【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物化学和药物制剂，具体涉及兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮及其应用。
技术介绍
1、细胞中的线粒体作为有氧呼吸产生atp的主要场所，是体内重要的细胞器之一，常被用于早期细胞毒性、氧化应激、细胞凋亡等研究中。线粒体活性的降低与机能失调，已被证实与癌症、衰老、神经退行性疾病(如阿尔兹海默症、帕金森病等)、脑卒中缺血缺氧、线粒体肌病等密切相关。不仅如此，线粒体功能障碍会导致线粒体基质扩张，线粒体外膜褶皱和表面积减少，增加易破裂倾向，导致活性氧(ros)和mtdna生成增加、膜电位下降(δψm)、细胞色素c释放到细胞质中，导致并加剧nlrp3炎性小体过度活化。由此可见，线粒体损伤和线粒体ros的产生是炎性小体nlrp3激活的上游事件。
2、炎症小体是因外源性微生物入侵或机体对内源性损伤信号的响应而形成，是由nod样受体蛋白、asc(凋亡相关点状蛋白)和casp1(半胱氨酸天冬氨酸酶-1)组成的细胞质超分子复合物。目前报道的炎症小体类型共有十余种，其中nlrp3炎症小体(nod样受体3)研究最深入，主要分布于巨噬细胞、树突状细胞中，与感染性疾病、体内损伤相关，且与免疫系统疾病关联性最大。
3、nlrp3炎症小体是一种多蛋白复合物，由nlrp3(nacht结构域，富含亮氨酸的重复序列和含pyrin-3)、asc(含有card的凋亡相关斑点样蛋白)和pro casp1(半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶1，casp1)组成。nlrp3炎症小体的组装促进casp1的激活，并且无活性的前体
4、鸡脚参(orthosiphon wulfenioides)，是唇形科鸡脚参属植物，具有清肺润燥、祛风除湿、益阴敛汗、镇痛化积、接骨生肌的功能，用于风湿痛、咳嗽、消化不良、食积、虚弱头晕、虚汗、脉管炎及骨折的治疗。鸡脚参根醇提物的抗炎、止咳作用明显，急性毒性较小，具体表现为延长二氧化硫引起的小白鼠咳嗽的潜伏期，对大鼠蛋清性足肿胀、小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用(罗禹，丁立生，田军，吴锷凤.鸡脚参醇提物药理活性研究.天然产物研究与开发.2003，15，216-218)。鉴于线粒体损伤和炎症小体过度激活对人体健康有着广泛的影响和威胁，仍然缺乏安全有效的药物，且线粒体损伤可加剧炎症小体过度激活，因此，从中草药和天然产物中开发抗线粒体损伤和抗炎药物具有很大的治疗前景和应用潜力。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮及其应用。具体为提供了兼具逆转线粒体损伤和抗炎活性的鸡脚参酮l-w(1-12)二萜类化合物及其用途。鸡脚参酮l-w具有新颖的高氧化度的松香烷二萜骨架结构，不仅能够抑制j774a.1巨噬细胞ldh的生成，发挥明显的抗炎活性，而且还保护和修复受损j774a.1细胞的线粒体功能，稳定线粒体跨膜电位，防止细胞凋亡。在20μm浓度下，鸡脚参酮l-w不仅能够有效地抑制j774a.1巨噬细胞由脂多糖诱导、尼日利亚菌素刺激引发的炎性ldh的释放，ldh释放率均小于50％；还显著提高炎性诱导的j774a.1巨噬细胞的线粒体跨膜电位，红/绿荧光强度信号比显著上升。鸡脚参酮l(1)抗炎、抗线粒体损伤的作用尤为突出。鸡脚参酮l(1)具有显著的ldh抑制活性，ic50值为5.81±0.31μm，能够通过nlrp3信号路通抑制炎症小体过度激活，阻止由nlrp3炎症小体活化引发的casp1的加工成熟，阻断了无活性的前体pro-il-1β经由casp1蛋白水解成具有活性成熟的il-1β炎性因子，同时还减少了膜成孔蛋白gsdmd-nt(无活性的成孔因子gsdmd经casp1切割而来)的产生和膜孔的形成，进一步阻断il-1β从膜孔向胞外释放。鸡脚参酮l(1)在2.5-10μm剂量下显著增加jc-1聚集体产生的红/橙色荧光，减少绿色荧光，说明该化合物能有效地逆转线粒体损伤，保持线粒体跨膜电位。
2、本专利技术的目的是通过如下的技术方案得以实现的：
3、兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，所述鸡脚参酮的结构式如下式1-12所示：
4、
5、所述鸡脚参酮具有高度氧化的松香烷二萜结构。
6、进一步地，所述鸡脚参酮通过提取分离或人工合成获得。
7、进一步地，在20μm浓度下，鸡脚参酮式1-12化合物能够有效地抑制j774a.1巨噬细胞由脂多糖诱导、尼日利亚菌素刺激引发的炎性ldh的释放，ldh释放率均小于50％；
8、在20μm浓度下，鸡脚参酮式1-12化合物显著提高炎性诱导的j774a.1巨噬细胞的线粒体跨膜电位，红/绿荧光强度信号比显著上升；
9、鸡脚参酮式1化合物具有显著的ldh抑制活性，ic50值为5.81±0.31μm，能够通过nlrp3信号路通抑制炎症小体过度激活，阻止由nlrp3炎症小体活化引发的casp1的加工成熟，阻断了无活性的前体pro-il-1β经由casp1蛋白水解成具有活性成熟的il-1β炎性因子，同时还减少了膜成孔蛋白gsdmd-nt的产生和膜孔的形成，进一步阻断il-1β从膜孔向胞外释放；
10、鸡脚参酮式1化合物在2.5-10μm剂量下剂量依赖性地增加jc-1聚集体产生的红/橙色荧光，并减少绿色荧光，显著降低线粒体膜通透性，减少线粒体跨膜电位的耗散，稳定线粒体功能。
11、上述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用。
12、进一步地，所述药物组合物包括鸡脚参酮式1-12化合物中的一种以上。
13、进一步地，所述药物组合物为预防或治疗线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体介导的疾病的药物组合物。
14、进一步地，所述药物组合物为治疗癌症、神经退行性疾病、类风湿性关节炎、痛风、克罗恩病、冷吡啉综合征、ii型糖尿病、脑卒中、线粒体肌病的药物组合物；
15、更优选地，所述神经退行性疾病包括阿尔兹海默症、帕金森病。
16、进一步地，所述药物组合物的剂型包括固体制剂、半固体制剂、液体制剂、气体制剂。
17、更优选地，所述固体制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂，散剂，膜剂；
18、更优选地，所述半固体制剂包括软膏剂、眼膏剂、凝胶剂、栓剂、滴丸；
19、更优选地，所述液体制剂包括注射剂、洗剂、滴眼剂；
【技术保护点】
1.兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，所述鸡脚参酮的结构式如下式1-12所示：
2.根据权利要求1所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，所述鸡脚参酮通过提取分离或人工合成获得。
3.根据权利要求1所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，在20μM浓度下，鸡脚参酮式1-12化合物能够有效地抑制J774A.1巨噬细胞由脂多糖诱导、尼日利亚菌素刺激引发的炎性LDH的释放，LDH释放率均小于50％；
4.根据权利要求1-3任一项所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用。
5.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物包括鸡脚参酮式1-12化合物中的一种以上。
6.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，其特征在于，所述药物组合物
7.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，其特征在于，所述药物组合物为治疗癌症、神经退行性疾病、类风湿性关节炎、痛风、克罗恩病、冷吡啉综合征、II型糖尿病、脑卒中、线粒体肌病的药物组合物；所述神经退行性疾病包括阿尔兹海默症、帕金森病。
8.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括固体制剂、半固体制剂、液体制剂、气体制剂。
9.根据权利要求8所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，其特征在于，所述固体制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂，散剂，膜剂；
10.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述兼具逆转线粒体损伤和抑制NLRP3炎症小体过度激活的鸡脚参酮式1-12化合物中的一种以上。
...【技术特征摘要】
1.兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，所述鸡脚参酮的结构式如下式1-12所示：
2.根据权利要求1所述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，所述鸡脚参酮通过提取分离或人工合成获得。
3.根据权利要求1所述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮，其特征在于，在20μm浓度下，鸡脚参酮式1-12化合物能够有效地抑制j774a.1巨噬细胞由脂多糖诱导、尼日利亚菌素刺激引发的炎性ldh的释放，ldh释放率均小于50％；
4.根据权利要求1-3任一项所述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用。
5.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，所述药物组合物包括鸡脚参酮式1-12化合物中的一种以上。
6.根据权利要求4所述兼具逆转线粒体损伤和抑制nlrp3炎症小体过度激活的鸡脚参酮在制备药物组合物中的应用，...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘美凤，涂文超，李晓莉，杨鹏云，肖伟烈，张兴杰，张芮菡，孔苑琳，李博，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：
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