【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业生物，具体涉及一种球孢白僵菌菌株lntl-1及其在西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和/或烟粉虱生物防治上的应用。
技术介绍
1、在农业生产过程特别是蔬菜种植中，有多种害虫为害，危害作物较重的有西花蓟马frankliniella occidentalis(pergande)、美洲斑潜蝇liriomyza sativae(blanchard)、番茄潜叶蛾tuta absoluta(meyrick)、烟粉虱bemisia tabaci(gennadius)等世界性入侵害虫，这些害虫寄主广、食性杂、防治难度大，不仅能直接为害寄主植物，导致植物生长不良，造成作物减产，甚至绝收；还能传播多种植物病毒，造成大面积的病毒病，导致巨大的农业经济损失。
2、目前应用化学药剂防治较多，害虫对多种药剂均表现出高水平耐药性，导致防治效率下降，化学农药剂量增加。
3、昆虫病原真菌对寄主的侵染一般要经历10个阶段，即分生孢子的附着，萌发，穿透表皮，增殖，产生毒素，寄主死亡，菌丝入侵所有器官，菌丝穿透表皮，产生分生孢子，分生孢子扩散。球孢白僵菌(beauveria bassiana)作为一种优良的虫生真菌，对多种害虫具有高致病性，具有对人畜无害、安全、无污染的特点，因此球孢白僵菌被广泛地应用到害虫的综合治理体系中。
技术实现思路
1、本申请结合实际生物防治的经验，不同球孢白僵菌菌株间毒力差异很大，且害虫在接触真菌后到致死前有很长的存活时间，仍然能对作物造成严重为害，因此选
2、本申请提供一种球孢白僵菌(beauveria bassiana(balsamo)vuillemin)菌株lntl-1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmccno.40508，保藏日期为2023年02月27日，属于丛梗孢目，丛梗孢科，球孢白僵菌属。
3、本专利技术还提供一种上述菌株的孢子粉的制备方法，所述制备方法包括将上述菌株进行培养。
4、优选的，所述培养包括以下步骤：
5、1)、制备活化的孢子粉：将球孢白僵菌lntl-1接种于萨氏培养基sday上，所述萨氏培养基sday含有1％的蛋白胨、1％的酵母膏，4％的葡萄糖和2％的琼脂。优选的，培养条件为保持温度25-27℃，培养7-10d,生产出活化的lntl-1的孢子粉。
6、更优选的，所述孢子粉的制备方法进一步包括：
7、将上述活化的lntl-1的孢子粉经过2)、一级种子液培养、3)、二级种子液培养、4)、固相发酵和5)、孢子粉的干燥和收获步骤制备而成。
8、进一步优选的，
9、2)、一级种子液的培养
10、取上述活化的lntl-1的孢子粉，接入萨氏培养液sdy得到种子液，所述萨氏培养液sdy含有1％的蛋白胨、1％的酵母膏，4％的葡萄糖，种子液的初始孢子浓度为1.0×106个·ml-1，在25℃、120r·min-1条件下振荡培养48hr，得到一级种子液。
11、3)、二级种子液的培养
12、将一级种子液按5％的接种量接入萨氏培养液sdy培养液，在7升液体发酵罐中培养。加入发酵液体积的0.5％豆油，培养温度为25-27℃，转速为100-200rpm，初始溶氧量为50％以上。培养40hr后得到二级种子液。
13、4)、固相发酵
14、用开水浸泡大米30分钟，捞出控去多余水份，121℃灭菌30分钟后，按100g大米加入15ml二级种子液的比例接菌，发酵器具为20×30cm的塑料袋。接种后铺放于25-26℃的条件下培养7-10d。
15、5)、孢子粉的干燥和收获
16、固相发酵后的物料置于30℃下干燥3d，再用孢子收获机，例如mycoharvestercompany,uk的收获机，收获孢子粉。
17、本专利技术还提供一种菌株lntl-1的孢子粉，所述孢子粉由上述制备方法制备而成。
18、本专利技术还提供一种上述菌株或孢子粉在制备生防制剂中的应用。
19、优选的，所述菌株或孢子粉和其他的杀虫剂联合应用。
20、本专利技术还提供一种生防制剂，所述生防制剂包括上述菌株或孢子粉。
21、优先的，所述生防制剂还包括其他的杀虫剂。
22、本专利技术还提供一种上述生防制剂在防治靶标昆虫的应用，所述靶标昆虫为西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和/或烟粉虱。
23、本专利技术还提供一种防治靶标昆虫的方法，所述方法包括向易感作物喷洒上述生防制剂，所述靶标昆虫为西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和/或烟粉虱。
24、本专利技术术语“包括”或“包含”是开放式的描述，含有所描述的指定成分或步骤，以及不会实质上影响的其他指定成分或步骤。
25、本专利技术的有益效果：
26、本专利技术筛选得到的菌株lntl-1对四种常见世界性入侵害虫，包括西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和烟粉虱bemisia tabaci(gennadius)的侵染率显著高于其他菌株，可以提高对害虫的致死率，从而减少害虫对农作物的侵害。
27、本专利技术筛选得到的菌株lntl-1对上述四种害虫相对于其他菌株致死时间较短，在侵染率高的同时，致死时间缩短，可以进一步减少害虫对农作物的为害量。
28、本专利技术筛选得到的菌株lntl-1相对于其他菌株有较高的产孢量，从而降低生产成本，最终实现大规模的工业化生产和商业应用。
29、菌株保藏信息：
30、保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)；
31、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；
32、保藏号：cgmcc no.40508；
33、保藏日期：2023年02月27日；
34、分类命名：球孢白僵菌beauveria bassiana
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1.一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana(Balsamo)Vuillemin)菌株LNTL-1，其特征在于，所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.40508，保藏日期为2023年02月27日，属于丛梗孢目，丛梗孢科，球孢白僵菌属。
2.一种菌株LNTL-1的孢子粉的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求1所述的球孢白僵菌(Beauveria bassiana(Balsamo)Vuillemin)菌株LNTL-1进行培养。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述培养包括1)、制备活化的孢子粉：将菌株LNTL-1接种于萨氏培养基SDAY上进行培养，所述萨氏培养基SDAY为1％的蛋白胨、1％的酵母膏，4％的葡萄糖和2％的琼脂孢。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)包括将球孢白僵菌LNTL-1接种于萨氏培养基SDAY上，保持温度25-27℃，培养7-10d，生产出活化的LNTL-1的孢子粉。
5.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，
6.一种菌株LNTL-1的孢子粉，其特征在于，所述孢子粉由权利要求2-5任一制备方法制备而成。
7.权利要求1所述的菌株LNTL-1或权利要求6所述的孢子粉在制备生防制剂中的应用。
8.一种生防制剂，其特征在于，所述生防制剂包括权利要求1所述的菌株LNTL-1或权利要求6所述的孢子粉。
9.权利要求8所述生防制剂在防治靶标害虫的应用，所述靶标害虫为西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和/或烟粉虱。
10.一种防治靶标害虫的方法，所述方法包括向易感作物喷洒权利要求8所述生防制剂，所述靶标害虫为西花蓟马、美洲斑潜蝇、番茄潜叶蛾和/或烟粉虱。
...【技术特征摘要】
1.一种球孢白僵菌(beauveria bassiana(balsamo)vuillemin)菌株lntl-1，其特征在于，所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmccno.40508，保藏日期为2023年02月27日，属于丛梗孢目，丛梗孢科，球孢白僵菌属。
2.一种菌株lntl-1的孢子粉的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求1所述的球孢白僵菌(beauveria bassiana(balsamo)vuillemin)菌株lntl-1进行培养。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述培养包括1)、制备活化的孢子粉：将菌株lntl-1接种于萨氏培养基sday上进行培养，所述萨氏培养基sday为1％的蛋白胨、1％的酵母膏，4％的葡萄糖和2％的琼脂孢。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)包括将球孢白僵菌lntl-1接种于萨氏培养基sday上，保持温...
【专利技术属性】
技术研发人员：王登杰，钟绍忆，梁兴慧，毕司进，王海鸿，
申请(专利权)人：绵阳市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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