【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术大体上关于靶向补体c3的抗体及其片段。更具体而言，公开了抗c3抗体及其抗原结合片段以及用于治疗各种疾病或病症的方法。亦公开了包含抗c3抗体的药物组合物。
技术介绍
1、年龄相关性黄斑变性(amd)通常分为两大类，干性amd及湿性amd。干性amd(也称为非渗出性amd)的特征在于黄斑区域中存在疣(黄色沉积物)。湿性amd(也称为渗出性amd或新生血管性amd)的特征在于自黄斑下方的脉络膜生长异常血管。此过程也称为脉络膜新生血管且新的血管可使体液(诸如血液)渗漏至视网膜中及视网膜周围。
2、地理萎缩(ga)也称为萎缩性amd或晚期干性amd，为amd的一种晚期形式，其特征在于黄斑中的视网膜色素上皮及感光体损失。一旦ga涉及中央窝，则发生不可逆的视力损失。患有早期阶段ga的患者通常甚至在视力受影响之前就会经历视觉功能缺陷。
3、尚未完全知晓地理萎缩的潜在病理生理学；然而，认为补体活性失调为一种促成因素。已显示与对照物相比，ga患者的玻璃体样品、布鲁赫膜(bruch's membrane)及脉络膜的其他部分中的若干补体活化产物(包括c3a、c5a、c5b-9及补体因子h(cfh))的含量升高。此外，已报导在ga中，补体抑制剂(如cd59，一种膜攻击复合物(mac)形成的膜结合抑制剂)及膜辅因子蛋白质(mcp，一种对补体因子i(cfi)具有辅因子活性的膜结合补体调节剂)的含量降低。
4、ga治疗中的一个主要挑战为所观测到的在较深视网膜层中发生的补体活性失调。目前，还没有具有可接受的功效及患者
5、因此，对于有效治疗眼或眼部疾病(诸如地理萎缩)并恢复或预防患有此类疾病的患者的视力损失的新的及改进的治疗方法仍然存在未满足的需求。
技术实现思路
1、人类先天系统由补体途径构成。补体途径用于抵御化脓性细菌感染，桥接先天免疫及适应性免疫；以及处理免疫复合物及发炎损伤的产物。补体为一个由超过30种蛋白质构成的系统，参与血浆及细胞表面的级联反应。补体系统及其补体组分参与各种免疫过程。举例而言，补体c5b-9复合物，也称为末端复合物或膜攻击复合物(mac)，通过诱导膜渗透性损伤在细胞死亡中发挥重要作用。
2、存在三种已知的补体活化途径：经典途径、凝集素途径及替代途径。所有三种途径均导致c3转化酶对c3的切割，以及随后c5转化酶对c5的切割，释放出c3a、c3b、c5a及c5b。
3、补体c3为由13个不同域构成的大型蛋白质且分子尺寸为185千道尔顿(kilodalton)。在补体活化期间，c3经历蛋白水解切割及不同位点处的结构修饰。c3衍生的片段发挥不同效应功能且形成转化酶，所述转化酶有助于三种补体途径的放大环路。为避免疑义，且除非另有说明，否则本文所用的c3是指uniprot p01024的人类补体组分3及编码该蛋白质的核酸序列。人类补体c3的序列描述于seq id no:47中，且可在uniprot p01024下在线获得。
4、c3b衍生自原生c3，且为切割c3形成的两个元素中较大的一个。
5、经典途径及凝集素途径c3转化酶c4bc2a使全长c3切割成c3b及过敏毒素(anaphylatoxin)c3a。替代途径亦产生c3b及c3a，但利用替代途径c3转化酶c3bbb。此外，可在补体途径中产生其他c3降解产物。补体因子i(cfi)为能够将c3b永久性不活化成ic3b的血浆丝氨酸蛋白酶。接着，ic3b由cfi切割成其他片段(c3dg及c3c)。另一种c3蛋白水解产物c3d结合补体受体2(cr2)且可在b细胞的细胞周期控制中起重要作用。除c3衍生的蛋白质产物以外，补体途径包括(但不限于)c1、c2、c4、c4b、c4a c5、c5b、c5a、c6、c7、c8、c9、c1q、c1r、c1s、因子b、因子d、因子p、因子h、因子i、cd46(mcp)、cd55(daf)、cd59(mac-ip)、cr1(cd35)、cr2(cd21)、cr3、cr4、c3ar、c5ar1、c5ar2、crig、c4bpα链、c4bpβ链、纤维胶凝蛋白(ficolin)-1、甘露糖结合凝集素(mbl)、mbl相关丝氨酸蛋白酶-1(masp-1)及mbl相关丝氨酸蛋白酶-2(masp-2)。补体途径及各种补体途径组分进一步详细描述于noris等人,seminnephrol.2013；33(6):479-492中。
6、最近的研究表明，补体组分c3及c5为amd患者中隐结的主要成分。所述组分的存在以及膜攻击复合物(mac)c5b-9及其他急性期反应蛋白在隐结上方的rpe细胞中的存在被推测参与了可以触发补体活化及mac形成的过程。
7、已经表明，在患有ga的患者中，脉络膜及视网膜中补体系统的增加及不受控制的活化导致脉络膜毛细血管的破坏、rpe细胞及感光体的损伤及损失。专利技术人假设并说明了视网膜中c3的中和会阻断替代补体途径的放大环路，从而减少细胞毒性膜攻击复合物的产生及促发炎补体组分(c3a、c3b、ic3b、c5a)的产生，改善ga患者的临床结果。
8、然而，治疗眼或眼部疾病特别具有挑战性，因为由于多种障碍，包括但不限于血液-视网膜障壁，诸如rpe，治疗剂向眼睛的递送受到限制。穿透rpe并进入眼睛脉络膜的能力将增强药物的治疗潜力。
9、为了解决此临床情况，专利技术人开发了能够穿透rpe及眼睛脉络膜区域的布鲁赫膜的新抗体及其片段，从而靶向脉络膜区域的补体c3。本专利技术的抗体及其片段显示增强的特征以改善患有眼或眼部疾病的患者的临床结果。
10、在一个方面，本专利技术提供抗c3抗体或其抗原结合片段，其包含可变重链(vh)及可变轻链(vl)，
11、-其中该vh包含seq id no:1的cdr-h1序列、选自由seq id no:2及15组成的组的cdr-h2序列、seq id no:3的cdr-h3序列；及
12、-其中该vl包含seq id no:4的cdr-l1序列、选自由seq id no:5及18组成的组的cdr-l2序列及seq id no:6的cdr-l3序列。
13、在一个实施方案中，本专利技术提供抗c3抗体或其抗原结合片段，其包含：
14、-重链可变区，其包含与seq id no:20、22或24的氨基酸序列至少80％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％一致的氨基酸序列；及
15、-轻链可变区，其包含与seq id no:21、23或25的氨基酸序列至少80％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％一致的氨基酸序列。
16、在另一实施方案中，本专利技术提供抗c3抗体或其抗原结合片段，其包含：
17、-重链可变区，其包含与seq id no:20、22或24的氨基酸序列至少80％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％一致的氨基酸序列；及
18本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗C3抗体或其抗原结合片段，其包含可变重链(VH)及可变轻链(VL)，其中所述VH包含SEQ ID NO:1的CDR-H1序列、选自由SEQ ID NO:2及15组成的组的CDR-H2序列、SEQID NO:3的CDR-H3序列；及
2.根据权利要求1所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，
3.根据权利要求1至2中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
4.根据权利要求1至2中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其包含：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段为选自由以下组成的组：单链可变片段(scFv)、Fab片段、Fab'片段、Fv片段、双功能抗体及小抗体仿真物。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗C3抗
9.根据权利要求8所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段为单链片段，所述单链片段包含选自由SEQ ID NO:26、27、28、29、30及31组成的组的氨基酸序列。
10.一种抗C3抗体或其抗原结合片段，其结合根据SEQ ID NO:47中所示的人类补体C3的选自由残基366、392-396、413-421、425、427、442、453及478组成的组的至少一个氨基酸残基。
11.一种抗C3抗体或其抗原结合片段，其结合根据SEQ ID NO:47中所示的人类补体C3的氨基酸残基366、392-396、413-421、425、427、442、453及478中的所有残基。
12.根据权利要求10或11所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段为根据权利要求1至9中任一项的抗C3抗体或抗原结合片段。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段能够抑制补体活化途径，包括经典途径(CP)、凝集素途径(LP)及替代途径(AP)。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段能够结合补体C3及C3b。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段能够阻止C3转化酶的形成。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段能够穿透布鲁赫膜(Bruch’s membrane)。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段与人类C3结合的KD<50nM，优选KD<15nM，优选KD<10nM，优选KD<7nM，优选KD<1nM，优选KD<0.5nM，优选KD<0.2nM，优选KD<0.15nM，优选KD<0.10nM，优选KD<0.05nM，优选KD<0.04nM，或更优选KD<0.03nM。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗C3抗体或其抗原结合片段与人类C3b结合的KD<50nM，优选KD<15nM，优选KD<10nM，优选KD<7nM，优选KD<1nM，优选KD<0.5nM，优选KD<0.2nM，优选KD<0.15nM，优选KD<0.10nM，或更优选KD<0.05nM。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其对C3及C3b具有大致相等的结合亲和力。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其对C3a、iC3b、C4、C4b、C5和/或C5b的结合亲和力为约10-4M或更弱。
21.根据权利要求1至19中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，相较于对C3及C3b的结合亲和力，其对C3a、iC3b、C4、C4b、C5和/或C5b的结合亲和力更弱。
22.根据权利要求1至19中任一项所述的抗C3抗体或其抗原结合片段，其对C3a、iC3b、C4、C4b、C5和/或C5b...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种抗c3抗体或其抗原结合片段，其包含可变重链(vh)及可变轻链(vl)，其中所述vh包含seq id no:1的cdr-h1序列、选自由seq id no:2及15组成的组的cdr-h2序列、seqid no:3的cdr-h3序列；及
2.根据权利要求1所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，
3.根据权利要求1至2中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
4.根据权利要求1至2中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其包含：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段为选自由以下组成的组：单链可变片段(scfv)、fab片段、fab'片段、fv片段、双功能抗体及小抗体仿真物。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段为单链可变片段(scfv)。
9.根据权利要求8所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段为单链片段，所述单链片段包含选自由seq id no:26、27、28、29、30及31组成的组的氨基酸序列。
10.一种抗c3抗体或其抗原结合片段，其结合根据seq id no:47中所示的人类补体c3的选自由残基366、392-396、413-421、425、427、442、453及478组成的组的至少一个氨基酸残基。
11.一种抗c3抗体或其抗原结合片段，其结合根据seq id no:47中所示的人类补体c3的氨基酸残基366、392-396、413-421、425、427、442、453及478中的所有残基。
12.根据权利要求10或11所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段为根据权利要求1至9中任一项的抗c3抗体或抗原结合片段。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段能够抑制补体活化途径，包括经典途径(cp)、凝集素途径(lp)及替代途径(ap)。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段能够结合补体c3及c3b。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段能够阻止c3转化酶的形成。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段能够穿透布鲁赫膜(bruch’s membrane)。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段与人类c3结合的kd<50nm，优选kd<15nm，优选kd<10nm，优选kd<7nm，优选kd<1nm，优选kd<0.5nm，优选kd<0.2nm，优选kd<0.15nm，优选kd<0.10nm，优选kd<0.05nm，优选kd<0.04nm，或更优选kd<0.03nm。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其中所述抗c3抗体或其抗原结合片段与人类c3b结合的kd<50nm，优选kd<15nm，优选kd<10nm，优选kd<7nm，优选kd<1nm，优选kd<0.5nm，优选kd<0.2nm，优选kd<0.15nm，优选kd<0.10nm，或更优选kd<0.05nm。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其对c3及c3b具有大致相等的结合亲和力。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，其对c3a、ic3b、c4、c4b、c5和/或c5b的结合亲和力为约10-4m或更弱。
21.根据权利要求1至19中任一项所述的抗c3抗体或其抗原结合片段，相较于对c3及c...
【专利技术属性】
技术研发人员：L·博拉斯，P·古普塔，S·霍埃尔，S·荣米歇尔，C·莱斯纳，S·雷因德尔，P·R·里歇尔，F·施埃菲勒，A·索比拉杰，
申请(专利权)人：CDR生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。