【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体而言，涉及一株核桃腐烂病生防细菌讨厌无色杆菌p52及其应用。
技术介绍
1、核桃腐烂病，又称烂皮病、黑水病，是一种较为常见的真菌性病害，普遍认为是由壳囊孢属(cytospora sp.)真菌引起，常见的致病种为金黄壳囊孢菌(cytosporachrysosperma)。核桃树腐烂病在中国核桃产区均有发生。该病害主要危害核桃枝干及树皮，因树龄和感病部位不同，病害症状也不同。幼树受害后，病部深达木质部，周围出现愈伤组织，呈暗灰色菱形斑，水渍状，手指按压时出现液体，有酒糟味；发病后期病斑下陷，产生黑斑，继而病斑纵裂，流出大量黑水。成年树受害后，因树皮较厚，病斑外部无明显症状，当发现皮层向外溢出黑液时，皮下已出现较大的溃疡面。在核桃主栽区及管理粗放、树势衰弱的地区，该病害严重时发病率可达80％以上，导致大枝甚至全株死亡，严重威胁核桃生产。
2、目前，核桃腐烂病的主要防治方式包括化学防治和物理防治。化学防治虽然见效较快，但是威胁生态安全与人畜健康，且过量施用化学药剂易导致病原菌抗药性的出现，增加防控难度。物理防治主要利用刮刀等工具对腐烂病病斑进行刮除，能够减轻腐烂病对核桃树的危害，但无法根治，且易复发。生物防治已成为核桃腐烂病绿色高效防控的重要措施之一。
3、核桃腐烂病的生物防治主要利用防病微生物抑制该病害的发生，该措施具有无残毒、无污染、对人畜无害、不易产生抗药性与防效持久等优点。因此，核桃腐烂病高效生防微生物菌种资源的挖掘与高效应用，已引起广泛的关注。
4、有鉴于此，特提出
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一株核桃腐烂病生防细菌讨厌无色杆菌p52及其应用。所述的讨厌无色杆菌分离自毛果杨盆栽苗，所述的讨厌无色杆菌及由其制备的微生物制剂对壳囊孢属(cytospora sp.)真菌具有显著的拮抗作用，对核桃腐烂病具有良好的防治效果，应用前景广泛。
2、为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
3、在一个方面，本专利技术提供了一株讨厌无色杆菌，所述的讨厌无色杆菌为讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmcc no.28849。
4、本专利技术从毛果杨盆栽苗分离获得一株讨厌无色杆菌，该菌株对壳囊孢属(cytospora sp.)真菌具有显著的拮抗效果，在pda平板上的抑菌率达到62.4％，离体条件下，对核桃枝条腐烂病的防治效果达到76％。本专利技术中的讨厌无色杆菌及由其制备的微生物制剂对核桃腐烂病的防治效果显著，具有良好的应用前景。
5、在一些具体的实施方式中，本专利技术所述的讨厌无色杆菌(achromobacterinsuavis)p52的16s rrna基因片段的序列如seq id no.1所示。
6、在另一个方面，本专利技术提供了一种生防微生物制剂，所述微生物制剂的活性成分包含所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52。
7、本专利技术中的生防微生物制剂包含从毛果杨盆栽苗分离获得的讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52，该菌株对壳囊孢属(cytospora sp.)真菌具有显著的拮抗作用，本专利技术提供的生防微生物制剂对核桃腐烂病的防治效果显著，具有良好的应用前景。
8、在一些具体的实施方式中，所述生防微生物制剂包括所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的发酵培养物，例如包括但不限于菌株培养物、发酵培养液或发酵培养液的过滤液。
9、在一些具体的实施方式中，所述生防微生物制剂中，所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的含量为1×106cfu/ml以上。
10、在一些具体的实施方式中，所述生防微生物制剂中，所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的含量优选为1×106cfu/ml至1×109cfu/ml。
11、在一些具体的实施方式中，通过在液体培养基中发酵所述的讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52，收集培养物，得到所述的生防微生物制剂。
12、在本专利技术中，所述生防微生物制剂还可以与其它助剂或辅料一起制备成为生防微生物制剂。
13、在另一个方面，本专利技术提供了所述讨厌无色杆菌或所述生防微生物制剂在防治植物病害中的应用。
14、在一些具体的实施方式中，所述应用包括将所述讨厌无色杆菌接种于液体培养基中，在180-200rpm、28-32℃条件下，培养24h以上，将发酵液、发酵液离心后获得的上清液、采用无菌滤膜过滤上清液获得的无菌滤液、发酵混合物用于控制或防治植物病害。
15、在一些具体的实施方式中，所述植物包括，但不限于：核桃、杨树或柳树中的至少一种。
16、在一些具体的实施方式中，所述植物为核桃。
17、在一些具体的实施方式中，所述植物病害包括：壳囊孢属真菌引发的病害。
18、在一些具体的实施方式中，所述植物病害例如包括，但不限于：腐烂病。
19、在一些具体的实施方式中，所述植物病害例如包括，但不限于：核桃腐烂病。
20、在另一个方面，本专利技术提供了一种防治核桃腐烂病的方法，所述的方法包括向核桃施用所述的讨厌无色杆菌或含有其作为活性成分的生防微生物制剂。
21、在一些具体的实施方式中，所述方法为将所述讨厌无色杆菌制成菌悬液后施用于核桃发病部位。
22、在一些具体的实施方式中，将所述讨厌无色杆菌制成菌悬液后施用于核桃枝干。
23、生物样品保藏信息：讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52，该菌株已于2023年11月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmcc no.28849；保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101。经保藏中心于2023年11月03日检测为存活菌株。
24、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
25、(1)本专利技术提供的讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52是一株全新的菌株，本专利技术首次发现其在防治植物腐烂病中的效果，该菌株尤其对核桃腐烂病具有良好的生防潜力，离体条件下，对核桃枝条腐烂病的防治效果达到76％。
26、(2)本专利技术中讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的使用安全性高、成本低、无残留、环保高效。平板拮抗与离体核桃枝条防病实验的结果表明，本专利技术中的菌株p52对核桃腐烂病具有显著的防治效果，为核桃、杨树等木本植物腐烂病的防治提供了新的有效途径，具有良好的应用前景。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株核桃腐烂病生防细菌讨厌无色杆菌P52，其特征在于，所述讨厌无色杆菌为讨厌无色杆菌(Achromobacter insuavis)P52，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.28849。
2.一种生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂的活性成分包含权利要求1所述的讨厌无色杆菌(Achromobacter insuavis)P52。
3.根据权利要求2所述的生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂包括所述讨厌无色杆菌(Achromobacter insuavis)P52的发酵培养物。
4.根据权利要求3所述的生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂中，所述讨厌无色杆菌(Achromobacter insuavis)P52的含量为1×106CFU/mL以上；优选为1×106CFU/mL至1×109CFU/mL。
5.根据权利要求4所述的生防微生物制剂，其特征在于，通过在液体培养基中培养所述讨厌无色杆菌(Achromobacter insuavis)P52，收集发酵培养
6.根据权利要求1所述的讨厌无色杆菌或权利要求2-5中任一项所述的生防微生物制剂在防治植物病害中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述植物病害包括：壳囊孢属真菌引发的病害。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述植物病害包括：腐烂病；优选为核桃腐烂病。
9.一种防治核桃腐烂病的方法，其特征在于：所述方法包括向核桃施用权利要求1所述的讨厌无色杆菌或权利要求2-5中任一项所述的生防微生物制剂。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法为将所述讨厌无色杆菌制成菌悬液后施用于核桃发病部位；优选地，施用于核桃枝干。
...【技术特征摘要】
1.一株核桃腐烂病生防细菌讨厌无色杆菌p52，其特征在于，所述讨厌无色杆菌为讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmcc no.28849。
2.一种生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂的活性成分包含权利要求1所述的讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52。
3.根据权利要求2所述的生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂包括所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的发酵培养物。
4.根据权利要求3所述的生防微生物制剂，其特征在于，所述生防微生物制剂中，所述讨厌无色杆菌(achromobacter insuavis)p52的含量为1×106cfu/ml以上；优选为1×106cfu/ml至1×109cfu/...
【专利技术属性】
技术研发人员：牛犇，陆森，包盛波，张强，王琦，吴迪，王卫雄，芦朋飞，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。