【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然植物的提取，具体涉及一种清风藤中三萜类化合物的提取方法。
技术介绍
1、清风藤(sabia japonica maxim.)属于清风藤科清风藤属(sabia)的落叶攀援木质藤本植物，主要分布于我国江苏、安徽、浙江、福建、江西、广东、广西、贵州等地。清风藤叶、根、茎均可入药，由于其祛风通络效果好，古代常用于治疗鹤膝风等风湿痹痛。《本草纲目》中记载“清风藤治风湿流注，历节鹤膝，麻痹瘙痒，损伤疮肿，入药酒中用”。《安徽中草药》记载清风藤：“祛风散寒，除湿消肿”，其茎叶或根均可入药，味苦、辛，性温，归肝经，有祛风利湿，活血解毒的功效，主治风湿痹痛，水肿，脚气，跌打肿痛，骨折，深部脓肿，骨髓炎，皮肤瘙痒等症。现代研究还发现，清风藤具有抗炎、免疫调节、保肝、抗病毒、降血压、抗心率失常、镇咳镇静等多种功效，将其制成片剂(如正青风痛宁片)、注射液(如盐酸青藤碱注射液)等多种制剂应用于临床，在各种炎性疾病、风湿病、关节炎等疾病中取得显著效果。清风藤的化学成分包括三萜类化合物、生物碱、黄酮、苯丙素类、其他苯衍生物类、脂肪酸和烷烃类等，其中，三萜类化合物是清风藤植物所含最为丰富的化合物，也是关键药效成分。
2、目前，从天然产物中提取活性成分主要还是采用有机溶剂提取法，然而有机溶剂使用量过大以及提取的时间过长都会增加生产的成本，同时带来一系列的问题。因此对绿色化工过程的要求也越来越高，尤其在天然产物提取领域，力争采用更加温和的萃取方法，减少有机溶剂使用量并且缩短提取时间。目前，针对清风藤中三萜类化合物的提取和分离的报道很少
3、因此，有必要采用一种更加绿色、温和的方法对清风藤中三萜类化合物进行分离，并提高清风藤中三萜类化合物的提取得率和纯度。
技术实现思路
1、以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。
2、本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种清风藤中三萜类化合物的提取方法。本专利技术的提取方法提取效率高、所得三萜类化合物的纯度高，对三萜类化合物的结构破坏小，有利于保持其药效活性，且操作过程简单，可用于工业生产，且生产成本较低。
3、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
4、本专利技术提供一种清风藤中三萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：
5、s1、将萃取剂和清风藤混合，依次经超声提取、离心，得到粗提液；
6、s2、将所述粗提液用大孔树脂吸附上柱，以体积分数为50％～80％的乙醇水溶液作为洗脱液进行洗脱，收集洗脱液，得到三萜类化合物；
7、其中，所述萃取剂，以质量百分比计，包括：低共熔溶剂50％-90％和水10％-50％，所述低共熔溶剂的制备原料包括氢键供体和氢键受体，所述氢键供体包括正辛酸、正癸酸、月桂酸中的至少一种，所述氢键受体包括薄荷醇；
8、所述大孔树脂选自ab-8型、hpd100型大孔树脂；
9、步骤s2中，所述粗提液的上柱流速为2-4bv/h，所述洗脱液的洗脱的流速为2-4bv/h。
10、本专利技术通过低共熔溶剂和水的配合，构建在室温条件下具有低黏度和适当极性的低共熔溶剂-水均相体系，其生物相容性强，可进一步通过超声提取法的辅助作用，从而提高对清风藤中三萜类化合物的提取效率，且该过程无需长时间的加热回流，因而对三萜类化合物的结构破坏小，有利于保持其药效活性。
11、具体地，本专利技术选用薄荷醇作为氢键受体，薄荷醇属于萜烯类物质，分子结构中的环己烷部分能够增加薄荷醇的疏水性，避免低共熔溶剂部分溶解于水中而影响氢键受体和氢键供体的摩尔比和相体积的稳定性，并增强对三萜类化合物的提取效果。另外，本专利技术选用正辛酸、正癸酸、月桂酸中的至少一种作为氢键供体，具有密度低、且黏度较低(2-14mpas)的优点；而且，此类氢键供体与上述提及的氢键受体所形成的低共熔溶剂疏水性较好，并在水中稳定。
12、清风藤中三萜类化合物由于极性较小，因而可采用弱极性的大孔树脂，利用大孔树脂与三萜类化合物的吸附作用提高从而优化三萜类化合物与其他杂质的纯化分离效果。此外，由于三萜类化合物与特定类型大孔树脂的吸附程度不同，上柱流速、洗脱流速过快或过慢会影响大孔树脂对三萜类化合物的吸附、解吸效果以及三萜类化合物与其他杂质的分离效果；因此，大孔树脂吸附和洗脱过程中需保证适当的上柱流速和洗脱流速。
13、在本专利技术的一些实施方式中，所述氢键供体选自正辛酸、正癸酸、月桂酸中的任意两种，例如，所述氢键供体选自正辛酸和正癸酸、正辛酸和月桂酸、正癸酸和月桂酸。
14、在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述氢键供体为正癸酸和月桂酸。本专利技术发现，将正癸酸和月桂酸联合使用，较使用单一的脂肪酸，所得到的低共熔溶剂能够进一步增加三萜类化合物的富集纯度，这可能与低共熔溶剂的疏水性增加，熔点和粘度降低等有关。
15、在本专利技术的一些优选的实施方式中，所述氢键受体为dl-薄荷醇。
16、在本专利技术的一些实施方式中，所述低共熔溶剂选自薄荷醇-正癸酸-月桂酸、薄荷醇-正辛酸-月桂酸、薄荷醇-正辛酸-正癸酸、薄荷醇-正癸酸、薄荷醇-正辛酸、薄荷醇-月桂酸。
17、在本专利技术的一些实施方式中，所述萃取剂中，低共熔溶剂的质量百分比为50％-90％，包括但不限于：55％-90％、60％-90％、65％-90％、70％-90％、75％-90％、80％-90％、55％-85％、60％-85％、70％-85％、80％-85％、60％-80％、65％-80％、70％-80％。
18、在本专利技术的一些实施方式中，所述萃取剂中，水的质量百分比为10％-50％，包括但不限于：10％-45％、10％-40％、10％-35％、10％-30％、10％-25％、10％-20％、15％-45％、15％-40％、15％-30％、15％-25％、15％-20％、20％-40％、20％-35％、20％-30％。
19、在本专利技术的一些实施方式中，所述萃取剂中，所述低共熔溶剂和水的体积比为3-5：1。
20、在本专利技术的一些实施方式中，所述低共熔溶剂由包括氢键供体和氢键受体在内的原料加热至澄清制得。
21、在本专利技术的一些实施方式中，所述低共熔溶剂的原料还可以包括水。
22、在本专利技术的一些实施方式中，所述氢键受体和氢键供体的摩尔比为1：0.2-5，包括但不限于：1：0.2-4、1：0.2-3、1：0.2-2、1：0.2-1、1：0.2-0.5、1：0.2-0.4、1：0.3-4、1：0.3-3、1：0.3-2、1：0.3-1、1：0.3本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种清风藤中三萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述氢键供体选自正辛酸、正癸酸、月桂酸中的任意两种。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述氢键受体和所述氢键供体的摩尔比为1：0.2-5。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤S1前，还包括将清风藤干燥、粉碎过20-40目筛，得到清风藤粉末。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述清风藤和所述萃取剂的固液比为1:5-30g/mL。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超声的温度为15-35℃，和/或，所述超声的频率为700-900W，和/或，所述超声的时间为20-40min。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述离心的转速为4000-6000rpm，和/或，所述离心的时间为2-10min。
8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤S1完成后，还包括将所述粗提液通过0.22微米孔径的滤膜进行过滤，再进行步骤S2。>
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，将所述粗提液用大孔树脂静态吸附2-6h，再进行洗脱；
10.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤S2中，在用所述洗脱液进行洗脱前，先用3-6BV/h的水洗去杂质。
...【技术特征摘要】
1.一种清风藤中三萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述氢键供体选自正辛酸、正癸酸、月桂酸中的任意两种。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述氢键受体和所述氢键供体的摩尔比为1：0.2-5。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤s1前，还包括将清风藤干燥、粉碎过20-40目筛，得到清风藤粉末。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述清风藤和所述萃取剂的固液比为1:5-30g/ml。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述超声的温度为15-35℃，和/...
【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳习叶，范硕，陈曙，苏常玉，沈帆顺，朱笑颜，戚苗，
申请(专利权)人：湖南春光九汇现代中药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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