【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生殖内分泌学的，更具体涉及一种利用高温诱导鲤鱼次发性雌转雄的方法及应用。
技术介绍
1、性别分化是原始生殖腺分化为精巢或卵巢的过程。在这个过程中，原始生殖细胞特化为精原或卵原细胞，继而经由有丝分裂和减数分裂，发育成为成熟配子。在传统认知中，影响动物性别分化的因素可分为两大类：一类是内在的遗传因素，这种影响方式被称为遗传决定型；一类是外在的环境因素，相应地被称为环境决定型。许多脊椎动物的性别分化同时受遗传和环境两方面因素影响。在环境因素对性别分化的影响超过遗传因素时就造成了与基因型不一致的性别分化，即性反转(nagahama et al,2021)。
2、对鱼类性别分化具有明显影响的常见环境因素包括外源性激素、温度、ph值等。随着近年全球平均气温的上升，野生鱼类在极端高温气候影响下就可能发生性反转，已发现至少有包括青鳉、半滑舌鳎在内的22种鱼类在自然环境中发生了性反转(edmands,2021)。但通常认为高温的性反转影响在性别分化前，即直接由未分化性腺分化为与遗传性别不一致的另一种性别(strussmann et al,1997)。
3、在生产上，施加外源性激素是最易操作的人工诱导鱼类性反转的方式，并已在鲤鱼、罗非鱼、石斑鱼等多种经济鱼类中应用(baroiller and d’cotta,2016；zhou et al,2019)。获得的遗传雌性而生理雄性的xx伪雄鲤，可作为培育全雌鲤的亲本。然而，利用雌激素抑制剂或雄激素诱导获得xx伪雄鲤的方法却存在两个缺点：一方面，在生产上大规模使用性激
4、在鲤科鱼类中，已知斑马鱼、鲫等的性别分化明显受温度影响(li et al,2018；han et al,2021)。此外，有国内学者报道了利用高温培育团头鲂伪雄鱼的方法(一种利用高温培育雌核发育团头鲂伪雄鱼的方法，中国专利技术专利cn113207762a)。鲤鱼在全球广泛分布，适应性强，其性别分化即使在极端气候下仍然主要由遗传因素决定，鲤鱼性别分化是否受温度影响尚无报道。
5、鲤鱼性分化时间约在50-55dph(受精后50-55天)(jiang et al,2020)。而本专利技术发现，在特定时间下进行处理，高温可使遗传雌性鲤鱼次发性性反转(指在卵巢分化后诱导卵巢退化并再分化成精巢)为生理雄性。这种次发性性反转的效率可达46％以上，并且性反转成功的伪雄鲤在常温也能维持精巢功能，不再退化或转回卵巢，这种特性更适合用作培育全雌鲤的亲本。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供了一种利用高温诱导鲤鱼发生次发性雌转雄的方法，利用本专利技术的方法，可以成功获得xx伪雄鲤。
2、本专利技术还提供了一种高温诱导获得的次发性雌转雄伪雄鲤的应用，包括利用该方法进行全雌鲤群体的制备。
3、为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：
4、一种利用高温诱导鲤鱼次发性雌转雄的方法，包括下述步骤：
5、1)获得全雌鲤鱼胚胎：
6、利用雌核发育和性激素诱导技术，获得全雌鲤胚胎；
7、2)高温诱导次发性雌转雄：
8、待全雌鲤胚胎在24.5～25.5℃发育至59.5～60.5dph(即受精后59.5～60.5天之间)，按照0.5-1℃/小时的速率将水温升高至35.5～36.5℃。在高温水中饲养至129.5～130.5dph，按照0.5-1℃/小时的速度降低水温至24.5～25.5℃，并继续饲养至性成熟；根据排精能力即筛选出成功完全性反转的伪雄鲤。
9、以上所述的方法中，优选的，步骤2)中所述的24.5～25.5℃具体为25℃；
10、以上所述的方法中，优选的，步骤2)中所述的59.5～60.5dph具体为60dph；
11、以上所述的方法中，优选的，步骤2)中所述的0.5-1℃/小时具体为0.5℃/小时；
12、以上所述的方法中，优选的，步骤2)中所述的35.5～36.5℃具体为36℃；
13、以上所述的方法中，优选的，步骤2)中所述的129.5～130.5dph具体为130dph；
14、本专利技术的保护内容还包括：上述方法在制备全雌鲤中的应用。
15、与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
16、1.生产上，xx伪雄鲤由施加雌激素抑制剂获得，迄今没有高温诱导获得xx伪雄鲤的报道。而与性激素诱导获得的伪雄鲤相比，本专利技术获得的伪雄鲤具有持续维持精巢功能的优点。
17、2.目前认为，鱼类性别发育对高温的敏感期在性别分化之前，因此高温诱导通常在性别分化前开始。而本专利技术发现，鲤鱼可发生卵巢分化后的次发性性反转。
18、3.有国内学者报道了利用高温培育团头鲂伪雄鱼的方法(一种利用高温培育雌核发育团头鲂伪雄鱼的方法，中国专利技术专利cn113207762a)，雌转雄的性反转率在10-20％。而利用本专利技术的方法，将鲤鱼进行高温诱发次发性性反转，其效率可达46％以上。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种利用高温诱导鲤鱼次发性雌转雄的方法，包括下述步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的24.5~25.5℃具体为25℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的59.5~60.5dph具体为60dph。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的0.5-1℃/小时具体为0.5℃/小时。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的35.5~36.5℃具体为36℃。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的129.5~130.5dph 具体为130dph。
7.权利要求1所述的方法在制备全雌鲤中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种利用高温诱导鲤鱼次发性雌转雄的方法，包括下述步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的24.5~25.5℃具体为25℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中所述的59.5~60.5dph具体为60dph。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈戟，韦玉来，宋焱龙，陶彬彬，胡炜，
申请(专利权)人：中国科学院水生生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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