真皮层上表面凝固形成，嵌合于真皮层表面孔隙结构。该皮肤透气性较差，不适宜皮肤生长。
6、中国专利cn201910026843.1公开了一种人工皮肤及其制备方法，以异种
7、中国专利cn202010023521.4公开了一种人工皮肤，将液态硅橡胶均匀涂布于固相支持物表面，进行第一固化处理，形成未完全固化的硅橡胶层，将已成型的胶原膜直接放置于未完全固化的硅橡胶层的表面，进行第二固化处理，使硅橡胶层完全固化并与所述胶原膜紧密粘结，获得人工皮肤。该方法制备的胶原-硅橡胶人工皮肤，虽不含粘接剂，但依赖胶原的质量，且价格昂贵。
8、现有双层人工皮肤制备复杂，且仿真皮层结构不理想，还无法很好地实现人体自然皮肤组织的仿生构建。为了更好地模拟了人体真皮组织，本专利技术设计了一种双层结构人工皮肤，可以为细胞和组织再生提供高度的仿生微环境，提升创面愈合效果。
技术实现思路
1、本专利技术公开了一种双层结构的复合脱细胞真皮基质，包括内层和外层，所述外层为与空气接触的天然高分子材料层，所述内层为与组织接触的异种脱细胞真皮基质；
2、所述内层与外层通过医用粘合剂结合；
3、所述外层的厚度为50μm～2mm；所述内层的厚度为0.5mm～3mm。
4、在一个实施例中，所述内层的制备方法包括如下步骤：
5、s1.首先将动物真皮用pbs缓冲液清洗，随后用纱布包裹，放入-80℃低温冰箱冷冻4h，室温下自然复温，重复该操作，反复冻融2次；
6、s2.之后将冻融后的皮肤浸入胰蛋白酶溶液中，胰蛋白酶溶液浓度为0.01％-0.5％，优选为0.1％-0.4％；
7、s3.37℃孵育4h，进行脱细胞处理，随后将其浸入pbs缓冲液中振荡洗涤，得到脱细胞真皮基质。
8、在一个实施例中，所述外层选自硅橡胶、聚乙二醇、聚氨酯、聚乙烯、聚醚醚酮、对苯二甲酸乙二醇酯中的一种或多种。
9、进一步地，在无菌环境下，将所述外一侧表面涂覆一层医用粘合剂，与所述内层室温作用1-6h。
10、进一步地，所述医用粘合剂为α-腈基丙烯酸酯。
11、在一个实施例中，所述外层为硅橡胶复合膜，厚度为150～250μm。
12、在一个实施例中，所述外层的制备方法包括如下步骤：使用刮刀式涂布机将硅橡胶复合溶液铺涂在具有防粘层的模具中，置于40～60℃烘箱中，待溶剂完全挥发后，再在温度为70～90℃烘箱中固化成薄膜。将已成形薄膜与模具分离，即得所述外层高分子层硅橡胶复合膜。
13、在一个实施例中，所述硅橡胶复合溶液的成分为：液体硅橡胶、3％硝酸银溶液、凡士林、正己烷，所述液体硅橡胶、硝酸银溶液(3％)、凡士林、正己烷的质量比为25:4:1:20～20:1:2:27，优选为23:2:1:24。
14、进一步地，所述内层为猪皮脱细胞真皮基质，厚度为1～2mm。
15、所述双层结构的复合脱细胞真皮基质拉伸断裂强度大于7mpa。
16、所述双层结构的复合脱细胞真皮基质具有良好的血管再生性能。
17、本申请的优点和效果如下：
18、1、本专利技术提供一种双层脱细胞真皮基质，包括外层的天然高分子材料和内层的脱细胞真皮基质。外层天然高分子膜可以有效隔绝外界细菌侵袭，保护创口免受污染。
19、2、本专利技术以天然脱细胞基质材料为核心，最大程度保留了天然真皮的三维结构和生物活性成分，有助于细胞的粘附和生长，可以为细胞和组织再生提供高度的仿生微环境，缩短创面愈合时间，提升创面愈合效果，具有比现有产品更好的血管再生能力。
20、3、同时，本专利技术的双层皮肤制备相对其他现有产品的制备工艺更加简单，质量更加可控。
21、上述说明仅是本申请技术方案的概述，为了能够更清楚了解本申请的技术手段，从而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本申请的上述和其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下以本申请的较佳实施例详细说明如后。
22、根据下文对本申请具体实施例的详细描述，本领域技术人员将会更加明了本申请的上述及其他目的、优点和特征。
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1.一种双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，其包括内层和外层，所述外层为与空气接触的高分子材料层，所述内层为与组织接触的异种脱细胞真皮基质；
2.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述内层的制备方法包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述外层选自硅橡胶、聚乙二醇、聚氨酯、聚乙烯、聚醚醚酮、对苯二甲酸乙二醇酯中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，在无菌环境下，将所述外一侧表面涂覆一层医用粘合剂，与所述内层室温作用1-6h。
5.根据权利要求4所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述医用粘合剂为α-腈基丙烯酸酯。
6.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述外层为硅橡胶复合膜，厚度为150～250μm。
7.根据权利要求6所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述外层的制备方法包括如下步骤：使用刮刀式涂布机将硅橡胶复合溶液铺涂在具有防粘层的模
8.根据权利要求7所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述硅橡胶复合溶液的成分为：液体硅橡胶、3％硝酸银溶液、凡士林、正己烷，液体硅橡胶、硝酸银溶液(3％)、凡士林、正己烷的质量比为25:4:1:20～20:1:2:27。
9.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述内层为猪皮脱细胞真皮基质，厚度为1～2mm。
10.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述双层结构的复合脱细胞真皮基质拉伸断裂强度大于7Mpa。
...【技术特征摘要】
1.一种双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，其包括内层和外层，所述外层为与空气接触的高分子材料层，所述内层为与组织接触的异种脱细胞真皮基质；
2.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述内层的制备方法包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述外层选自硅橡胶、聚乙二醇、聚氨酯、聚乙烯、聚醚醚酮、对苯二甲酸乙二醇酯中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，在无菌环境下，将所述外一侧表面涂覆一层医用粘合剂，与所述内层室温作用1-6h。
5.根据权利要求4所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述医用粘合剂为α-腈基丙烯酸酯。
6.根据权利要求1所述的双层结构的复合脱细胞真皮基质，其特征在于，所述外层为硅橡胶复合膜，厚度为150～250μm...
【专利技术属性】
技术研发人员：石彤彤，左一聪，韩苗苗，邓思羚，
申请(专利权)人：深圳市迈捷生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：
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