一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针及其制备方法与应用技术

技术编号：42442991 阅读：21 留言：0更新日期：2024-08-16 16:50

本发明专利技术公开了一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针及其制备方法与应用，涉及特异性分子靶向诊断试剂技术领域。其制备方法如下：在2‑(7‑氮杂苯并三氮唑)‑N,N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸酯、碱及极性溶剂存在下混合N‑(3‑氯‑2‑氟苯基)‑7‑甲氧基‑6‑(哌啶‑4‑氧)喹唑啉‑4‑胺和X；将产物滴入水中；将混悬液使用有机溶剂萃取，干燥后浓缩；将浓缩物脱保护基，再经柱层析得中间体化合物；将得到的中间体化合物加入2‑(7‑氮杂苯并三氮唑)‑N,N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸酯、碱、Y及极性溶剂，纯化后即可。制备的近红外荧光探针能达到活体诊断的作用。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种特异性分子靶向诊断试剂，具体是一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针及其制备方法与应用。

技术介绍

1、随着经济社会的高速发展，人们生活环境和生活习惯也发生了翻天覆地的变化，生活节奏的加快，工作压力的增加，高油高脂饮食习惯的改变，直接影响了人们的身体健康。癌症的诱发原因跟生活习惯及生存环境息息相关，而癌症在目前医疗条件下无法治愈，严重的危害着人类生命安全。在世界上每个国家，癌症是导致死亡的主要原因，也是提高预期寿命的重要障碍。

2、目前针对癌症患者的治疗方式主要有化疗和手术切除两种方式，癌症患者的化疗往往给患者带来严重的不良反应，如呕吐、腹泻、疼痛等往往带给患者极大的痛苦；相比于化疗，对大多数实体瘤而言，手术治疗能更有效的清除病灶，提高患者生存期。传统的外科手术完全依赖于外科医生的经验以及触觉，对肿瘤边界的判定缺乏依据，因此会选择尽可能多的切除组织以避免肿瘤的复发。随着分子影像发展，spect/ct、pet/ct、核磁共振（mri）、超声成像（usi）以及荧光成像等的出现，不仅弥补了传统外科对肿瘤定位的不足，而且极大的提高了手术的成功率，延长患者的生存期。特别是近红外荧光成像的实时动态成像应用于临床手术，为外科医生提供更清晰的视野，精准地分辨肿瘤与正常组织边界，尽可能少的切除正常组织，使手术影响尽可能降至最低。目前已有商业化的荧光手术导航成像系统应用于临床，在未来外科手术中具有巨大的应用前景，对于肿瘤的精准诊断和切除具有重要意义。

3、用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红

4、人表皮生长因子受体（egfr、her2、her3、her4）在肝癌、卵巢癌、肺癌等多种肿瘤中都有不同程度的过表达现象，针对表皮生长因子受体设计一种特异性的靶向近红外荧光造影剂，具有重要的临床价值。喹唑啉类小分子抑制剂在临床肿瘤治疗领域中具有重要的意义，因此以喹唑啉类小分子化合物为靶向配体设计、合成特异性肿瘤靶向荧光探针，同样具有重要的开发价值，应用于临床肿瘤外科荧光引导肿瘤手术切除。

5、综上所述，随着医学影像技术的发展，近红外荧光成像技术在肿瘤外科手术中的应用前景广阔。特异性靶向肿瘤荧光探针的开发将进一步提高肿瘤手术的成功率，降低术后复发率，延长患者的生存期。喹唑啉类小分子化合物作为靶向配体设计合成的特异性肿瘤靶向荧光探针，具有重要的临床应用价值。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针及其制备方法与应用，制备的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针在正常组织内能迅速清除，而在肿瘤部位长时间滞留，从而能达到活体诊断的作用，具备一定的临床应用前景，应用于临床术中导航。

2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：

3、一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针，

4、如式（i）所示的化合物或其药学可接受的盐：

5、（i）

6、其中：

7、x是连接分子，选自无、聚乙二醇、聚甘氨酸链，且

8、y是在近红外范围内具有荧光激发和发射光谱的染料分子；

9、其中化合物y具有下式（ii）的结构：

10、（ii），

11、其中：

12、r1、r2选自(ch2)nso3h，n=3或4；

13、z选自-s-ch2ch2co-或-o-ph-ch2ch2co-。

14、如所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

15、（1）在2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱及极性溶剂存在下混合n-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-氧)喹唑啉-4-胺和x；

16、（2）将步骤（1）得到的产物滴入水中，形成混悬液；

17、（3）将步骤（2）得到的混悬液使用有机溶剂萃取，干燥后浓缩，回收浓缩物；

18、（4）将步骤（3）得到的浓缩物脱保护基，再经柱层析得中间体化合物；

19、（5）将步骤（4）得到的中间体化合物加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱、y及极性溶剂，室温下搅拌得到产生的混合物；

20、（6）将步骤（5）得到的混合物纯化后得到用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针。

21、优选的，所述步骤（1）中2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱、n-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-氧)喹唑啉-4-胺、x、极性溶剂的摩尔比为3：5：1：1.2：10。

22、优选的，所述步骤（5）中的中间体化合物、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱、y及极性溶剂的摩尔比为1：3：5：1.2：10。

23、优选的，其中极性溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、n-甲基吡咯烷酮的一种或多种。

24、优选的，其中碱为三乙胺、二异丙基乙胺的一种或两种。

25、如所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针在制备荧光造影剂中的应用。

26、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：

27、本专利技术提供的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针，其通过简单的化学合成方法即可快速制备，具体为反应物n-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-氧)喹唑啉-4-胺和x在有机合成试剂2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯和碱的作用下，以及在极性溶剂的溶解和介导下进行亲核取代反应，其中2-(氮杂苯并三氮唑)结构作为活化剂或催化剂来促进反应进程。经测试，涉及的主动靶向表皮生长因子的探针具有肿瘤主动靶向能力、水溶性好、肿瘤滞留时间长、正常组织不蓄积等优点，在临床外科术中荧光引导肿瘤手术切除等领域具有潜在的应用潜力。例如对于结直肠癌诊断：在结直肠癌诊断中，医生可以使用本专利技术提供的主动靶向表皮生长因子用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针来检测结直肠癌组织中表皮生长因子受体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针，其特征在于：

2.如权利要求1所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于：

3.根据权利要求2所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱、N-(3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(哌啶-4-氧)喹唑啉-4-胺、X、极性溶剂的摩尔比为3：5：1：1.2：10。

4.根据权利要求2所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中的中间体化合物、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、碱、Y及极性溶剂的摩尔比为1：3：5：1.2：10。

5.根据权利要求2所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于：

6.根据权利要求2所述的用于主动靶向表皮生长因子受体检测的近红外荧光探针的制备方法，其特征在于：