【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，尤其涉及一种通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法及应用。
技术介绍
1、链霉菌的形态分化和次级代谢是同步发生的，而调控基因在其中扮演了重要的角色。调控因子不仅能影响链霉菌的形态分化，还能调控链霉菌的次级代谢，而且这些代谢调控途径并不是孤立的，而是越来越趋向于形成一个复杂的网络，且每个网络之间又存在着叠加和级联效应。当前对这些重要代谢进程相关的调控因子的研究，为我们在链霉菌内建立了一个代谢调控网络。单一调控网络节点的变化，都将对链霉菌的代谢层次产生影响，而关键代谢调控网络节点的寻找与研究，都将为进一步解析链霉菌的复杂生活史及对它们进行改造利用提供深厚的理论支持。
2、林可链霉菌是林可霉素工业发酵生产上的一种主要放线菌，其中，活性a组分用于治疗金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等革兰氏阳性菌和某些厌氧的革兰氏阴性菌所引起的感染，与已知抗生素不表现交叉抗性，是一种重要的高效抗生素药物。林可霉素对组织和细胞的穿透力强，无需做皮试而应用方便，因此在一定程度上可以替代易产生过敏反应的青霉素，在临床上被广泛使用。此外，林可霉素还可作为原料药，化学半合成更为重要的临床药物克林霉素，具有很高的经济附加值。我国是林可霉素原料药的主要生产国和出口国，在全球的林可霉素发酵生产中占据重要的地位。但我国林可霉素菌株工业发酵在8～10g/l，与国外先进水平(约15g/l)相比仍有差距。基因工程方法作为获得抗生素高产菌株的重要途径之一，亟需对林可霉素生物合成及其调控通路进行探究，从而对林可霉素工业菌株进行定
3、链霉菌中tpr家族调控因子nsda能调控抗生素的合成和形态分化。本专利技术通过生物信息学比对分析，在林可链霉菌中筛选到了与nsda基因高度同源的slcg_2390基因(与天蓝色链霉菌nsda基因同源性高达88％)。据此，尝试通过改造林可链霉菌slcg_2390基因，提高林可霉素产量。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法及应用。
2、本专利技术采用以下技术方案解决上述技术问题：
3、一种通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法，通过基因工程途径使林可链霉菌中slcg_2390基因缺失，获得林可霉素高产菌株，用所得的菌株发酵生产林可霉素；其中，slcg_2390基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、作为本专利技术的优选方式之一，所述slcg_2390基因编码的氨基酸序列如seq idno.2所示。
5、作为本专利技术的优选方式之一，所述slcg_2390基因表达产物负向调控林可霉素生物合成。
6、一种上述通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法的应用，在林可链霉菌工业菌株中敲除slcg_2390基因，获得高产突变株，用于林可霉素a生产。
7、作为本专利技术的优选方式之一，所述林可链霉菌工业菌株具体选择林可链霉菌lc-g。所述林可链霉菌lc-g为公众可直接购买获得的菌株，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号cgmcc：7.209。
8、本专利技术相比现有技术的优点在于：
9、本专利技术研究中筛选到了林可霉素生物合成负调控因子slcg_2390，通过基因工程途径敲除林可链霉菌基因组上的slcg_2390基因，能够构建林可霉素高产菌株，为工业生产提高林可霉素产量提供技术支持。
10、具体地，在林可链霉菌lc-g中敲除slcg_2390基因，林可霉素a产量可提高20％；而在δslcg_2390突变株中回补slcg_2390基因，林可霉素产量得到恢复；在lc-g中过表达slcg_2390基因，林可霉素a产量降低35％；以上表明，slcg_2390基因的表达产物slcg_2390负向调控林可霉素a合成。
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1.一种通过改造林可链霉菌SLCG_2390基因提高林可霉素产量的方法，其特征在于，通过基因工程途径使林可链霉菌中SLCG_2390基因缺失，获得林可霉素高产菌株，用所得的菌株发酵生产林可霉素；其中，SLCG_2390基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的通过改造林可链霉菌SLCG_2390基因提高林可霉素产量的方法，其特征在于，所述SLCG_2390基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求1所述的通过改造林可链霉菌SLCG_2390基因提高林可霉素产量的方法，其特征在于，所述SLCG_2390基因表达产物负向调控林可霉素生物合成。
4.一种如权利要求1～3任一所述的通过改造林可链霉菌SLCG_2390基因提高林可霉素产量的方法的应用，其特征在于，在林可链霉菌工业菌株中敲除SLCG_2390基因，获得高产突变株，用于林可霉素A生产。
5.根据权利要求4所述的通过改造林可链霉菌SLCG_2390基因提高林可霉素产量的方法的应用，其特征在于，所述林可链霉菌工业菌株具体选择林可
...【技术特征摘要】
1.一种通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法，其特征在于，通过基因工程途径使林可链霉菌中slcg_2390基因缺失，获得林可霉素高产菌株，用所得的菌株发酵生产林可霉素；其中，slcg_2390基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的通过改造林可链霉菌slcg_2390基因提高林可霉素产量的方法，其特征在于，所述slcg_2390基因编码的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.根据权利要求1所述的通过改造林可链霉菌...
【专利技术属性】
技术研发人员：许玉荣，朱金苗，陈媛媛，吴杭，李杰，王静茹，
申请(专利权)人：合肥师范学院，
类型：发明
国别省市：
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