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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物,尤其涉及一株高效解磷的巨大芽孢杆菌突变株及其应用。
技术介绍
1、土壤中的磷是植物生长所必需的重要元素之一。然而,由于土壤中磷的吸附和固定,大部分磷元素难以被植物吸收利用。因此,开发具有高效解磷能力的微生物菌株是提高土壤磷利用率的关键。目前,已经有一些关于解磷微生物的研究,但这些微生物的解磷能力普遍较低。因此,需要进一步选育具有高效解磷能力和较强耐受性的微生物菌株,以满足农业种植的需求。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此,本专利技术的一个目的在于提供一株巨大芽孢杆菌bacillus megaterium ald(保藏编号:cgmccno.26142),该菌株为突变菌株,经鉴定、传代和效果验证,确定该突变菌株解磷能力达到305mg/l,较原始巨大芽孢杆菌菌株ly153-1(保藏编号cgmcc no.21828)的解磷能力提升40%以上。该菌株解磷能力的提升,可以更好地在农业种植中发挥作用,活化土壤中的磷养分,提高磷利用率,促进作物生长,这对于减肥增效战略的实施具有重要意义。
2、为此,本专利技术第一方面提供一种巨大芽孢杆菌突变菌株bacillus megateriumald,于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.26142。
3、传统的微生物选育方法主要包括自然选育和人工诱变。自然选育是通过自然环境中的微生物群体,经过长时间的
4、本专利技术采用常压室温等离子体诱变育种仪(artp)诱变和全自动高通量微生物液滴培养仪(mmc)靶向驯化,artp诱变时间为25s-35s,mmc采用有机酸作为适应因子,初始浓度为0.96‰,终浓度为1.5‰。通过诱变联合驯化技术,靶向选育耐有机酸、具有高效解磷能力的突变菌株。通过常压室温等离子体诱变和全自动高通量微生物液滴培养仪的靶向驯化技术,快速、准确地获得具有优良性能的突变菌株。该方法不仅可以缩短选育周期,而且可以提高突变体的性能和稳定性。通过该方法从而筛选获得一种新的巨大芽孢杆菌突变株bacillus megaterium ald,该突变株具有高效解磷能力,可活化土壤中的磷养分,提高磷利用率,促进作物生长。
5、本专利技术提供的巨大芽孢杆菌突变株bacillus megaterium ald连续传代5-10次后,遗传稳定性好。发酵培养基中含有有机酸浓度为1.2‰时,bacillus megaterium ald菌株相比原始菌株生物量提高80%以上;同时,在无机磷培养基中bacillus megaterium ald菌株解磷能力达到305mg/l,较原始菌株提高40%以上。该菌株对活化土壤养分,促进作物生长,促进减肥增效战略的实施具有重要意义。
6、根据本专利技术的实施方案,所述巨大芽孢杆菌突变菌株具有如seq in no:1所示的16s rdna序列。
7、acgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccagcttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagaatggttttatgggattggcttgacctcgcggtcttgcagccctttgtaccatccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtcaccttagagtgcccaactaaatgctggcaactaagatcaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtcactctgtcccccgaaggggaacgctctatctctagagttgtcagaggatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcagtcttgcgaccgtactccccaggcggagtgcttaatgcgttagctgcagcactaaagggcggaaaccctctaacacttagcactcatcgtttacggcgtggactaccagggtatctaatcctgtttgctccccacgctttcgcgcctcagcgtcagttacagaccaaaaagccgccttcgccactggtgttcctccacatctctacgcatttcaccgctacacgtggaattccgcttttctcttctgcactcaagttccccagtttccaatgaccctccacggttgagccgtgggctttcacatcagacttaagaaaccgcctgcgcgcgctttacgcccaataattccggataacgcttgccacctacgtattaccgcggctgctggcacgtagttagccgtggctttctggttaggtaccgtcaaggtacgagcagttactctcgtacttgttcttccctaacaacagagttttacgacccgaaagccttcatcactcacgcggcgttgctccgtcagactttcgtccattgcggaagattccctactgctgcctcccgtaggagtctgggccgtgtctcagtcccagtgtggccgatcaccctctcaggtcggctatgcatcgttgccttggtgagccgttacctcaccaactagctaatgcaccgcgggcccatctgtaagtgatagccgaaaccatctttcaatcatctcccatgaaggagaagatcctatccggtattagcttcggtttcccgaagttatcccagtcttacaggcaggttgcccacgtgttactcacccgtccgccgctaacgtcatagaagc(seq id no:1)
8、将所述巨大芽孢杆菌突变菌株和原始菌株(保藏编号为cgmcc no.21828)进行革兰氏染色和稀释涂布,结果显示突变株与原始菌株相似,均为革兰氏阳性,菌体呈杆状,具圆端。在lb培养基上,菌落近圆形,表面光滑,边缘整齐,淡黄色且不透明,有光泽。
9、本专利技术第二方面提供一种微生物菌剂。根据本专利技术的实施方案,所述微生物菌剂包括第一方面所述的巨大芽孢杆菌突变菌株。
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1.一种巨大芽孢杆菌突变菌株Bacillus megaterium ALD,于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.26142。
2.根据权利要求1所述的巨大芽孢杆菌突变菌株,其特征在于,所述巨大芽孢杆菌突变菌株具有如SEQ IN NO:1所示的16S rDNA序列。
3.一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂包括权利要求1或2所述的巨大芽孢杆菌突变菌株。
4.根据权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为菌液,所述菌液中巨大芽孢杆菌突变菌株的有效活菌数至少为30亿/ml,优选30-50亿/ml。
5.根据权利要求4所述的微生物菌剂,其特征在于,所述菌液通过对所述巨大芽孢杆菌突变菌株进行发酵培养获得;
6.根据权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为干粉状,所述菌粉活菌数至少为300亿/g,优选300-500亿/g。
7.根据权利要求6所述的微生物菌剂,其特征在于,所述干粉状的微生物菌剂通过对所述巨大芽孢杆菌突变菌
8.一种复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包括权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂。
9.根据权利要求8所述的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包括第一微生物菌剂和第二微生物菌剂,所述第一微生物菌剂为权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂,所述第二微生物菌剂包括选自枯草芽孢杆菌菌液、贝莱斯芽孢杆菌菌液、胶质芽孢杆菌菌液、短芽孢杆菌菌液、固氮芽孢杆菌菌液、多粘类芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、侧孢芽孢杆菌菌液、苏云金芽胞杆菌菌液、赖氨酸芽孢杆菌菌液中的至少之一;
10.一种复合微生物菌粉,其特征在于,包括干粉状的权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂。
11.根据权利要求10所述的复合微生物菌粉,其特征在于,所述复合微生物菌粉包括第一微生物菌粉和第二微生物菌粉,所述第一微生物菌粉为干粉状的权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂,所述第二微生物菌粉包括选自枯草芽孢杆菌菌粉、贝莱斯芽孢杆菌菌粉、胶质芽孢杆菌菌粉、短芽孢杆菌菌粉、固氮芽孢杆菌菌粉、多粘类芽孢杆菌菌粉、地衣芽孢杆菌菌粉、侧孢芽孢杆菌菌粉、苏云金芽胞杆菌菌粉、赖氨酸芽孢杆菌菌粉中的至少之一;
12.一种微生物肥料,其特征在于,包括以下a-d中的至少之一:
13.根据权利要求12所述的微生物肥料,其特征在于,所述微生物肥料为固体肥料或液体肥料;
14.根据权利要求12或13所述的微生物肥料,其特征在于,所述微生物肥料进一步包括基础肥料,所述基础肥料包括选自复合肥、无机肥、有机肥中的至少之一。
15.权利要求1或2所述的巨大芽孢杆菌突变菌株、权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂、权利要求8或9所述的复合菌剂、权利要求10或11所述的复合微生物菌粉、权利要求12-14中任一项所述的微生物肥料在促进植物生长、提升生物量或产量中的用途。
16.一种促进植物生长和/或提升生物量或产量的方法,其特征在于,包括
...【技术特征摘要】
1.一种巨大芽孢杆菌突变菌株bacillus megaterium ald,于2022年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.26142。
2.根据权利要求1所述的巨大芽孢杆菌突变菌株,其特征在于,所述巨大芽孢杆菌突变菌株具有如seq in no:1所示的16s rdna序列。
3.一种微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂包括权利要求1或2所述的巨大芽孢杆菌突变菌株。
4.根据权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为菌液,所述菌液中巨大芽孢杆菌突变菌株的有效活菌数至少为30亿/ml,优选30-50亿/ml。
5.根据权利要求4所述的微生物菌剂,其特征在于,所述菌液通过对所述巨大芽孢杆菌突变菌株进行发酵培养获得;
6.根据权利要求3所述的微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂为干粉状,所述菌粉活菌数至少为300亿/g,优选300-500亿/g。
7.根据权利要求6所述的微生物菌剂,其特征在于,所述干粉状的微生物菌剂通过对所述巨大芽孢杆菌突变菌株进行发酵培养,并将获得的发酵产物进行喷雾干燥获得;
8.一种复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包括权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂。
9.根据权利要求8所述的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包括第一微生物菌剂和第二微生物菌剂,所述第一微生物菌剂为权利要求3-7中任一项所述的微生物菌剂,所述第二微生物菌剂包括选自枯草芽孢杆菌菌液、贝莱斯芽孢...
【专利技术属性】
技术研发人员:李洪顺,邱鹏飞,魏伟,曲树栋,刘巍,孙鹰翔,
申请(专利权)人:中化化肥有限公司,
类型:发明
国别省市:
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