【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于水产生物技术，尤其涉及一种筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝所用引物及方法。
技术介绍
1、扇贝属软体动物门（ mollusca）、双壳纲（ lamellibranchia）、翼形亚纲（ pterimorphia）、珍珠贝目（ pterioida）、扇贝科（ pectinidae），有海湾扇贝、虾夷扇贝等多个品种，是世界范围内重要的经济渔业资源之一，也是我国目前海水养殖面积第二大的贝类，年均市场需求量巨大。体尺和体重性状一直是扇贝分级和市场定价的重要指标，体尺和体重大则市场分级高、价格昂贵，经济效益大。近年来，受近交退化等因素影响，我国养殖扇贝的体尺和体重性状质量严重下降，小个体扇贝比例逐年增加，对渔民收入造成了一定的影响。一般而言，扇贝亲贝是否具有体尺和体重性状优势直接决定后代性状，因此，准确筛选具有体尺和体重性状优势特性的扇贝亲贝是扇贝良种繁育的关键环节。目前，我国海湾扇贝和虾夷扇贝亲贝的选择仍主要依靠基于形态学观察或测量的传统方法，不仅费时费力，而且由于亲贝个体遗传变异的不确定性，其产生的后代形态性状变异率较高，选育效率低下。
技术实现思路
1、本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝所用引物及方法。
2、本专利技术的技术解决方案是：一
3、1号引物对：
4、f1：5'- tgctaccagtgtgtctgcac -3'；
5、r1：5'- ggctacaccggcactatgac -3'；
6、2号引物对：
7、f2：5'- ggaactgatacgggctggag -3'；
8、r2：5'- aggcgatatggattgccgtt -3'；
9、3号引物对：
10、f3：5'- agcgatggcacaggatacag -3'；
11、r3：5'- gcttgttgcgagggatggta -3'。
12、4号引物对：
13、f4：5'- acccgtcctggtcaaacttc -3'；
14、r4：5'- cacggatcagtaggtggacg -3'。
15、一种采用上述引物筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝方法，依次按照如下步骤进行：
16、a. 提取扇贝rna；
17、b. 将扇贝rna反转录合成cdna；
18、c. 以所得到的cdna为模板，分别以1~4号引物对进行荧光定量pcr反应；
19、d. 计算荧光定量pcr反应扩增产物相对表达值，选出扩增产物相对表达值同时满足下列条件的扇贝为具有体尺和体重性状优势特性的扇贝亲贝：
20、1号引物对扩增产物相对表达值 > 1.24；
21、2号引物对扩增产物相对表达值 > 1.22；
22、3号引物对扩增产物相对表达值 > 1.26；
23、4号引物对扩增产物相对表达值 > 1.16。
24、所述荧光定量pcr反应的程序是预变性、两步扩增、溶解曲线分析及降温，各阶段反应条件如下：
25、预变性：95℃、600s；
26、两步扩增：第一步扩增95℃、15s，第二步扩增60℃、60s，共45个循环；
27、溶解曲线分析：95℃、10s；65℃、60s；97℃、1s；
28、降温：37℃、30s。
29、本专利技术可在扇贝活体情况下筛选具有体尺和体重性状优势特性的扇贝亲贝，其繁育的后代体尺和体重性状优势明显且变异率低，具有操作简便、成本低廉、重复性好、准确性高等优点。
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1.一种筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝所用引物，其特征在于：由1~4号引物对构成，所述1~4号引物对的上游引物F1~F4及下游引物R1~R4的DNA序列分别如下：
2.一种采用权利要求1所述引物筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝方法，依次按照如下步骤进行：
3.根据权利要求2所述的筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应的程序是预变性、两步扩增、溶解曲线分析及降温，各阶段反应条件如下：
【技术特征摘要】
1.一种筛选具有体尺和体重性状优势的扇贝亲贝所用引物，其特征在于：由1~4号引物对构成，所述1~4号引物对的上游引物f1~f4及下游引物r1~r4的dna序列分别如下：
2.一种采用权利要求1所述引物筛选具有体尺和体...
【专利技术属性】
技术研发人员：常亚青，湛垚垚，宁冰玉，王许波，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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