【技术实现步骤摘要】
本申请涉及天然源生物材料，特别是涉及一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶及其制备方法和应用。
技术介绍
1、由于高血糖状态，糖尿病患者很容易出现伤口，其复杂的病理生理环境更容易反复感染、持续炎症、血管损坏及胶原蛋白重塑障碍，导致其难愈合甚至截肢。
2、纳米银（agnps）作为一种替代抗生素的高效杀菌剂，具有广谱杀菌性和不易产生耐药性等优点，已广泛应用于伤口敷料和手术设备中。目前，合成纳米银的主要方法是化学法，其具备合成速度快且可大量合成纳米银的优点，但在合成过程中必须使用有毒化学试剂作为封端剂和稳定剂，造成严重的环境污染及毒性，限制其在医疗中的应用。并且，纳米银使用过程中突然释放大量银离子可能会产生细胞毒性，尤其是在糖尿病伤口治疗过程中，长期皮肤接触会导致纳米银进入血液循环，大量沉积在肝、肾中引发炎症和氧化应激，导致细胞死亡。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术的第一个目的为提供一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶的制备方法；本专利技术的第二个目的为提供上述制备方法制得的枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶；本专利技术的第三个目的为提供上述枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶在促进糖尿病感染难愈伤口愈合中的应用。本申请提供的制备方法，对环境无污染，制备工艺简单；结合枳壳、纳米银和水凝胶各自优势，利用枳壳绿色合成稳定、低毒的多功能枳壳纳米银，并将其负载到柑橘果胶钙诱导水凝胶的网络结构中，既能实现枳壳纳米银控释，进一步增强其稳定性和生物相容性，又能使协同枳壳、纳米银和柑橘果胶钙诱导水
2、本专利技术提供的技术方案如下：
3、一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
4、1）依次利用水和乙醇对枳壳进行提取，得到枳壳水提液、枳壳醇提液；
5、2）枳壳水提液调节ph至碱性，与银离子溶液避光反应，得到枳壳纳米银溶液；
6、3）枳壳醇提液浓缩、干燥，得到枳壳醇提物；
7、枳壳纳米银溶液离心去除上清液后，与钙离子溶液、枳壳醇提物同时加入到柑橘果胶水溶液中，加热反应，超声，静置，得到枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶；且水凝胶中纳米银浓度为30~50μg/ml。
8、优选地，步骤1）中，将干燥的枳壳粉碎、过筛，加水，超声提取，过滤所得滤液经离心后收集上清液，得到枳壳水提液；
9、向过滤所得滤渣中加入乙醇，超声提取，过滤所得滤液经离心收集上清液，得到枳壳醇提液；
10、优选地，将干燥的枳壳粉碎、过筛，按照枳壳与水(5~20):100的质量比加水，在800~1000w、40~60khz条件下超声提取30~60 min，过滤所得滤液，在10000~15000rpm条件下离心10~20min，然后收集上清液，得到枳壳水提液；
11、向过滤所得滤渣中按照滤渣与乙醇(5~20g):100ml的比例加入乙醇，在800~1000w、40~60khz条件下超声提取30~60 min，过滤所得滤液，在10000~15000rpm条件下离心10~20min，然后收集上清液，得到枳壳醇提液。
12、优选地，步骤2）中，枳壳水提液调节ph至8~12，与浓度为1~10 mmol/l的银离子溶液，按照银离子溶液与枳壳水提液的体积比(9~1):1的比例混合，在40~90℃条件下避光反应15min~8h，在10000~12000rpm条件下离心5~10min去除上清液，沉淀经水洗、-20℃~-80℃条件下冷冻后再冻干，然后使用水重新分散，制得枳壳纳米银溶液。
13、优选地，步骤3）中，枳壳醇提液浓缩、干燥，得到枳壳醇提物；
14、枳壳纳米银溶液离心去除上清液，与钙离子溶液、枳壳醇提物一同滴加到柑橘果胶水溶液中，混匀后70~90℃加热15~30min，超声1~3min，在室温~4℃下静置过夜形成凝胶，得到枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶。
15、优选地，钙离子溶液具体为氯化钙溶液，且氯化钙浓度为10~90mg/g柑橘果胶；
16、枳壳醇提物的添加量为5~40mg/g柑橘果胶。
17、优选地，柑橘果胶水溶液由以下步骤制备：柑橘果胶粉末分散于水中，在温度70~90℃、转速600~800rpm条件下搅拌4~12h混匀，调整ph为5~9，即得。
18、优选地，柑橘果胶与水的质量比为(2~4):100；
19、柑橘果胶为酯化度＜50%的低酯果胶。
20、上述任一项所述的制备方法制得的枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶。
21、上述枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶在促进糖尿病感染难愈伤口愈合中的应用。
22、本申请提供一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶的制备方法，包括以下步骤：1）依次利用水和乙醇对枳壳进行提取，得到枳壳水提液、枳壳醇提液；2）枳壳水提液调节ph至碱性，与银离子溶液避光反应，得到枳壳纳米银溶液；3）枳壳醇提液浓缩、干燥，得到枳壳醇提物；枳壳纳米银溶液离心去除上清液后，与钙离子溶液、枳壳醇提物同时加入到柑橘果胶水溶液中，加热反应，超声，静置，得到枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶；且水凝胶中纳米银浓度为30~50μg/ml。本申请提供的制备方法，简单、环保、经济，利用天然植物将银离子还原为纳米级的银单质，有效避免了使用有毒的还原剂和有机溶剂的问题，具备对环境无污染、原料易得、价格低廉，制备工艺简单，能耗低等优点。
23、枳壳（fructus aurantii）是芸香科植物酸橙（ citrusaurantiuml.）的干燥未成熟果，一种历史悠久临床常用中药。枳壳富含黄酮、香豆素、生物碱和挥发油，还有多糖、三萜类、维生素类、果胶、色素、微量元素等化学成分。本申请利用枳壳中富含的多种代谢物将ag+还原得到0价银纳米粒子（agnps），这些代谢物能同时起还原剂和稳定剂的作用，符合“绿色化学”的发展要求。且，这些代谢物还具有抗菌、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性，能赋予纳米银粒子特殊的生物效应。
24、本申请提供的方法，首先依次利用水和乙醇对枳壳黄酮类物质进行提取，分别得到枳壳水提液和枳壳醇提液；枳壳水提液中主要含有花青素和黄酮苷等黄酮类物质，其表面富含酚羟基，可与ag+反应生成纳米银，但由于其水溶性较好，在处理过程中未反应的黄酮类物质被去除，纳米银体系中黄酮类化合物的抗氧化和抗自由基活性不佳。而枳壳醇提液主要含有黄酮醇、异黄酮等黄酮类物质，具有抗氧化和抗自由基活性，加入水凝胶中可使水凝胶呈现还原性环境，且黄酮类物质的酚羟基与纳米银之间的络合作用可增强纳米银颗粒的稳定性，使其不易团聚，从而使纳米银更加稳定而不被氧化。由于黄酮类物质富含苯环和酚羟基，酚羟基可与柑橘果胶形成氢键，其苯环结构可增强水凝胶的强度并通过空间位阻和桥架作用使水凝胶内部呈现更多的纳米银流动通道。此外，枳壳醇提液因其抗氧化及抗炎活性加入水凝胶中将更有利于加速伤口的愈合。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中，将干燥的枳壳粉碎、过筛，加水，超声提取，过滤所得滤液经离心后收集上清液，得到枳壳水提液；
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将干燥的枳壳粉碎、过筛，按照枳壳与水(5~20):100的质量比加水，在800~1000W、40~60KHz条件下超声提取30~60 min，过滤所得滤液，在10000~15000rpm条件下离心10~20min，然后收集上清液，得到枳壳水提液；
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）中，枳壳水提液调节pH至8~12，与浓度为1~10 mmol/L的银离子溶液，按照银离子溶液与枳壳水提液的体积比(9~1):1的比例混合，在40~90℃条件下避光反应15min~8h，在10000~12000rpm条件下离心5~10min，去除上清液，沉淀经水洗、-20℃~-80℃条件下冷冻后再冻干，然后使用水重新分散，制得枳壳纳米银溶液。
5.根据权利要求1所述的制备方
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，钙离子溶液具体为氯化钙溶液，且氯化钙浓度为10~90mg/g柑橘果胶；
7.根据权利要求1、5-6中任一项所述的制备方法，其特征在于，柑橘果胶水溶液由以下步骤制备：柑橘果胶粉末分散于水中，在温度70~90℃、转速600~800rpm条件下搅拌4~12h混匀，调整pH为5~9，即得。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，柑橘果胶与水的质量比为(2~4):100；
9.权利要求1-8中任一项所述的制备方法制得的枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶。
10.权利要求9所述的枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶在促进糖尿病感染难愈伤口愈合中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种枳壳纳米银负载柑橘果胶水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中，将干燥的枳壳粉碎、过筛，加水，超声提取，过滤所得滤液经离心后收集上清液，得到枳壳水提液；
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，将干燥的枳壳粉碎、过筛，按照枳壳与水(5~20):100的质量比加水，在800~1000w、40~60khz条件下超声提取30~60 min，过滤所得滤液，在10000~15000rpm条件下离心10~20min，然后收集上清液，得到枳壳水提液；
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）中，枳壳水提液调节ph至8~12，与浓度为1~10 mmol/l的银离子溶液，按照银离子溶液与枳壳水提液的体积比(9~1):1的比例混合，在40~90℃条件下避光反应15min~8h，在10000~12000rpm条件下离心5~10min，去除上...
【专利技术属性】
技术研发人员：常丽，栾明宝，刘斌，童春义，段文杰，高泽昕，
申请(专利权)人：中国农业科学院麻类研究所，
类型：发明
国别省市：
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