【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于酶工程和生物医药，具体涉及一种酶催化合成r-型玻色因的方法及其应用。
技术介绍
1、目前合成玻色因的方法主要是通过化学法合成，但通过化学法合成的玻色因很难得到专一的r构型，另外化学法合成过程往往需要使用硼氢化钠、锂铝氢、催化氢化等危险试剂和复杂的工艺，造成成本的大幅提升，并且至今没有化学法合成单一r-型玻色因的专利报道。因此，利用酶蛋白催化的高效性和专一性合成r-型玻色因极具优势，其催化条件温和、工艺简单，符合绿色化工的理念。
2、公开号为cn 116904543 b的中国专利技术专利公开了一种利用脱氢酶制备r-型玻色因的方法。此外，公开号cn 113717997 a 和 cn 115896199 a等专利均提到了化学酶法合成s-型玻色因的方法，但专利技术人研究发现，上述方法仍然存在反应时间过长，转化率仍然有待提高等缺陷。
技术实现思路
1、针对上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种酶催化合成r-型玻色因的方法及其应用。具体的，本专利技术通过对来源于慢生根瘤菌中的羰基还原酶bskred进行研究，经实验证明其能够高效催化合成单一r构型的玻色因产物，且具有反应时间短、副产物少、纯度高等优点，从而适于大规模工业化生产。基于上述研究成果，从而完成本专利技术。
2、为了实现上述技术目的，本专利技术提供的技术方案如下：
3、本专利技术的第一个方面，提供一种酶催化合成r-型玻色因的方法，所述方法包括：以羰基还原酶作为催化酶，加入底物β-
4、所述反应体系中还含有葡萄糖脱氢酶，更进一步的，所述羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶可通过同一工程菌进行发酵培养获得；具体方法如下：将所述羰基还原酶编码基因与所述葡萄糖脱氢酶编码基因插入同一质粒载体中，所述质粒载体导入宿主菌中。
5、本专利技术的第二个方面，提供上述方法在工业化生产r-型玻色因中的应用。
6、上述一个或多个技术方案的有益技术效果：
7、上述技术方案首次筛选获得一种羰基还原酶，其能够高效催化合成单一r构型的玻色因产物，且具有反应条件温和，反应时间短，产率高等优点，非常适于工业规模化生产，因此具有良好的实际应用价值。
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1.一种酶催化合成R-型玻色因的方法，其特征在于，所述方法包括：以羰基还原酶作为催化酶，加入底物β-丙酮木糖苷和氧化型辅酶对所述底物进行酶催化反应，获得R-型玻色因。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物β-丙酮木糖苷的浓度为180g/L~210g/L。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氧化型辅酶为氧化型辅酶II，所述氧化型辅酶II浓度控制为1~2g/L。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶为羰基还原酶BsKRED，其NCBI登录号为ABQ37878.1。
5. 如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶通过含有羰基还原酶编码基因的工程菌进行发酵培养获得；其中，所述羰基还原酶编码基因如SEQ ID NO.2所示。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶催化反应的条件为：在25~35℃条件下反应4~6h。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中还含有Mg2+，所述Mg2+浓度控制为10~40mM。
8. 如权利要求1所述的方法，
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶通过同一工程菌进行发酵培养获得；
10.权利要求1-9任一项所述方法在工业化生产R-型玻色因中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种酶催化合成r-型玻色因的方法，其特征在于，所述方法包括：以羰基还原酶作为催化酶，加入底物β-丙酮木糖苷和氧化型辅酶对所述底物进行酶催化反应，获得r-型玻色因。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物β-丙酮木糖苷的浓度为180g/l~210g/l。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氧化型辅酶为氧化型辅酶ii，所述氧化型辅酶ii浓度控制为1~2g/l。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶为羰基还原酶bskred，其ncbi登录号为abq37878.1。
5. 如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述羰基还原酶通过含有羰基还原酶编码基因的工程菌进行发酵培养获得；其中，所述羰基还原酶编码基因如seq id no....
【专利技术属性】
技术研发人员：袁强，郭帅印，随宝东，
申请(专利权)人：山东君泰药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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