【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，具体涉及一种快速鉴定包含续断的中药复方的中小极性成分的分析方法及其应用。
技术介绍
1、中药复方是中医方剂的主体组成部分，其化学物质基础的研究在中医药学理论和实践中扮演着重要角色。深入探究中药复方的化学物质基础有助于加深对中医药理论的理解，也是中药现代化发展的必经之路。通过阐明中药复方化学物质基础，可以促进中药复方制剂的质量标准提升，推动实施标准化生产，从而确保中药的质量和安全性。
2、已上市的化学药物中，有相当比例的药物为中小极性的小分子，主要由碳、氢、氧、氮等元素构成，具有良好的溶解性和穿透性、适度的生物利用度。因此，中小极性分子在药物研发中具有重要地位，是潜在的活性分子。然而，分子的极性大小十分复杂，取决于分子内各个键的极性以及它们的排列方式。鉴于分子的极性与溶剂之间存在着紧密联系，基于相似相溶原理，采用中小极性溶剂对中药复方进行提取可以快速获取其中小极性分子。
3、unifi科学信息系统集成了超高效液相色谱数据与高分辨质谱数据的处理能力，提供了便捷的数据处理、浏览、化学成分筛查和分析报告生成等功能，为科学研究和实验室工作提供了全面支持和解决方案，从而更高效地执行实验流程并减少人为错误。然而，现有技术中未见包含续断的中药复方的中小极性成分的分析方法及其应用的相关报道。
4、综上所述，本专利技术建立了一种简便且快速筛查中小极性成分的方法，能够高通量地、高效地、准确地筛查含续断的中药复方的中小极性成分，大大提高了实验效率。
技术实现思路
1、基于此，本专利技术提供了一种快速鉴定包含续断的中药复方的中小极性成分的分析方法，该分析方法包括如下步骤：
2、(1)分别制备包含续断的中药复方供试品溶液、对照品溶液、单味药样品溶液和空白对照样品溶液；
3、(2)分别对该供试品溶液、该对照品溶液、该单味药样品溶液和空白对照样品溶液应用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪进行检测，分别采集得到该供试品溶液的高分辨质谱数据、该对照品溶液的高分辨质谱数据、该单味药样品溶液的高分辨质谱数据和空白对照样品溶液的高分辨质谱数据：
4、该检测的色谱条件为：采用t3色谱柱，流动相a为酸水、碱水溶液和/或缓冲盐水溶液，流动相b选自乙腈、甲醇和四氢呋喃中的一种或多种，梯度洗脱程序为：0～3min，5％b→12％b；3～18min，12％→35％b；18～27min，35％→80％b；27～35min，80％→95％b；35.1～37min，100％b；37.1～40min，5％b；流速为0.1～1.5ml/min，柱温为30～50℃，检测波长150～550nm，进样量为0.1～10μl；
5、该检测的质谱条件为：采用xevo g2-xs q-tof质谱仪，esi离子源，扫描检测采用正离子模式，扫描范围为50-1500da；离子源参数：离子源温度120℃，载气和脱溶剂气为氮气，锥孔气流量为50l/h，脱溶剂气温度450℃，脱溶剂气流量800l/h，锥孔电压为40v；毛细管电压为+3.0kv；碰撞诱导解离气体为氩气(99.95％)；低碰撞能量为6ev，高碰撞能范围为15-60ev；
6、(3)包含续断的中药复方的化学成分数据库的建立：
7、把中药复方中的淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎、赤芍和牡蛎9种药材的已报道的化合物的名称、精确分子量、分子式、结构式、cas号信息，导入unifi系统中，建立包含续断的中药复方的化学成分数据库；以及
8、(4)化学成分鉴定：
9、将上述四类高分辨质谱数据导入unifi系统中，结合已建立的该包含续断的中药复方的化学成分数据库，unifi系统能够对该中药复方的中小极性成分进行自动筛查，并对化合物的质谱裂解规律进行注释，基于上述四类高分辨质谱数据，对unifi系统筛查结果进行确认。
10、进一步地，该供试品溶液的制备方法包括：称取适量的中药复方制剂，研磨成粉末，置于适当体积的容器之中，加入溶剂进行超声处理之后，放冷，混匀，过滤，得到该供试品溶液。
11、进一步地，该溶剂为醇，例如甲醇。
12、进一步地，该中药复方制剂与该溶剂之间的质量/体积(g/ml)之比值为0.001～0.5，例如约0.02或约0.04或约0.004。
13、进一步地，该容器为锥形瓶，例如具塞锥形瓶。
14、进一步地，该过滤的滤膜孔径为0.1～0.5μm，例如0.22μm。
15、进一步地，该对照品溶液包括对照品溶液1、对照品溶液2、对照品溶液3和/或对照品溶液4。
16、进一步地，该对照品溶液1的制备方法包括：分别称取适量的獐牙菜苷、马钱苷酸、甘露三糖、异芒果苷、羟基芍药苷、水苏糖、知母皂苷c和知母皂苷bⅱ，置于适当体积的容器中，加入溶剂进行溶解，定容，得到该对照品溶液1。
17、进一步地，该对照品溶液2的制备方法包括：分别称取适量的棉籽糖、知母皂苷aⅲ、紫云英苷、知母皂苷a2、知母皂苷bⅲ、去甲氧基姜黄素、羌活醇、川续断皂苷ⅵ和川续断皂苷乙，置于适当体积的容器中，加入溶剂进行溶解，定容，得到该对照品溶液2。
18、进一步地，该对照品溶液3的制备方法包括：分别称取适量的新芒果苷、宝藿苷ⅱ、毛蕊花糖苷、知母皂苷a1、知母皂苷i、绿原酸、芦丁、没食子酸和金丝桃苷，置于适当体积的容器中，加入溶剂进行溶解，定容，得到该对照品溶液3。
19、进一步地，该对照品溶液4的制备方法包括：分别称取适量的芍药内酯苷、芒果苷、芍药苷、淫羊藿苷、木兰花碱、朝藿定c、朝藿定a、朝藿定b和阿魏酸，置于适当体积的容器中，加入溶剂进行溶解，定容，得到该对照品溶液4。
20、进一步地，单个对照品的质量为1～5mg，例如约2mg。
21、进一步地，该单个对照品与该溶剂之间的质量/体积(g/ml)之比值为0.01～0.5，例如约0.08。
22、进一步地，该溶剂为醇，例如甲醇。
23、进一步地，该单味药样品溶液的制备方法包括：分别称取适量的中药复方单味药，研磨成粉末，置于适当体积的容器之中，之后的步骤与该供试品溶液的制备方法相同。
24、进一步地，该空白对照样品溶液为醇，例如甲醇。
25、进一步地，该中药复方制剂的制备方法包括：(1)称取适量的牡蛎，粉碎成牡蛎细粉；以及(2)称取适量的淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎和赤芍，加水煎煮，滤过，滤液浓缩至清膏，加入该牡蛎细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，干燥。
26、进一步地，在步骤(2)中，在加入该牡蛎细粉的同时加入适量的淀粉。
27、进一步地，在步骤(2)中，在加入该牡蛎细粉的同时加入适量的蔗糖。
28、进一步地，该煎煮的次数为1～5次，例如3次。
29、进一步地，该煎煮的时间为0.5～3小时，例如1～2小时。
30、进一步地，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种快速鉴定包含续断的中药复方的中小极性成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法包括：称取适量的中药复方制剂，研磨成粉末，置于适当体积的容器之中，加入溶剂进行超声处理之后，放冷，混匀，过滤，得到所述供试品溶液；
3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述对照品溶液包括对照品溶液1、对照品溶液2、对照品溶液3和/或对照品溶液4；
4.根据权利要求2所述的分析方法，其特征在于，所述中药复方制剂的制备方法包括：(1)称取适量的牡蛎，粉碎成牡蛎细粉；以及(2)称取适量的淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎和赤芍，加水煎煮，滤过，滤液浓缩至清膏，加入所述牡蛎细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，干燥；
5.根据权利要求1至4中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述包含续断的中药复方包括淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎、赤芍和牡蛎；
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速为0.2～0.6ml/min，例如约0.4ml
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相B为乙腈；
8.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述化学成分鉴定的结果包括：(1)根据对照品色谱保留时间和质谱裂解规律，指认出21个化学成分；(2)在步骤(1)的基础上，根据所述对照品溶液中对照品的质谱裂解规律，结合UNIFI系统，对包含续断的中药复方的中小极性成分进行鉴定，共鉴定出60个中小极性成分；以及(3)结合所述单味药样品溶液的高分辨质谱数据，确认了所述60个中小极性成分的归属；
9.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，UNIFI系统可自动进行数据处理，自动对UNIFI系统内置的天然产物数据库和已建立的所述包含续断的中药复方的化学成分数据库进行检索，鉴定结果自动显示，并且结构是否合理也可通过准分子离子峰、二级碎片结构、色谱保留时间和/或紫外吸收峰自动匹配来确证；无法通过内置的天然产物数据库和已建立的所述包含续断的中药复方的化学成分数据库所鉴定的成分，可通过搜索在线数据库，然后通过准分子离子峰、二级碎片结构、色谱保留时间和/或紫外吸收峰是否匹配来鉴定化合物。
10.权利要求1至9中任一项所述的分析方法在包含续断的中药复方的中小极性成分鉴定或质量鉴定或质量检测或质量评价或质量控制中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种快速鉴定包含续断的中药复方的中小极性成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法包括：称取适量的中药复方制剂，研磨成粉末，置于适当体积的容器之中，加入溶剂进行超声处理之后，放冷，混匀，过滤，得到所述供试品溶液；
3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述对照品溶液包括对照品溶液1、对照品溶液2、对照品溶液3和/或对照品溶液4；
4.根据权利要求2所述的分析方法，其特征在于，所述中药复方制剂的制备方法包括：(1)称取适量的牡蛎，粉碎成牡蛎细粉；以及(2)称取适量的淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎和赤芍，加水煎煮，滤过，滤液浓缩至清膏，加入所述牡蛎细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，干燥；
5.根据权利要求1至4中任一项所述的分析方法，其特征在于，所述包含续断的中药复方包括淫羊藿、续断、知母、地黄、三棱、莪术、川芎、赤芍和牡蛎；
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速为0.2～0.6ml/min，例如约0.4ml/min；
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流...
【专利技术属性】
技术研发人员：单海涛，赵一帆，张志杰，
申请(专利权)人：贵州富华药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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