【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于害虫防治领域，具体涉及一种新型的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物、及其在防治害虫、提高农作物生长中的应用。
技术介绍
1、农作物包括粮食作物﹑经济作物，尤其是粮食作物关系到人们日常生活必需品。玉米作为我国种植面积最大的粮食作物，其常年种植面积在4000万hm2以上，年总产量2.5亿t以上，在确保粮食安全中发挥了无可替代的作用。然而病虫害的发生是威胁玉米安全生产的重要因素，尤其是玉米螟和草地贪夜蛾等鳞翅目害虫为害带来的减产危害。亚洲玉米螟(以下简称“玉米螟”)是一直为害我国玉米的重大害虫之一。2019年，全球重大迁飞性害虫草地贪夜蛾入侵我国，仅一年就完成了在我国入侵、定殖和为害的过程。这两种害虫均可为害玉米叶片、茎秆、穗轴和籽粒等，严重影响玉米的产量和品质。2023年3月，这两种害虫均被农业农村部列为《一类农作物病虫害名录》，可见其为害之重。因此，做好玉米螟、草地贪夜蛾等害虫的防控是确保玉米产量和粮食安全的重要环节。
2、目前玉米螟和草地贪夜蛾的防治主要依赖化学防控，化学防治是有效的害虫应急防控方法，但也不可避免的带来了农药残留、环境污染以及抗药性的问题。因此，亟待探索生态友好、不易产生抗性、绿色安全的玉米害虫防控技术。昆虫病原真菌杀虫谱广，致病性强，且对环境和人畜无害，一直是玉米螟、草地贪夜蛾等玉米害虫防治的研究热
技术实现思路
1、本申请的目的在于提供一种氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物(go-b094)，通过深入研究发现，该复合物兼具防治害虫、提高农作物生长中
2、本申请的目的在于提供一种氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，所述氧化石墨烯(go)主要成分为然石墨粉、浓硫酸、五氧化二磷、重铬酸钾和高锰酸钾，所述球孢白僵菌(b094)在氧化石墨烯上吸附，所述球孢白僵菌的保藏号为：cgmcc no.19034。
3、球孢白僵菌孢子悬浮液的制备方法包括：挑取活化培养后的球孢白僵菌株孢子粉，与吐温灭菌溶液混合，用组织研磨器将其研磨均匀，涡旋振荡器充分混匀后测定出孢子含量，最后用吐温灭菌溶液稀释，调配出所需浓度的孢子悬浮液；优选的，用一次性无菌接种环挑取活化培养后的菌株孢子粉，与0.05％吐温-80灭菌溶液混合，用玻璃组织研磨器将其研磨均匀，涡旋振荡器充分混匀后采用25中格血球计数板测定出孢子含量，计数三次，取平均值，最后用0.05％吐温-80灭菌溶液稀释，调配出所需浓度的孢子悬浮液。
4、配置氧化石墨烯分散液；配置球孢白僵菌孢子悬浮液；球孢白僵菌孢子悬浮液和氧化石墨烯分散液以体积为4：1的配比混匀后黑暗的室温下进行搅拌，配置得到复合物的水剂；优选的，方法包括：配置氧化石墨烯分散液(浓度100μg/ml)；配置球孢白僵菌孢子悬浮液(浓度1×108个/ml)；球孢白僵菌孢子悬浮液和氧化石墨烯分散液以体积为4：1的配比混匀后在1200rpm的磁力搅拌器上在黑暗的室温下进行搅拌24h，配置得到复合物的水剂。
5、进一步，所述球孢白僵菌孢子悬浮液和氧化石墨烯分散液以体积为4：1的配比混匀；
6、优选的，所述氧化石墨烯为1-100ug/ml氧化石墨烯溶液；优选的，所述氧化石墨烯为20-100ug/ml氧化石墨烯；所述球孢白僵菌孢子悬浮液为1×108个/ml球孢白僵菌孢子。
7、进一步，所述氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物的制备方法包括：用无菌溶液将球孢白僵菌的分生孢子配制成孢子悬浮液；配置氧化石墨烯分散液，将球孢白僵菌孢子悬浮液与氧化石墨烯分散液混合，得到混合溶液；将混合溶液用磁力搅拌器在黑暗中均匀搅拌，生成氧化石墨烯-球孢白僵菌复合溶液，冷冻干燥备用；
8、优选的，制备方法还包括对氧化石墨烯-球孢白僵菌的清洗，具体步骤为：将所述生成氧化石墨烯-球孢白僵菌复合溶液离心弃上清，加入戊二醛固定液，低温固定，用磷酸盐缓冲液冲洗，依次用50％-100％乙醇进行梯度脱水，脱水结束后，用乙醇－叔丁醇溶液置换，最后用100％叔丁醇置换两次，处理完成后将样品进行冷冻干燥备用。
9、进一步，所述球孢白僵菌吸附在氧化石墨烯片上，使氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物表面呈现粗糙的多颗粒形状。
10、上述氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在提高农作物生长中的应用，优选的，所述农作物包括谷类作物和/或豆类作物；更优选的，所述农作物包括下列中的一种或几种：小麦、水稻、玉米、大豆、蚕豆、豌豆、绿豆。
11、进一步，将农作物种子表面消毒后，浸泡在氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干后播种。
12、进一步，氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在提高农作物株高、叶长和/或叶面积中的应用。
13、一种种子处理方法，包括：将农作物种子表面消毒后，浸泡在上述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干。经上述方法处理后播种的农作物长势和抗性更好。优选的，农作物包括下列中的一种或几种：小麦、水稻、玉米、大豆、蚕豆、豌豆、绿豆。
14、上述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在防治害虫中的应用。
15、进一步，所述害虫为玉米害虫；优选的，所述害虫包括下列中的一种或几种：玉米螟、草地贪夜蛾、蓟马、小地老虎、黄地老虎、蝼蛄、蛴螬、金针虫、玉米耕葵粉蚧、玉米旋心虫、草地螟、稻纵卷叶螟、斜纹夜蛾、玉米夜蛾、黏虫、黄腹灯蛾、红缘灯蛾、褐足角胸叶甲、斑须蝽、赤须盲蝽、牧草盲蝽、三点斑叶蝉、大青叶蝉、玉米蚜、截形叶螨、朱砂叶螨、亚洲玉米螟、大螟、桃蛀螟、棉铃虫、白星花金龟、小青花金龟、双斑莹叶甲、稻绿蝽。
16、进一步，所述防治方法包括：将农作物种子表面消毒后，浸泡在氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干后播种。种植得到的农作物具有抗虫特性。
17、一种提高农作物长势和/或抗性的方法，包括：将农作物种子表面消毒后，浸泡在上述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干后播种。
18、本专利技术的技术优势：
19、1本申请提供一种氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物(go-b094)，复合物中的球孢白僵菌是申请人团队筛选出的对玉米螟和草地贪夜蛾幼虫具有较好致病力的球孢白僵菌菌株，以氧化石墨烯(go)作为载体，提高球孢白僵菌在玉米体内的定殖效率及对玉米螟、草地贪夜蛾的防控效果；
20、2本申请实验表明，100ug/ml浓度下的氧化石墨烯对球孢白僵菌孢子萌发率无影响，故而需要控制氧化石墨烯浓度，此外，20ug/ml-100ug/ml的氧化石墨烯对球孢白僵菌孢子具有紫外保护作用，故而优选氧化石墨烯为20-100ug/ml氧化石墨烯，球孢白僵菌为1×108个/ml球孢白僵菌孢子；
21、3本申请实验表明氧化石墨烯-球孢白僵菌复配可显著提高球孢白僵菌对玉米螟和草地贪夜蛾的致病力，且对玉米螟效果更明显；
22、4本申请实验表明氧化石墨烯-球孢白僵菌浸种处理能显著提高玉米的株高、叶长、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，所述氧化石墨烯主要成分为然石墨粉、浓硫酸、五氧化二磷、重铬酸钾和高锰酸钾，其特征在于，所述球孢白僵菌在氧化石墨烯上吸附，所述球孢白僵菌的保藏号为：CGMCC NO.19034。
2.根据权利要求1所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述氧化石墨烯为1-100ug/ml氧化石墨烯溶液；所述球孢白僵菌为1×108个/mL球孢白僵菌孢子；
3.根据权利要求2所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物的制备方法包括：用无菌溶液将球孢白僵菌的分生孢子配制成孢子悬浮液；配置氧化石墨烯溶液，将球孢白僵菌孢子悬浮液与氧化石墨烯溶液混合，得到混合溶液；将混合溶液用磁力搅拌器在黑暗中均匀搅拌，生成氧化石墨烯-球孢白僵菌复合溶液，冷冻干燥备用；
4.根据权利要求1所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述球孢白僵菌吸附在氧化石墨烯片上，使氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物表面呈现粗糙的多颗粒形状。
5.权利要求1-4任意一项所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在提高
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在提高农作物株高、叶长和/或也面积中的应用。
7.权利要求1-4任意一项所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在防治害虫中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述害虫为玉米害虫；优选的，所述害虫包括下列中的一种或几种：玉米螟、草地贪夜蛾、蓟马、小地老虎、黄地老虎、蝼蛄、蛴螬、金针虫、玉米耕葵粉蚧、玉米旋心虫、草地螟、稻纵卷叶螟、斜纹夜蛾、玉米夜蛾、黏虫、黄腹灯蛾、红缘灯蛾、褐足角胸叶甲、斑须蝽、赤须盲蝽、牧草盲蝽、三点斑叶蝉、大青叶蝉、玉米蚜、截形叶螨、朱砂叶螨、亚洲玉米螟、大螟、桃蛀螟、棉铃虫、白星花金龟、小青花金龟、双斑莹叶甲、稻绿蝽。
9.一种提高农作物长势和/或抗性的方法，其特征在于，所述方法包括：将农作物种子表面消毒后，浸泡在权利要求1-4任意一项所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干后播种。
10.一种农作物种子处理方法，其特征在于，所述方法包括：将农作物种子表面消毒后，浸泡在权利要求1-4任意一项所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物悬浮液中，浸泡1-2天，晾干；优选的，农作物包括下列中的一种或几种：小麦、水稻、玉米、大豆、蚕豆、豌豆、绿豆。
...【技术特征摘要】
1.一种氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，所述氧化石墨烯主要成分为然石墨粉、浓硫酸、五氧化二磷、重铬酸钾和高锰酸钾，其特征在于，所述球孢白僵菌在氧化石墨烯上吸附，所述球孢白僵菌的保藏号为：cgmcc no.19034。
2.根据权利要求1所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述氧化石墨烯为1-100ug/ml氧化石墨烯溶液；所述球孢白僵菌为1×108个/ml球孢白僵菌孢子；
3.根据权利要求2所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物的制备方法包括：用无菌溶液将球孢白僵菌的分生孢子配制成孢子悬浮液；配置氧化石墨烯溶液，将球孢白僵菌孢子悬浮液与氧化石墨烯溶液混合，得到混合溶液；将混合溶液用磁力搅拌器在黑暗中均匀搅拌，生成氧化石墨烯-球孢白僵菌复合溶液，冷冻干燥备用；
4.根据权利要求1所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物，其特征在于，所述球孢白僵菌吸附在氧化石墨烯片上，使氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物表面呈现粗糙的多颗粒形状。
5.权利要求1-4任意一项所述的氧化石墨烯-球孢白僵菌复合物在提高农作物长势中的应用，优选的，所述农作物包括谷类作物和/或豆类作物；
6.根据权利要求5所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭井菲，展昭凤，王秀平，涂雄兵，冯士骞，张永军，王振营，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：
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