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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗病毒药物,特别涉及ptbp1作为寨卡病毒感染诊断标志物和治疗靶点的应用。
技术介绍
1、寨卡病毒(zika virus,简称zikv)是黄病毒科(flaviviridae)黄病毒属(flavivirus)成员之一,是一种由虫媒传播的单股正链rna病毒,也是引起新生儿小头症和吉兰-巴雷综合征的最主要病原体。近年来,寨卡病毒在全球多个国家和地区肆虐,对公共卫生安全构成了严重挑战。感染zikv的患者,轻者可能表现为发热、头痛、肌肉疼痛、结膜炎和皮疹等症状,而重症患者则可能面临严重的神经系统并发症,如胎儿小头畸形和成人格林巴利综合征等。遗憾的是,目前尚无特效疫苗或抗病毒药物可用于zikv感染的预防和治疗。
2、尽管多种zikv候选疫苗正在研发中,部分已进入临床试验阶段,但至今尚未有疫苗获得批准使用。在药物研发方面,抗zikv药物的设计主要聚焦于病毒本身或宿主细胞的抗病毒作用靶点,然而大多数仍停留在临床研究阶段,尚无任何抗zikv药物获得生产许可。因此,针对zikv的药物研发工作显得尤为紧迫,对于保障全球公共卫生安全具有重要意义。
技术实现思路
1、针对现有技术中的上述技术问题,本专利技术提供了一种ptbp1基因或蛋白,其表达水平与zikv感染存在相关性,随着zikv感染时间的延长,宿主细胞中ptbp1基因和蛋白表达水平显著增加;而且上调宿主细胞中ptbp1基因或蛋白表达水平,能在转录和翻译水平有效抑制zikv复制,阻断zikv对宿主细胞的感染能力,敲低ptbp1
2、本专利技术第一方面提供了ptbp1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
3、本专利技术解析了ptbp1在zikv感染细胞模型中的表达特点,发现ptbp1 mrna和蛋白在感染细胞中含量显著提高,且随着感染时间延长,ptbp1表达水平随之增加,表明ptbp1表达水平变化与zikv感染存在相关性。因此,ptbp1表达水平可作为zikv感染的诊断标志物,为zikv感染引发的相关疾病诊断提供了新的途径。
4、进一步地,所述诊断试剂或试剂盒检测受试者离体样本中ptbp1表达水平,所述ptbp1表达水平升高提示所述受试者患有感染寨卡病毒的风险。
5、进一步地,所述诊断试剂或试剂盒包括特异性扩增ptbp1基因的引物对,所述引物对的上下游引物的核苷酸序列如seq id no.6-7所示,或者包括特异性结合ptbp1蛋白的抗体。
6、基于与上述相同的专利技术构思,本专利技术第二方面提供了检测ptbp1表达水平的试剂在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
7、进一步地,检测所述ptbp1表达水平的试剂选自特异性扩增ptbp1基因的引物对或特异性结合ptbp1蛋白的抗体中的至少一种。
8、本专利技术第三方面提供了ptbp1作为治疗靶点在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用。
9、本专利技术解析了ptbp1对寨卡病毒感染的影响,通过探究过表达ptbp1以及敲低ptbp1表达的细胞系中zikv感染能力的不同,发现通过上调ptbp1表达水平,有利于降低病毒复制和感染能力,在细胞水平表现出良好的抗病毒效果;敲低ptbp1则表现出对zikv复制的促进;这些发现充分表明ptbp1具有抑制zikv复制的重要功能。以ptbp1作为寨卡病毒感染治疗靶点具有良好的抗病毒效果,为zikv感染引发的相关疾病的预防和/或治疗提供了新的有效治疗手段,对于zikv感染的临床治疗与预防具有重大的现实意义和应用价值。
10、进一步地,所述药物包括上调ptbp1表达水平的试剂,将其作为药物活性成分,通过增强ptbp1基因或蛋白的表达,实现抗zikv感染,降低zikv复制的作用,为抑制zikv提供了有效防治途径。
11、基于与上述相同的专利技术构思,本专利技术第四方面提供了上调ptbp1表达水平的试剂在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用。
12、进一步地,上述所述的上调ptbp1表达水平的试剂选自提高ptbp1 mrna的表达水平、提高ptbp1蛋白的表达水平的试剂或增强ptbp1蛋白活性的试剂中的至少一种。
13、进一步地,所述上调ptbp1表达水平的试剂选自ptbp1过表达质粒或hif-1α激活剂。
14、更进一步地,所述ptbp1过表达质粒为plv3-cmv-ptbp1-3×flag-puro,该质粒由ptbp1基因插入原始质粒plv3-cmv-mcs-3×flag-puro的多克隆位点得到。示例性地,所述多克隆位点可以为ecor i和bamh i酶切位点之间。
15、更进一步地,所述hif-1α激活剂为iox2(cas号:931398-72-0),结构式如下所示:
16、
17、本专利技术中,所述ptbp1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
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1.PTBP1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的PTBP1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,所述诊断试剂或试剂盒检测受试者离体样本中PTBP1表达水平,所述PTBP1表达水平升高提示所述受试者有感染寨卡病毒的风险。
3.根据权利要求2所述的PTBP1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,所述诊断试剂或试剂盒包括特异性扩增PTBP1基因的引物对,所述引物对的上下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6-7所示;
4.检测PTBP1表达水平的试剂在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
5.根据权利要求4所述的检测PTBP1表达水平的试剂在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,检测所述PTBP1表达水平的试剂选自特异性扩增PTBP1基因的引物对或特异性结合PTBP1蛋白的抗体中的至少一种。
6.PTBP1作为治疗靶点在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用。
>7.根据权利要求6所述的PTBP1作为治疗靶点在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用,其特征在于,所述药物包括上调PTBP1表达水平的试剂,上调所述PTBP1表达水平的试剂选自提高PTBP1 mRNA的表达水平、提高PTBP1蛋白的表达水平的试剂或增强PTBP1蛋白活性的试剂中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的PTBP1作为治疗靶点在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用,其特征在于,上调所述PTBP1表达水平的试剂选自PTBP1过表达质粒或HIF-1α激活剂。
9.根据权利要求8所述的PTBP1作为治疗靶点在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用,其特征在于,所述PTBP1过表达质粒为pLV3-CMV-PTBP1-3×FLAG-Puro;所述HIF-1α激活剂为IOX2。
10.上调PTBP1表达水平的试剂在制备预防和/或治疗寨卡病毒感染药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.ptbp1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的ptbp1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,所述诊断试剂或试剂盒检测受试者离体样本中ptbp1表达水平,所述ptbp1表达水平升高提示所述受试者有感染寨卡病毒的风险。
3.根据权利要求2所述的ptbp1作为诊断标志物在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,所述诊断试剂或试剂盒包括特异性扩增ptbp1基因的引物对,所述引物对的上下游引物的核苷酸序列如seq id no.6-7所示;
4.检测ptbp1表达水平的试剂在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用。
5.根据权利要求4所述的检测ptbp1表达水平的试剂在制备寨卡病毒感染辅助诊断试剂或试剂盒中的应用,其特征在于,检测所述ptbp1表达水平的试剂选自特异性扩增ptbp1基因的引物对或特异性结合ptbp1蛋白的抗体中的至少一种。
...【专利技术属性】
技术研发人员:罗震,饶梦兰,孔悦,阮晓岚,钟盼盼,
申请(专利权)人:暨南大学,
类型:发明
国别省市:
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