棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的测定方法技术

本发明专利技术涉及棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的测定方法，包括：称取２０．０ｇ样品置于２００ｍＬ?１０％ＨＣｌ溶液中，加入少量玻璃珠防暴沸，加入２５０ｍＬ，４０％冷却的ＮａＯＨ溶液，再加入止泡剂，混合均匀；再加入２ｇ?Ｚｎ和５ｍＬ?ＴｉＣｌ３，加热回流反应２－４小时；蒸馏，将收集的液体分层，收集水层，弃去上层；向水层中滴加２滴酚酞指示剂，搅拌下滴加４０％ＮａＯＨ溶液，至溶液变为粉红色并在１ｍｉｎ内不变回无色，再加２滴ＮａＯＨ溶液，冷却１５－２０ｍｉｎ；用正己烷５０ｍＬＸ２萃取，每次萃取振摇２ｍｉｎ，静置１０ｍｉｎ，收集上层有机相经无水硫酸钠脱水，过滤，３０℃水浴下减压浓缩近干，氮气吹干，定容，采用ＧＣ－ＮＰＤ进行检测。本发明专利技术将敌草隆及其代谢物全部转化为３，４－ＤＣＡ后用气谱测定，可准确测得敌草隆及其代谢物的残留量，能够满足农药残留检测的需要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物中农药残留量的测定
，涉及棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量测定方法。
技术介绍
除草剂(herbicide)是指可使杂草彻底地或选择地发生枯死的药剂。氯酸钠、 硼砂、砒酸盐、三氯醋酸对于任何种类的植物都有枯死的作用，但由于这些均具有残留影 响，所以不能应用于田地中。敌草隆为苯基取代脲类化合物，化学名称为N-(3，4-二氯苯 基)-N' ,N' -二甲基脲。属于内吸型除草剂，能够抑制作物光合作用，用于防除非耕作区 一般杂草。主要用于棉花、玉米、高梁、甘蔗、水稻、茶园、果园、葡萄园以及非耕地。其测定 方法有液相方法、气相方法等。申请号200710022396公开了一种去除水中除草剂敌草隆 的方法，它是采用介质阻挡放电方法对含除草剂敌草隆的水进行处理，将水体中的敌草隆 降解；将污染物降解为二氧化碳、水和简单有机物，反应条件温和，可控制性较强，反应器设 备及其操作比较简单。其他有关敌草隆及其代谢物在棉籽中的残留检测分析，目前国内并 未见公开报道。
技术实现思路
为了评价敌草隆及其代谢物在棉花中使用后的安全性，本专利技术公开了使用气相色 谱-氮磷检测器(GC-NPD)法测定棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的方法，将敌草隆及其 代谢物全部水解转化为3，4-DCA进行测定。最后使用气相色谱-氮磷检测器(GC-NPD)法 测定。为实现上述目的，本专利技术提供如下的技术方案，其特征在于按如下的步骤进行(1)水解反应1)称取20. Og样品置于30mL33% HCl溶液中；2)加入少量玻璃珠防暴沸，加入250mL40%冷却的NaOH溶液，加入20mL止泡剂， 混合均勻；再加入2-5g Zn和5-7mL TiCl3,加热回流反应2小时；蒸馏收集液体，并将反应 液放于冰箱中冷藏；(2)萃取反应1)将收集的液体转入分液漏斗中，测其PH值，测其PH值。用20_40mL正己烷洗涤 接收瓶，洗后转入上述分液漏斗中，振摇2-5min，收集下层水层。弃去上层。2)向下层水相中滴加2滴酚酞指示剂，搅拌下滴加40% NaOH溶液，至溶液变为粉 红色并在Imin内不变回无色，再加2滴NaOH溶液，冷却15_20min ；3)用正己烷50mLX2萃取，每次萃取振摇2-5min，静置10-15min，收集上层有机相 经无水硫酸钠脱水，过滤，30°C水浴下减压浓缩近干，氮气吹干，定容，采用气相色谱-氮磷 检测器进行检测。本专利技术所述的测定方法，其中的止泡剂为二甲基硅油。本专利技术所述的测定方法，其中所述的样品包括棉花、棉籽、玉米、高梁、甘蔗、水稻或葡萄等残留量的测定。本专利技术所述的敌草隆(Diuron)3-(3，4-dichlorophenyl)-l，1-dimethylurea 及 其可转化为3，4-dichl0r0aniline的代谢物。化学名称N-3，4-二氯苯基-N’，N’ - 二甲基 脲为内吸传导型谱除草剂。本专利技术测定棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的具体方法如 下1试验材料1.1仪器与试剂仪器PE AutoSystem XL气相色谱仪(带氮磷检测器)色谱柱DB-l(30mX0.25mmX 0. 25 μ m)试剂HC1 (分析纯)，NaOH (分析纯)，正己烷(色谱纯)，无水硫酸钠(分析纯)， 酚酞指示剂(Ig酚酞，溶解于IOOmL乙醇中)，二甲基硅油，Zn, TiC13，标准样品敌草隆(99.6%), 3，4-DCA (99. 0% ),敌草隆代谢物 DCPU (99. 5%), DCPMU(99. 0% )反应装置附图说明图1。1.2色谱条件进样口温度250°C;检测器温度250°C ；柱温80°C保持Imin，20°C /min 到 250°C保持 3min ；载气:N2(彡99. 999% )；流速2· OmL/min ；氢气流速2·OmL/min ；空气流速100mL/min；补充气30mL/min ；进样量2yL。1.3标准溶液配制准确称取敌草隆、DCPU, DCPMU、3，4-DCA各10. Omg,于50mL容量瓶中丙酮定容至刻。2样品制备2. 1水解反应1)制备30mL HCL溶液IOmL浓盐酸+20mL蒸馏水放置于300mL接受瓶(三角瓶) 中。称取20. Og样品置于IL反应瓶中(磨口圆底烧瓶)。2)加入少量玻璃珠防暴沸，加入250mL40 %冷却的NaOH溶液，混合均勻。加入20mL 二甲基硅油(止泡剂)，混合均勻。加入2g Zn和5mL TiCL3，加后迅速将回流和蒸馏装置接 好，蒸馏阀关闭，接上1中的接受瓶。冷凝管通自来水。(注若有油状或难溶物可加75mL 正己烧。)3)加热，控制液体从回流冷凝管最下边的球状管中冷凝，回流反应2小时，计时从 开始回流起。4)回流2小时后，打开蒸馏阀，稍提高加热温度进行蒸馏，收集120mL液体。5)将收集瓶放置于冷藏冰箱中。2. 2萃取反应1)将冷却的蒸馏馏分转入分液漏斗中，测其PH值。用25mL正己烷洗涤接收瓶，洗后转入上述分液漏斗中，振摇2min，收集下层水层。弃去上层。2)向下层水相中滴加2滴酚酞指示剂，搅拌下滴加40% NaOH溶液，至溶液变为粉 红色并在Imin内不变回无色，再加2滴NaOH溶液。冷却15min。3)用正己烷50mL，50mL萃取，每次萃取振摇2min，静置lOmin，收集上层有机相经 无水硫酸钠脱水。过滤，并用正己烷洗涤无水硫酸钠。合并。30°C水浴下减压浓缩近干，氮 气吹干。定容，GC检测。3、方法的检出限应用上述方法操作，在棉籽中分别添加敌草隆及其代谢物DCPU、DPCMU，添加浓度 为0.05mg/kg。以仪器3倍信噪比S/N设定为仪器检出限，则方法最低检出浓度(mg/kg)= 仪器检出限(ng)*稀释体积(mL)/[进样体积(ul)*取样量(g)。最后计算得方法检出限为 0.05mg/kgo4、回收率和精密度实验在空白棉籽中添加敌草隆及其代谢物DCPU、DCPMU标准溶液，按上述方法进行提 取、净化和测定。回收率见表1。试验表明，回收率符合农残检测要求，证明了该方法有较好 的回收率和重复性。表1敌草隆及其代谢产物添加回收率试验<table>table see original document page 5</column></row><table>本专利技术公开的测定棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的具体方法与现有技术相 比所具有的积极效果在于传统方法检测棉籽中敌草隆及其代谢物残留量，往往受杂质干扰强烈，3，4_ 二氯 苯胺(3，4-DCA)稳定且易检测。因此，将敌草隆及其代谢物全部转化为3，4-DCA后用气谱 测定，可准确测得敌草隆及其代谢物的残留量。本专利技术利用气相色谱来分析敌草隆及其代 谢产物，重现性好，杂质干扰极少，准确度好，精密度高，能够满足农药残留检测的需要。图1反应装置图；图 2. 3，4_DCA 标样图；图3棉籽添加图；图4棉籽空白图。具体实施例方式为了更充分的解释本专利技术的实施方法，提供了棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量 测定方法的制备实施实例。这些实施实例仅仅是解释、而不是限制本专利技术的范围。其中所 用的原料均有市售。实施例11)称取20. Og棉籽置于30mL 33% HCl本文档来自技高网...

【技术保护点】
棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行：（１）水解反应：１）称取２０．０ｇ样品置于３０ｍＬ３３％ＨＣｌ溶液中；２）加入少量玻璃珠防暴沸，加入２５０ｍＬ４０％冷却的ＮａＯＨ溶液，加入２０ｍＬ止泡剂，混合均匀；再加入２－５ｇＺｎ和５－７ｍＬＴｉＣｌ↓［３］，加热回流反应２小时；蒸馏收集液体，并将反应液放于冰箱中冷藏；（２）萃取反应：１）将收集的液体转入分液漏斗中，测其ＰＨ值，测其ＰＨ值。用２０－４０ｍＬ正己烷洗涤接收瓶，洗后转入上述分液漏斗中，振摇２－５ｍｉｎ，收集下层水层。弃去上层。２）向下层水相中滴加２滴酚酞指示剂，搅拌下滴加４０％ＮａＯＨ溶液，至溶液变为粉红色并在１ｍｉｎ内不变回无色，再加２滴ＮａＯＨ溶液，冷却１５－２０ｍｉｎ；３）用正己烷５０ｍＬ×２萃取，每次萃取振摇２－５ｍｉｎ，静置１０－１５ｍｉｎ，收集上层有机相经无水硫酸钠脱水，过滤，３０℃水浴下减压浓缩近干，氮气吹干，定容，采用气相色谱－氮磷检测器进行检测。

【技术特征摘要】
棉籽中敌草隆及其代谢产物残留量的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行(1)水解反应1)称取20.0g样品置于30mL33％HCl溶液中；2)加入少量玻璃珠防暴沸，加入250mL40％冷却的NaOH溶液，加入20mL止泡剂，混合均匀；再加入2-5g Zn和5-7mL TiCl3，加热回流反应2小时；蒸馏收集液体，并将反应液放于冰箱中冷藏；(2)萃取反应1)将收集的液体转入分液漏斗中，测其PH值，测其PH值。用20-40mL正己烷洗涤接收瓶，洗后转入上述分液漏斗中，振摇2-5min，收集下层水层。弃去上层。2)向下层水相中滴加2滴酚酞指示剂，搅...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭永泽，李辉，程奕，李娜，刘磊，张玉婷，邵辉，宋淑荣，
申请(专利权)人：天津市农业科学院中心实验室，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]