【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于肿瘤治疗，涉及一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/sers双模态生物探针及其制备方法。
技术介绍
1、胰腺癌是一种高度恶性肿瘤，由于其特殊的病生理特点，约80％的患者在首次发现时已是中晚期，无法进行根治性手术治疗；而放化疗和靶向药物治疗也因肿瘤周边存在大量的纤维结缔组织，药物难以到达肿瘤区域发挥作用，导致患者5年生存率低于10％，因此胰腺癌的早期精准诊断对于提升患者的生存率至关重要。传统胰腺癌诊断方法有血液学、影像学和病理学检测。其中血液肿瘤标志物carbohydrate antigen 19-9(ca19-9)是最为常用的检测指标，但是其检测灵敏度和特异度不高；而影像学检查则存在电离辐射、操作流程复杂的缺点；此外，组织病理学检测也存在创伤大、并发症多的问题。因此，开发出一种针对胰腺癌细胞具有早期精准识别和高效检测的新方法是非常重要的。表面增强拉曼光谱(sers)因具有超高灵敏度、良好的重复性和选择性等优点，在癌症诊断领域受到极大关注。通过构建可靠的sers生物探针，可以捕获和识别胰腺癌细胞，从而实现精确诊断，为胰腺癌的精准早期诊断提供重要参考。但是单一的sers生物探针检测方式存在一定的局限性，比如血液中普遍存在的白细胞对sers精准检测肿瘤细胞产生了挑战，联合荧光检测技术可以很好地应对此类挑战的同时进一步提升检测的准确性。因此sers/荧光双模态生物探针是未来sers生物探针的重要发展方向之一。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有技术中出现的不足，提供一种用于胰腺癌早
2、本专利技术的一个目的通过以下技术方案来实现：
3、一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/sers双模态生物探针，包括多壁碳纳米管(mwcnt)、聚乙二醇、贵金属纳米粒子、拉曼信号分子、聚多巴胺(pda)、荧光素标记的抗egfr(表皮生长因子受体epidermal growth factor receptor)抗体；
4、其中，聚乙二醇包覆在多壁碳纳米管表面，贵金属纳米粒子负载在包覆有聚乙二醇的多壁碳纳米管上。
5、所述荧光/sers双模态生物探针指的是集荧光和sers双模态功能于一体的生物探针。
6、优选地，所述聚乙二醇的分子量为200～100000，进一步优选为500～50000。
7、优选地，所述贵金属为金、银、铂、铜中的一种或多种。
8、进一步优选，所述贵金属为金。
9、优选地，所述贵金属纳米粒子的平均粒径为1～300nm。进一步优选，所述贵金属纳米粒子的平均粒径为1～200nm；再进一步优选为1～50nm。
10、拉曼信号分子指那些在拉曼光谱分析中表现出显著拉曼散射信号的化合物。可列举为4-甲基苯甲酸(4-mba)、对硝基苯甲酸、苯甲醛、4-硝基苯胺、金刚烷、吡啶、碘化钠、4,4'-二氯二苯砜、苯酚、2-硝基苯甲醚、三硝基苯等中的一种或多种。
11、优选地，所述拉曼信号分子为4-甲基苯甲酸。
12、荧光素标记的抗egfr抗体指的是荧光素与抗egfr抗体连接形成的复合物，其中抗egfr抗体能特异性识别和结合到细胞表面的表皮生长因子受体上，荧光素作为荧光标记物共价连接到抗egfr抗体上。荧光素标记的抗egfr抗体与细胞结合后，在特定波长的激发光下能够发出荧光，实现荧光成像。
13、所述荧光素可列举为异硫氰酸荧光素(fitc)、罗丹明系列、alexa fluor系列、cydyes系列中的一种或多种。
14、本专利技术的第二个目的通过以下技术方案来实现：
15、一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/sers双模态生物探针的制备方法，包括以下步骤：
16、s1、在多壁碳纳米管水分散液中加入聚乙二醇，超声，得到mwcnt-peg；加入氯金酸溶液后进行超声，再加入柠檬酸钠溶液，加热反应，固液分离后，获得mwcnt-peg-au；
17、s2、mwcnt-peg-au悬浮液中加入拉曼信号分子，得到mwcnt-peg-au-拉曼信号分子；
18、s3、在mwcnt-peg-au-拉曼信号分子悬浮液中加入氨水，再加入盐酸多巴胺溶液反应，固液分离后，获得mwcnt-peg-au-拉曼信号分子-pda；
19、s4、mwcnt-peg-au-拉曼信号分子-pda悬浮液中加入荧光素标记的抗egfr抗体，获得mwcnt-peg-au-拉曼信号分子-pda-荧光素标记的抗egfr抗体。
20、优选地，超声的功率为10～800w，超声的时间为0.5～500min。进一步地，超声的频率为10～100khz。进一步优选，超声的功率为50～500w，例如可以为50、80、100、120、150、180、200、250、300、350、400、450或500w，但不限于所列举的数值；超声的时间为2～100min，例如可以为2、5、8、10、15、20、25、30、35、50、70、90或100min，但不限于所列举的数值。
21、优选地，多壁碳纳米管与聚乙二醇的质量比为1:1～100。
22、步骤s1中，氯金酸溶液为氯金酸溶于水中形成，作为列举，氯金酸溶液的浓度为0.1～1000mg/ml；优选地，所述氯金酸溶液的浓度为0.5～200mg/ml。
23、步骤s1中，柠檬酸钠溶液为柠檬酸钠溶于水中形成，作为列举，柠檬酸钠溶液的浓度为0.1～1000mg/ml；优选地，所述柠檬酸钠溶液的浓度为0.5～200mg/ml。
24、优选地，多壁碳纳米管与氯金酸的质量比为1:0.01～100；进一步优选，多壁碳纳米管与氯金酸的质量比为1:0.1～10，例如可以为1:0.1、1:0.5、1:1、1:2、1:5、1:8或1:10，但不限于所列举的数值。
25、优选地，氯金酸与柠檬酸钠的质量比为1:0.01～100；进一步优选，氯金酸与柠檬酸钠的质量比为1:1～20，例如可以为1:1、1:2、1:4、1:6、1:8、1:10、1:12、1:15、1:18或1:20，但不限于所列举的数值。
26、优选地，步骤s1的加热反应温度为80～200℃，时间为1～60min；进一步优选，步骤s1的加热反应温度为120～180℃，时间为2～50min。
27、步骤s2的mwcnt-peg-au悬浮液为步骤s1的mwcnt-peg-au分散于溶剂中形成，溶剂可以为水、甲醇、乙醇、丙酮中的一种或多种。
28、优选地，步骤s2中，mwcnt-peg-au与拉曼信号分子的质量比为1～1000:1；进一步优选，mwcnt-peg-au与拉曼信号分子的质量比为8～800:1。
29、优选地，步骤s2中，mwcnt-peg-au悬浮液中加入拉曼信号分子后，搅拌混合10～100min，然后避光放置1～100h，进一步为2～50h。
30、优选地，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/SERS双模态生物探针，其特征在于，包括多壁碳纳米管、聚乙二醇、贵金属纳米粒子、拉曼信号分子、聚多巴胺、荧光素标记的抗EGFR抗体；
2.根据权利要求1的荧光/SERS双模态生物探针，其特征在于，所述聚乙二醇的分子量为200～100000；
3.一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/SERS双模态生物探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，多壁碳纳米管与氯金酸的质量比为1:0.01～100；
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，超声的功率为10～800W，
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，多壁碳纳米管与聚乙二醇的质量比为1:1～100。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中，MWCNT-PEG-Au与拉曼信号分子的质量比为1～1000:1；
8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中，MWCNT-PEG-Au-拉曼信号分子与盐酸多巴胺的质量比为1:0.1～100。<...
【技术特征摘要】
1.一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/sers双模态生物探针，其特征在于，包括多壁碳纳米管、聚乙二醇、贵金属纳米粒子、拉曼信号分子、聚多巴胺、荧光素标记的抗egfr抗体；
2.根据权利要求1的荧光/sers双模态生物探针，其特征在于，所述聚乙二醇的分子量为200～100000；
3.一种用于胰腺癌早期诊断的荧光/sers双模态生物探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，多壁碳纳米管与氯金酸的质量比为1:0.01～100；
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，超声的功率为10～800w，
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴爱国，蒋天安，林杰，徐磊，谢育娇，任文智，张晨光，谢丽婷，刘玥，楼文婧，张程越，
申请(专利权)人：宁波慈溪生物医学工程研究所，
类型：发明
国别省市：
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