【技术实现步骤摘要】
本申请涉及四大家鱼判别或确证，具体涉及判别野生与养殖四大家鱼的脂类代谢标志物及用途。
技术介绍
1、青鱼、草鱼、鲢和鳙，此四大家鱼是我国重要的养殖品种，主要分布于长江流域。长江流域拥有丰富的鱼类生物多样性，然而受水域污染、过度捕捞等影响，长江流域濒危鱼类物种达92种。根据长江现状，我国从2020年起已全面实施“长江十年禁渔”决策，严厉打击市场销售长江捕捞渔获物的违法行为。但是，由于目前国内长江流域野生与养殖水产品难以甄别，进而难以满足“长江禁捕”政策的要求。因此，研发野生与养殖水产品的判别与确证技术，挖掘判别野生与养殖四大家鱼的标志物，并推广应用，是支撑“长江禁捕”政策的可靠手段。
技术实现思路
1、野生与养殖四大家鱼生物学性状接近，现有技术缺乏有效判断野生与养殖的四大家鱼的技术手段问题，本申请收集了大量不同群体来源的野生与养殖四大家鱼的肌肉样本，利用超高通量液相色谱－质谱联用方法，对其进行代谢组学分析发现了其脂类代谢物存在共性的差异及变化，并筛选出了脂类代谢物：十三烷二酸(cas：505-52-2)、丙酰肉碱(cas：17298-37-2)、丁酸(cas：107-92-6)、tiglyl肉毒碱(cas：64681-36-3)、3-羟基异戊酰-l-肉碱(cas：99159-87-2)、丁烯基肉碱(butenylcarnitine，chemspider id：30776694)、5-羟基庚酰肉碱(5-hydroxyheptanoylcarnitine，chebi:88772)、脱氧肉
2、为此，本申请实施例至少公开了以下技术方案：
3、第一方面，实施例公开了代谢标志物，十三烷二酸、丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱、5-羟基庚酰肉碱、脱氧肉碱、磷脂酰胆碱、百里酚-b-d-葡萄糖苷中的至少一种。
4、在第一方面的实施例中，所述代谢标志物包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷中的至少一种。
5、在第一方面的实施例中，所述代谢标志物包括丁酸、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱、脱氧肉碱中的至少一种。
6、在第一方面的实施例中，所述代谢标志物包括丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱中的至少一种。
7、在第一方面的实施例中，所述代谢标志物包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱、5-羟基庚酰肉碱、磷脂酰胆碱中的至少一种。
8、第二方面，实施例公开了用于判别野生青鱼与养殖青鱼的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷中的至少一种。
9、在第二方面的实施例中，所述代谢标志物十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷。
10、第三方面，实施例公开了用于判别野生草鱼与养殖草鱼的代谢标志物，包括丁酸、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱、脱氧肉碱中的至少一种。
11、在第三方面的实施例中，所述代谢标志物包括丁酸、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱和脱氧肉碱。
12、第四方面，实施例公开了用于判别野生鲢与养殖鲢的代谢标志物，包括丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱中的至少一种。
13、在第四方面的实施例中，所述代谢标志物包括丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱和丁烯基肉碱。
14、第五方面，实施例公开了用于判别野生鳙与养殖鳙的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱、5-羟基庚酰肉碱、磷脂酰胆碱中的至少一种。
15、在第五方面的实施例中，所述代谢标志物包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱、5-羟基庚酰肉碱和磷脂酰胆碱。
16、第六方面，实施例公开了试剂组合物，其包含用于检测第一至五方面任一所述代谢标志物的试剂。
17、在第六方面的实施例中，所述试剂包含用于提取受试样本的代谢物的试剂。在一些实施例中，所述试剂包含钢珠和甲醇－水溶液(4:1，v/v)。
18、第七方面，实施例公开了第一至五方面任一所述的代谢标志物和/或用于检测第一至五方面所述的代谢标志物在判别野生与养殖四大家鱼中的用途。
19、第八方面，实施例公开了判别野生青鱼与养殖青鱼的方法。
20、在第八方面的实施例中，所述方法包括测试受试样本中第二方面所述的代谢标志物中各个代谢标志物含量的方法。在一些实施例中，所述受试样本为青鱼的上背部肌肉样本。在一些实施例中，所述各个代谢标志物包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷。
21、在第八方面的实施例中，所述方法还包括：获得第一逻辑回归模型和第一阈值；获得受试样本中多个代谢标志物含量的多个标准化值；将多个所述标准化值输入所述第一逻辑回归模型得到第一野生概率；根据所述第一野生概率与所述第一阈值的大小确定所述受试样本为所述野生青鱼或所述养殖青鱼。在一些实施例中，所述第一逻辑回归模型为：x＝0.245×a+2.762×b+0.474×c-12.299×d+58.108；第一野生概率＝1/(1+e－x)；其中a、b、c、d分别为十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷的标准化值，所述第一野生概率表征受试样本为野生青鱼的概率。在一些实施例中，若所述第一野生概率大于所述第一阈值，则受试样本为野生青鱼。在一些实施例中，若所述第一野生概率小于所述第一阈值，则受试样本为养殖青鱼。
22、在第八方面的实施例中，第一阈值的确定步骤包括：根据收集的肌肉样本的十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷的标准化值作为训练集；以该训练集训练二元逻辑回归模型，分别得到多个所述第一野生概率值；分别计算每一所述第一野生概率值的敏感性(真正例率)和1-特异性(假正例率)，将1-特异性作为横坐标和敏感性作为纵坐标来绘制roc曲线；计算每个第一野生概率对应的约登指数(约登指数＝敏感度+特异度-1)，并获得最大约登指数，所述最大约登指数对应的第一野生概率即为第一阈值。在一些实施例中，第一阈值为0.4998。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、丁酸、Tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-L-肉碱、丁烯基肉碱、5-羟基庚酰肉碱、脱氧肉碱、磷脂酰胆碱、百里酚-b-D-葡萄糖苷中的至少一种。
2.用于判别野生青鱼与养殖青鱼的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、Tiglyl肉毒碱和百里酚-b-D-葡萄糖苷中的至少一种。
3.用于判别野生草鱼与养殖草鱼的代谢标志物，包括丁酸、3-羟基异戊酰-L-肉碱、丁烯基肉碱、脱氧肉碱中的至少一种。
4.用于判别野生鲢与养殖鲢的代谢标志物，包括丙酰肉碱、丁酸、Tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-L-肉碱、丁烯基肉碱中的至少一种。
5.用于判别野生鳙与养殖鳙的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、Tiglyl肉毒碱、5-羟基庚酰肉碱、磷脂酰胆碱中的至少一种。
6.权利要求1～5任一所述的代谢标志物和/或用于检测权利要求1～5任一所述代谢标志物的试剂在判别野生与养殖四大家鱼中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，所述判别包括测试受试样本中如权利要求2所述的代谢标志物中各个代谢标志物含
8.根据权利要求6所述的用途，所述判别包括测试受试样本中如权利要求3所述的代谢标志物中各个代谢标志物含量的步骤；
9.根据权利要求6所述的用途，所述判别包括测试受试样本中如权利要求4所述的代谢标志物中各个代谢标志物含量的步骤；
10.根据权利要求6所述的用途，所述判别包括测试受试样本中如权利要求5所述的代谢标志物中各个代谢标志物含量的步骤；
...【技术特征摘要】
1.代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱、5-羟基庚酰肉碱、脱氧肉碱、磷脂酰胆碱、百里酚-b-d-葡萄糖苷中的至少一种。
2.用于判别野生青鱼与养殖青鱼的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉毒碱和百里酚-b-d-葡萄糖苷中的至少一种。
3.用于判别野生草鱼与养殖草鱼的代谢标志物，包括丁酸、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱、脱氧肉碱中的至少一种。
4.用于判别野生鲢与养殖鲢的代谢标志物，包括丙酰肉碱、丁酸、tiglyl肉毒碱、3-羟基异戊酰-l-肉碱、丁烯基肉碱中的至少一种。
5.用于判别野生鳙与养殖鳙的代谢标志物，包括十三烷二酸、丙酰肉碱、tiglyl肉...
【专利技术属性】
技术研发人员：张浪，甘金华，张辉，喻亚丽，段辛斌，高雷，邓华堂，李罗新，覃秋莹，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院长江水产研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。