本发明专利技术公开了一种青蒿琥酯单链抗体及其制备方法与应用，所述单链抗体或其抗原结合部分含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均含有3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3。发明专利技术方案提供的特异性青蒿琥酯的单链抗体，对青蒿琥酯具有较高的亲和力和识别能力，特异性好，能够直接用于含有青蒿琥酯的药物的检测，灵敏度高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，尤其是涉及一种青蒿琥酯单链抗体及其制备方法与应用。
技术介绍
1、青蒿琥酯是青蒿素的衍生物，对间日疟、脑型疟和恶性疟具有显著的治疗效果，主要作用于疟原虫红细胞内期无性体，对恶性疟原虫早期配子体有杀灭作用。根据who报告，注射用青蒿琥酯已经救治了超过6000万名重症疟疾患者，仅撒哈拉以南的非洲地区，每年就有约2.4亿人受益于青蒿素类药物联合疗法。然而，在一些疟疾流行国家和地区，假冒伪劣的抗疟药物对疟疾病人的健康造成威胁。因此，需要建立青蒿琥酯的快速检测方法，以加强青蒿琥酯药物的监管。
2、目前，已报道的青蒿琥酯类药物的检测方法主要有hplc法、tlc法、lc-ms、红外吸收光谱法、免疫分析法等。相较于仪器分析方法，免疫分析法有样品处理简单、结果分析快速、高通量等优点，成为当前药物检测领域最主要的分析方法之一。免疫分析方法的核心试剂是抗体，其中，单链抗体作为一种新型重组抗体，不仅保留着与抗原结合的部位，而且可以在体外进行分子水平上的改造，以提高其亲和力和特异性，具有替代单克隆抗体的潜力。
3、特异性的青蒿琥酯的单链抗体尚无报道。因此亟需提供一种高灵敏度的青蒿琥酯单链抗体。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种青蒿琥酯的单链抗体或其抗原结合部分。
2、本专利技术还提供与上述单链抗体或其抗原结合部分相关的生物材料。
3、本专利技术还提供一种用于检测青蒿琥酯的产品。</p>4、本专利技术还提供上述单链抗体或其抗原结合部分或上述生物材料或上述产品在c1)或c2)中的应用。
5、本专利技术还提供一种检测青蒿琥酯或青蒿琥酯含量的方法。
6、本专利技术还提供一种上述青蒿琥酯的单链抗体或其抗原结合部分的制备方法。
7、根据本专利技术的第一方面，提出了一种青蒿琥酯的单链抗体或抗原结合部分，所述单链抗体或其抗原结合部分含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均含有3个互补决定区cdr1、cdr2、cdr3；
8、所述重链可变区的cdr1的氨基酸序列如seq id no:12所示；
9、所述重链可变区的cdr2的氨基酸序列如seq id no:13所示；
10、所述重链可变区的cdr3的氨基酸序列如seq id no:14所示；
11、所述轻链可变区的cdr1的氨基酸序列如seq id no:16所示；
12、所述轻链可变区的cdr2的氨基酸序列如seq id no:17所示；
13、所述轻链可变区的cdr3的氨基酸序列如seq id no:18所示。
14、在本专利技术的一些实施方式中，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:15所示。
15、在本专利技术的一些实施方式中，所述单链抗体或其抗原结合部分的重链可变区和轻链可变区通过连接肽相连。
16、在本专利技术的一些实施方式中，所述连接肽氨基酸序列如seq id no:25所示。
17、根据本专利技术的一些实施例，所述单链抗体或其抗原结合部分的氨基酸序列如seqid no.10所示。
18、根据本专利技术的第二方面，提出了与上述单链抗体或其抗原结合部分相关的生物材料，所述生物材料为a1)至a8)中的任一种：
19、a1)、编码上述单链抗体或其抗原结合部分的核酸分子；
20、a2)、含有a1)所述核酸分子的表达盒；
21、a3)、含有a1)所述核酸分子的重组载体；
22、a4)、含有a2)所述表达盒的重组载体；
23、a5)、含有a1)所述核酸分子的重组生物细胞；
24、a6)、含有a2)所述表达盒的重组生物细胞；
25、a7)、含有a3)所述重组载体的重组生物细胞；
26、a8)、含有a4)所述重组载体的重组生物细胞。
27、在本专利技术的一些实施方式中，a1)所述核酸分子可以是dna，如cdna、基因组dna或重组dna；所述核酸分子也可以是rna，如mrna或hnrna等。
28、在本专利技术的一些实施方式中，a1)所述核酸分子为如b1)或b2)所述的dna分子：
29、b1)、编码所述重链可变区的cdr1的dna分子的核苷酸序列如seq id no:3所示；编码所述重链可变区的cdr2的dna分子的核苷酸序列如seq id no:4所示；编码所述重链可变区的cdr3的dna分子的核苷酸序列如seq id no:5所示；编码所述轻链可变区的cdr1的dna分子的核苷酸序列如seq id no:7所示；编码所述轻链可变区的cdr2的dna分子的核苷酸序列如seq id no:8所示；编码所述轻链可变区的cdr3的dna分子的核苷酸序列如seq id no:9所示；
30、b2)、与b1)限定的dna分子具有90％以上的同一性且编码所述单链抗体或其抗原结合部分的dna分子。
31、在本专利技术的一些实施方式中，a1)所述核酸分子中，编码所述重链可变区的dna分子如seq id no:2所示，编码所述轻链可变区的dna分子如seq id no:6所示。
32、在本专利技术的一些实施方式中，所述单链抗体或其抗原结合部分的重链可变区和轻链可变区通过连接肽相连；编码所述连接肽的dna分子序列可以如seq id no:24所示。
33、在本专利技术的一些实施方式中，a1)所述核酸分子的核苷酸序列如seq id no:1所示。
34、在本专利技术的一些实施方式中，a2)所述表达盒是指能够在宿主细胞中表达所述单链抗体或其抗原结合部分的dna，该dna不但可以包括启动编码所述单链抗体或其抗原结合部分的dna分子转录的启动子，还可包括终止编码所述单链抗体或其抗原结合部分的dna分子转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括复制起始位点、转录起始序列、增强子序列、选择元件或报告基因。
35、在本专利技术的一些实施方式中，a3)或a4)中所述重组载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。所述重组载体可以为克隆载体，也可以为表达载体。
36、在本专利技术的一些实施方式中，a5)或a6)或a7)或a8)中所述重组生物细胞可以为细菌(如大肠杆菌或枯草芽孢杆菌等)、藻类、真菌(如酵母或曲霉菌等)、昆虫细胞(如s2果蝇细胞或sf9细胞等)或动物细胞(如cho细胞、cos细胞、nso细胞、hela细胞、bhk细胞或hek293细胞等)。所述重组生物细胞不包括生殖材料。
37、在本专利技术的一些实施方式中，a5)或a6)或a7)或a8)中所述重组生物细胞具体可以为将所述重组质粒导入大肠杆菌得到的重组菌。更具体可以为将所述重组质粒导入大肠杆菌dh5α或bl21得到的重组菌。
38、根据本专利技术的第三方面，提出了本文档来自技高网
...
【技术保护点】
1.一种青蒿琥酯的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均含有3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3；
2.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示。
3.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分的重链可变区和轻链可变区通过连接肽相连；所述连接肽氨基酸序列如SEQIDNO:25所示。
4.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示。
5.与权利要求1-4任一所述的单链抗体或其抗原结合部分相关的生物材料，所述生物材料为A1)至A8)中的任一种：
6.根据权利要求5所述的生物材料，其特征在于，A1)所述核酸分子包括如B1)或B2)所述的DNA分子：
7.一种用于检测青蒿琥酯的产品，其特征在于，包括如权利要求1-4任一项所述的单链抗体或其抗原结合部分。
8.权利要求1-4任一项所述的单链抗体或其抗原结合部分、权利要求5-6任一项所述的生物材料或权利要求7所述的产品在C1)或C2)中的应用：
9.一种检测青蒿琥酯或青蒿琥酯含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
10.一种如权利要求1-4任一所述的单链抗体或其抗原结合部分的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：通过权利要求5-6任一项中所述的重组生物细胞表达得到。
...
【技术特征摘要】
1.一种青蒿琥酯的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区均含有3个互补决定区cdr1、cdr2、cdr3；
2.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:15所示。
3.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分的重链可变区和轻链可变区通过连接肽相连；所述连接肽氨基酸序列如seqidno:25所示。
4.根据权利要求1所述的单链抗体或抗原结合部分，其特征在于，所述单链抗体或其抗原结合部分的氨基酸序列如seq id no.10所示。
5.与权...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭素琴，吴锡群，张发，代园园，卢焯甄，李建平，
申请(专利权)人：五邑大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。