【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于检测，具体涉及一种发酵液、酒醅和白酒中阿魏酸和4-乙烯基愈创木酚的同时测定方法。
技术介绍
1、阿魏酸是一种健康活性成分，具有抗氧化、抗血栓、降血脂、防治冠心病、抗菌消炎、抗突变和防癌等生理功能，被广泛应用于医药、保健品、化妆品和食品添加剂等领域。米糠、大麦和小麦麸皮具有较高含量的阿魏酸。4-乙烯基愈创木酚(4-vg)是目前较为常用的高档香料之一，同时也具有抗氧化等健康活性，商业价值是阿魏酸的40倍左右。在白酒酿造领域，随着“健康中国”战略的提出以及人们健康饮食意识的提高，各大酒企对白酒健康和品质提升研究越发重视，针对白酒健康化的研究越来越多。阿魏酸和4-vg因作为酒醅中常见的健康成分，一直备受关注，有研究称酒醅在发酵过程中，一些微生物能够以阿魏酸为前体物质将阿魏酸转化为4-vg，因而对白酒酿造过程中阿魏酸和4-vg的代谢机理、含量动态变化以及功能菌株的挖掘研究，也作为白酒健康研究的重点之一。
2、目前对两者的测定方法主要是，阿魏酸因沸点较高，主要通过液相色谱仪器进行测定，4-vg有通过气质和液相色谱进行分析。现有的测定方法，如中国专利202211023212.2《原位测定白酒中挥发性酚类物质的方法》和202011412236.8《酒醅、黄浆水、白酒中二氢阿魏酸及阿魏酸的同时测定方法》，只能对阿魏酸和4-vg进行分别测定，并且阿魏酸只能通过单一的保留时间定性，极大可能造成目标物质错认，同时还导致时间成本和试剂耗材等资源的浪费。
技术实现思路
1、本专利技术
2、本专利技术对发酵液、酒醅和白酒中的阿魏酸和4-vg的同时测定方法，是基于uplc-q-tof/ms实现的，首先是标准样品配制和待测样品的前处理，使用acquity uplc beh c18(1.7μm×2.1×100mm)色谱柱进行梯度洗脱分离，随后采用电喷雾离子源，在负离子模式下进行扫描，通过对应的特征离子进行提取并获得积分峰面积，从而实现对阿魏酸和4-vg的快速定量分析。
3、本专利技术发酵液、酒醅和白酒中阿魏酸和4-乙烯基愈创木酚的同时测定方法，包括如下步骤：
4、步骤1：待测样品的前处理
5、(1)发酵液取1～5ml，以1：10～30的体积比溶解于50％-60％乙醇中，离心后取上清液，过0.22um有机滤膜，待测；
6、(2)酒醅：称取样品3-10g，用20-30ml 50％～60％vol甲醇提取，60℃～80℃超声20-40min，离心并提取上清液，稀释5～10倍，然后过0.22μm有机滤膜，待测；
7、(3)白酒样品直接过0.22μm滤膜待测。
8、步骤2：标准品的配制
9、将阿魏酸和4-vg分别用乙醇溶解，配成母液标品，母液标品中阿魏酸和4-vg浓度分别为1～5g/l。
10、步骤3：标准曲线的绘制
11、采用外标法定量，配制不同梯度浓度的标准溶液，标准曲线浓度范围为100～1000ug/l，以每个浓度下标准品对应的母离子提取离子色谱图中的积分峰面积为纵坐标，该标准品的浓度为横坐标，建立标准曲线，分别获得阿魏酸和4-vg标准曲线。
12、步骤4：待测样品的检测
13、将步骤1前处理后的待测样品进行检测，将获得的待测样品谱图与标准品谱图对比，保留时间和碎片离子相同的即为对应物质，然后通过标准曲线线性回归方程计算得出对应阿魏酸和4-vg的含量。
14、上述测定过程中：
15、色谱检测条件设置如下：
16、色谱柱：acquity uplc beh c18(1.7μm×2.1×100mm)；
17、流动相：流动相a：0.1％甲酸水溶液，流动相b：甲醇，梯度洗脱；柱温：30℃；进样量：2μl。
18、进一步，梯度洗脱程序设置为：0-1min，90％a+10％b；1-6min，90％a+10％b～10％a+90％b；6-8min，10％a+90％b；8.1-10min，90％a+10％b，流速0.3ml/min。
19、质谱检测条件设置如下：
20、质谱仪uplc-q-tof/ms：电喷雾离子源，负离子扫描模式，target ms：151.07472，离子源温度120℃，脱溶剂温度450℃，脱溶剂气流量1000l/h，锥孔气流量50l/h，扫描范围50-1200da，毛细管电压：2.5kv，取样锥孔电压：20v，扫描时间：0.2s，参比质量：亮氨酸脑啡呔[m-h]-＝554.2615。
21、步骤4中，阿魏酸和4-vg分别对应的母离子为：阿魏酸m/z 193.09051、4-vg m/z
22、151.07472。
23、本专利技术的有益效果体现在：
24、本专利技术方法能够借助uplc-q-tof/ms精密仪器优势，改变以往采用液相仅通过物质保留时间进行定性确认，通过保留时间和离子谱图双重确认，实现物质的准确定性和定量分析。
25、本专利技术还实现了对酿造体系中如发酵液、酒醅和白酒不同的基质中，对阿魏酸和4-vg更加准确的定性和定量，弥补了在白酒酿造过程中，酒醅、白酒中阿魏酸和4-vg健康成分的含量变化研究空白，更有利于对产生阿魏酸和4-vg相关功能菌株的挖掘，以及对酿造体系微生物菌群代谢网络的认识，对白酒健康和品质提升具有重要意义。
26、本专利技术方法准确性和灵敏度高，为后续白酒健康和品质提升研究奠定了基础。
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1.一种发酵液、酒醅和酒样中阿魏酸和4-乙烯基愈创木酚的同时测定方法，其特征在于包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种发酵液、酒醅和酒样中阿魏酸和4-乙烯基愈创木酚的同时测定方法，其特征在于包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘青阳，陆玮，杨贞，张松祥，汤有宏，
申请(专利权)人：安徽古井贡酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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