【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学，具体而言，涉及脱氧胆酸或脱氧胆酸盐作为吸收促进剂在制备预防或治疗hp感染的口服免疫原性组合物中的应用。
技术介绍
1、幽门螺杆菌(helicobacter pylori，hp)是一种革兰阴性、螺杆状、微需氧菌，可以在胃、黏膜和十二指肠上皮持续存在。hp感染在全世界各地人群中感染率均较高，全球感染率超过50％。目前抗生素治疗hp感染虽然具有一定积极的临床意义但仍存在如下缺陷：1)毒副作用；2)易产生耐药菌株；3)费用高；4)疗程长，患者顺应性差；5)疗效不稳定等。疫苗是控制感染性疾病最为经济有效的办法，因此通过hp疫苗刺激机体产生针对幽门螺杆菌的特异性免疫应答，可以达到预防或者治疗hp感染的目的。
2、然而，口服疫苗的开发仍然存在着重重困难。一方面，口服递送疫苗必须途经恶劣的胃肠道环境，抗原在胃肠道中除了要经受较宽范围的ph梯度变化(1.2～8.6)，还要经受不同的机械过程如肠道蠕动，粘液和多糖包被的捕获以及消化酶(蛋白酶，脂肪酶，核酸酶，胆汁，乳铁蛋白，酶和过氧化物酶)的攻击，这些将导致抗原稀释、降解甚至变性失活。另一方面，按生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system)进行分类，疫苗抗原多为水溶性大分子，这类物质的水溶性较好，但渗透性较低。因此，口服后机体产生的抗体滴度低。
3、此外，现有技术(“重组幽门螺杆菌尿素酶b亚单位鼻腔免疫凝胶剂的研制”，高志刚等，《中国现代应用药学》)虽然有报道脱氧胆酸钠作为鼻腔黏膜吸收促进剂，用于制
4、胰岛素口服制剂的研究中(a.yamamoto,e.hayakawa,y.kato,a.nishiura,v.h.lee,a mechanistic study on enhancement of rectal permeability to insulinin the albino rabbit,j pharmacol exp ther)虽然也有添加脱氧胆酸钠的报道。该报道中脱氧胆酸钠能够提高打开肠道紧密连接，或帮助药物通过细胞旁路吸收；同时克服胰岛素口服的吸收屏障、酶屏障和粘液屏障，能够提高药物的口服生物利用度。脱氧胆酸钠促进胰岛素的吸收需要经过肠道上皮细胞或细胞旁路途径进入血液循环，进而分布到全身，与细胞表面的胰岛素受体结合发挥作用。然而，抗原和佐剂的吸收是通过肠道m细胞和杯状细胞将其摄取并递送至树突状细胞(dc)，或是由单核吞噬细胞(mnp)通过肠上皮中的紧密连接或是m细胞中的孔延伸树突摄入抗原。抗原提呈细胞摄入抗原并且被佐剂活化后，进而活化下游t、b免疫细胞，产生免疫应答。所以，抗原和佐剂与胰岛素口服制剂相比，进入机体的靶细胞和发挥作用的靶组织都是明显不同的。并且，由于胰岛素口服剂治疗的对象是糖尿病，与hp感染
、治疗机理差异明显，脱氧胆酸钠是否能提高疫苗口服后机体的抗体滴度存疑。因此，如何提高疫苗口服后机体的抗体滴度是亟需解决的问题。
5、鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供脱氧胆酸或脱氧胆酸盐作为吸收促进剂在制备预防或治疗hp感染的口服免疫原性组合物中的应用以解决上述技术问题。
2、本专利技术是这样实现的：
3、第一方面，本专利技术提供了一种脱氧胆酸盐作为吸收促进剂在制备预防或治疗幽门螺杆菌感染的口服免疫原性组合物中的应用。
4、本专利技术经过长期大量的实验，发现导致疫苗口服后机体产生的抗体滴度低的原因是：苛刻的胃酸环境和蛋白酶的降解作用严重影响抗原在胃肠道的稳定性；肠道各种生理屏障使得抗原在黏膜部位的渗透能力降低，最终导致口服免疫失败，因此疫苗口服后机体的抗体滴度低。
5、基于此，本专利技术筛选提供了一种吸收促进剂—脱氧胆酸或脱氧胆酸盐，发现脱氧胆酸或脱氧胆酸盐能够作为吸收促进剂提高机体的免疫应答水平，大幅提高机体中抗体的滴度，能明显提高幽门螺杆菌血清特异性igg和肠道特异性siga，具有良好的制备口服免疫原性组合物的应用前景。
6、本专利技术中使用的术语“免疫原性组合物”是指包含疫苗活性成分(包括不限于抗原分子)，并且将组合物施用给受试者能够在受试者中引起体液和/或细胞抗原特异性反应的组合物。
7、本专利技术中使用的术语“受试者”是指哺乳动物，优选人。
8、在本专利技术应用较佳的实施方式中，脱氧胆酸盐选自脱氧胆酸钠、脱氧胆酸钾和脱氧胆酸钙中的至少一种。
9、脱氧胆酸或脱氧胆酸盐通过作为幽门螺杆菌口服免疫原性组合物(如口服亚单位疫苗)吸收促进剂存在多种作用机制：一、肠上皮细胞表面覆盖着由黏蛋白、电解质等构成的黏液层。脱氧胆酸钠可降低黏液层的黏度和弹性，促进幽门螺杆菌抗原透过黏液层。二、脱氧胆酸钠可与细胞膜磷脂双分子层相互作用，改变膜中脂质和蛋白质的分布，降低磷脂双分子层的有序性，增加流动性和通透性，从而促进幽门螺杆菌抗原透过胃肠道上皮细胞膜。三、脱氧胆酸钠能在细胞膜表面形成反相胶束，从而创造细胞膜表面的亲水孔隙，进而促进幽门螺杆菌抗原被上皮细胞吸收。四、脱氧胆酸钠可结合ca2+，影响肌球蛋白的分布和功能，放松细胞间紧密连接，从而增加细胞旁路转运，进而导致幽门螺杆菌抗原的摄取增加。五、脱氧胆酸钠可与幽门螺杆菌抗原形成复合物，从而增加抗原对生物膜的通透性，进而增加抗原的生物利用度。六、脱氧胆酸钠能抑制p-糖蛋白(p-gp)的外排作用，从而增加幽门螺杆菌抗原的吸收。七、脱氧胆酸钠还能抵抗蛋白酶对于幽门螺杆菌抗原的降解，从而增加抗原的黏膜吸收。
10、在本专利技术应用较佳的实施方式中，口服免疫原性组合物还包括疫苗活性成分和佐剂；疫苗活性成分选自幽门螺杆菌的抗原；抗原选自幽门螺杆菌的蛋白、多肽、多糖和寡糖中的至少一种。
11、幽门螺杆菌的寡糖选自galβ4glcnac，galnacα3galβ4glcnac，galnacβ3galβ4glcnac，glcnacα3galβ4glcnac，glcnacβ3galβ4glcnac，galβ3galβ4glcnac，glcα3galβ4glcnac，glcβ3galβ4glcnac，galβ4glcnacβ3galβ4glcnac，galβ4glcnacβ3galβ4glc，galnacα3galβ4glcnacβ3galβ4glc，galnacβ3galβ4glcnacβ3galβ4glc，glcnacα3galβ4本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.脱氧胆酸或脱氧胆酸盐作为吸收促进剂在制备预防或治疗幽门螺杆菌感染的口服免疫原性组合物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脱氧胆酸盐选自脱氧胆酸钠、脱氧胆酸钾和脱氧胆酸钙中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述口服免疫原性组合物还包括疫苗活性成分和佐剂；所述疫苗活性成分选自幽门螺杆菌的抗原。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述幽门螺杆菌的抗原选自UreA、UreB、CagA、VacA、KatA、HspA、HpaA、HpA、Hp-NAP、OMP、SOD、Tpx、VacA、GGT、babA、sabA、fecA、omp16、NapA、CAT、Lpp20、选自以上任意一种抗原的修饰物、及选自以上任意一种抗原的突变体、选自以上至少一种抗原的融合蛋白和选自以上至少一种抗原表位肽中的任意一种。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述佐剂选自Toll样受体激动剂、RIG-I样受体激动剂、NOD样受体激动剂、C-型凝集素受体、STING激动剂、细菌毒素及其衍生物、皂苷类、细胞因子和
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述细菌毒素及其衍生物选自霍乱毒素及其亚单元和大肠杆菌不耐热肠毒素及其亚单元中的至少一种。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述霍乱毒素亚单元选自CTB，所述大肠杆菌不耐热肠毒素亚单元选自LTB。
8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，其特征在于，所述抗原选自幽门螺杆菌的蛋白、多肽、多糖和寡糖中的至少一种。
9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述口服免疫原性组合物的形态为：固体、液体或半固体。
10.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述口服免疫原性组合物，所述疫苗活性成分、佐剂和吸收促进剂的质量比为：(1-10)：(0.1-10)：(1-80)。
...【技术特征摘要】
1.脱氧胆酸或脱氧胆酸盐作为吸收促进剂在制备预防或治疗幽门螺杆菌感染的口服免疫原性组合物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脱氧胆酸盐选自脱氧胆酸钠、脱氧胆酸钾和脱氧胆酸钙中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述口服免疫原性组合物还包括疫苗活性成分和佐剂；所述疫苗活性成分选自幽门螺杆菌的抗原。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述幽门螺杆菌的抗原选自urea、ureb、caga、vaca、kata、hspa、hpaa、hpa、hp-nap、omp、sod、tpx、vaca、ggt、baba、saba、feca、omp16、napa、cat、lpp20、选自以上任意一种抗原的修饰物、及选自以上任意一种抗原的突变体、选自以上至少一种抗原的融合蛋白和选自以上至少一种抗原表位肽中的任意一种。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述佐剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈正军，樊钒，张仁怀，胡安全，董重，陈克平，周秋红，杨融融，张静，唐雨琴，
申请(专利权)人：成都欧林生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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