System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 离体蛋白酶活化和检测制造技术_技高网

离体蛋白酶活化和检测制造技术

技术编号:42314140 阅读:3 留言:0更新日期:2024-08-14 15:57
本申请提供了用于使来自对象的体液样品与分子离体接触的方法。所述方法包括使体液与这样的分子接触,所述分子包含其报道物,并且所述报道物被体液中的物质切割。将另外的成分添加至该体液样品,并且与不添加所述成分的样品相比,所切割的报道物的形成速率或量更高。还描述了可通过所述方法确定的疾病和病症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍


技术实现思路

1、本文中提供了这样的方法,其包括使来自对象的体液样品与酶辅因子以及包含可切割接头和报道物的合成分子接触。本文中还提供了这样的方法,其中所述分子包含可切割接头和报道物,并且其中所述可切割接头被来自所述体液样品的物质切割,从而将所述报道物从所述分子释放。本文中还提供了用于将成分引入至所述体液样品的方法。本文中还提供了用于检测释放的报道物的方法,其中与不添加所述成分的样品相比,所述释放的报道物的所述形成速率或所述量更低。

2、本文中还提供了这样的方法,其中所述酶辅因子是盐。本文中还提供了这样的方法,其中所述盐是锌盐。本文中还提供了这样的方法,其中所述锌盐包含硫化锌(zns)、碳酸锌(znco3)、铬酸锌(zncro4)、氧化锌(zno)、氯化锌(zncl2)、硫酸锌(znso4)、溴化锌(znbr2)、乙酸锌(zn(ch3co2)2)、硝酸锌(zn(no3)2)、或其任何组合。本文中还提供了这样的方法,其中所述锌盐包含zncl2。

3、本文中还提供了这样的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.01mm至约20mm。本文中还提供了这样的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.1mm至约10mm。本文中还提供了这样的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.2mm至约5mm。本文中还提供了这样的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.5mm至约2mm。本文中还提供了这样的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约1mm。

4、本文中还提供了这样的方法,其中所述体液样品选自血液、血浆、骨髓液、淋巴液、胆汁、羊水、黏膜液、唾液、尿、脑脊液、脊髓液、滑液、腹水、精液、导管抽吸物、粪便、大便、阴道流出物、泪液、组织裂解物和患者来源的细胞系上清液。本文中还提供了这样的方法,其中所述体液样品包含冲洗液、调节介质或缓冲剂、拭子病毒转运介质、盐水、培养基、或细胞培养上清液。本文中还提供了这样的方法,其中所述冲洗液选自漱口冲洗液(mouthwashrinse),支气管肺泡冲洗液,灌洗液,洗发冲洗液(hair wash rinse),鼻喷流出物(nasalspray effluent),施加至盐水或任何介质的任何身体表面、孔口、器官结构或实体瘤活检物拭子或其任何衍生物。本文中还提供了这样的方法,其中所述体液样品是血浆样品。

5、本文中还提供了这样的方法,其还包括将抗凝剂引入至所述血浆样品。本文中还提供了这样的方法,其中所述抗凝剂包含edta,柠檬酸盐,肝素,草酸盐,其任何盐、溶剂合物、对映体、互变异构体和几何异构体,或其任何混合物。本文中还提供了这样的方法,其中所述抗凝剂包含k2edta。本文中还提供了这样的方法,其中所述抗凝剂包含k3 edta。

6、本文中还提供了这样的方法,其中所述物质是蛋白酶。本文中还提供了这样的方法,其中所述蛋白酶包含基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,mmp)或半胱氨酸蛋白酶。本文中还提供了这样的方法,其中所述mmp包含mmp2、mmp19、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp27、mpnd、mt1-mmp、mt2-mmp、mt3-mmp、mt4-mmp、mt5-mmp、mt6-mmp、mysm1、或其组合。

7、本文中还提供了这样的方法,其中所述可切割接头是肽。本文中还提供了这样的方法,其中所述肽包含选自seq id no:117、263、349和417的氨基酸序列。

8、本文中还提供了这样的方法,其包括基于对所述释放的报道物进行的所述检测来确定所述对象的疾病或病症。本文中还提供了这样的方法,其中所述确定包括有监督机器学习分类算法、逻辑回归、朴素贝叶斯、支持向量机、随机森林、梯度提升、神经网络、连续回归方法、岭回归、核岭回归、支持向量回归、或其任何组合。

9、本文中还提供了这样的方法,其中所述疾病或病症是非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,nash)的确定的纤维化阶段或确定的非酒精性脂肪性肝病活动性评分(nonalcoholic fatty liver disease activity score,nas)。本文中还提供了这样的方法,其中所述疾病或病症选自肝病、癌症、器官移植排斥、感染性疾病、变应性疾病、自身免疫病、阿尔茨海默病和慢性炎症。本文中还提供了这样的方法,其中所述肝病包含非酒精性脂肪性肝炎(nash)、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liverdisease,nafld)、毒素介导的肝损伤、病毒性肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫肝炎、肝硬化、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,hcc)、原发性胆汁性胆管炎(primarybiliary cholangitis,pbc)、胆管癌、原发性硬化性胆管炎、移植肝的急性或慢性排斥、遗传性肝病、或其组合。

10、本文中还提供了这样的方法,其中所述可切割接头通过共价键与所述报道物直接连接。本文中还提供了这样的方法,其中所述报道物包含荧光标记、质量标签、发色团、电化学活性分子、生物层干涉术或表面等离子体共振可检测分子、沉淀物质(precipitatingsubstance)、质谱和液相色谱基质、磁活性分子、凝胶形成和/或黏度变化分子、免疫测定可检测分子、基于细胞的扩增可检测或核酸条码、或其任何组合。

11、本文中还提供了这样的方法,其中所述报道物包含荧光标记。本文还提供了这样的方法,其中所述荧光标记选自5-羧基荧光素(5-fam)、7-氨基-4-氨基甲酰基甲基香豆素(acc)、7-氨基-4-甲基香豆素(amc)、2-氨基苯甲酰基(abz)、cy7、cy5、cy3和(5-((2-氨基乙基)氨基)萘-1-磺酸)(edans)。本文中还提供了这样的方法,其中所述分子还包含荧光猝灭剂。本文中还提供了这样的方法,其中所述荧光猝灭剂选自bhq0、bhq1、bhq2、bhq3、bbq650、atto 540q、atto 580q、atto 612q、cpq2、qsy-21、qsy-35、qsy-7、qsy-9、dabcyl(4-([4’-二甲基氨基)苯基]偶氮)苯甲酰基)、dnp(2,4-二硝基苯基)和eclipse。本文中还提供了这样的方法,其中所述荧光猝灭剂通过共价键与所述可切割接头直接连接。

12、本文中还提供了这样的方法,其中所述分子还包含载体。本文中还提供了这样的方法,其中所述载体包含天然的、标记的或合成的蛋白质、具有精确已知的化学组成或具有平均分子量附近的分布的合成化学聚合物、寡核苷酸、磷酸二酰胺吗啉代寡聚物(phosphorodiamidate morpholino oligomer,pmo)、折叠体、脂质、脂质胶束、纳米粒、由聚苯乙烯、聚丙烯或任何其他类型的塑料制成的固体支持物、或其任何组合。

13、本文中还提供了这样的方法,其中所述对象是哺乳动物。本文中还提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.方法,其包括:

2.权利要求1所述的方法,其中所述酶辅因子包含盐。

3.权利要求2所述的方法,其中所述盐包含锌盐。

4.权利要求3所述的方法,其中所述锌盐包含硫化锌(ZnS)、碳酸锌(ZnCO3)、铬酸锌(ZnCrO4)、氧化锌(ZnO)、氯化锌(ZnCl2)、硫酸锌(ZnSO4)、溴化锌(ZnBr2)、乙酸锌(Zn(CH3CO2)2)、硝酸锌(Zn(NO3)2)、或其任何组合。

5.权利要求4所述的方法,其中所述锌盐包含ZnCl2。

6.权利要求5所述的方法,其中所述ZnCl2的最终浓度为约0.01mM至约20mM。

7.权利要求5所述的方法,其中所述ZnCl2的最终浓度为约0.1mM至约10mM。

8.权利要求5所述的方法,其中所述ZnCl2的最终浓度为约0.2mM至约5mM。

9.权利要求5所述的方法,其中所述ZnCl2的最终浓度为约0.5mM至约2mM。

10.权利要求5所述的方法,其中所述ZnCl2的最终浓度为约1mM。

11.权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述体液样品选自血液、血浆、骨髓液、淋巴液、胆汁、羊水、黏膜液、唾液、尿、脑脊液、脊髓液、滑液、腹水、精液、导管抽吸物、粪便、大便、阴道流出物、泪液、组织裂解物和患者来源的细胞系上清液。

12.权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述体液样品包含冲洗液、调节介质或缓冲剂、拭子病毒转运介质、盐水、培养基、或细胞培养上清液。

13.权利要求12所述的方法,其中所述冲洗液选自漱口冲洗液,支气管肺泡冲洗液,灌洗液,洗发冲洗液,鼻喷流出物,施加至盐水或任何介质的任何身体表面、孔口、器官结构或实体瘤活检物拭子,或其任何衍生物。

14.权利要求11所述的方法,其中所述体液样品是血浆样品。

15.权利要求14所述的方法,其还包括将抗凝剂引入至所述血浆样品。

16.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含EDTA,柠檬酸盐,肝素,草酸盐,其任何盐、溶剂合物、对映体、互变异构体和几何异构体,或其任何混合物。

17.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含K2 EDTA。

18.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含K3 EDTA。

19.权利要求1至18中任一项所述的方法,其中所述物质是蛋白酶。

20.权利要求19所述的方法,其中所述蛋白酶包含基质金属蛋白酶(MMP)或半胱氨酸蛋白酶。

21.权利要求20所述的方法,其中所述MMP包含MMP2、MMP19、MMP21、MMP23A、MMP23B、MMP27、MPND、MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP、MT4-MMP、MT5-MMP、MT6-MMP、MYSM1、或其组合。

22.权利要求1至21中任一项所述的方法,其中所述可切割接头是肽。

23.权利要求22所述的方法,其中所述肽包含选自SEQ ID No:1至677的氨基酸序列。

24.权利要求1至23中任一项所述的方法,其还包括基于对来自所述合成分子的所述释放的报道物进行的所述检测来确定所述对象的疾病或病症。

25.权利要求24所述的方法,其中所述确定包括有监督机器学习分类算法、逻辑回归、朴素贝叶斯、支持向量机、随机森林、梯度提升、神经网络、连续回归方法、岭回归、核岭回归、或支持向量回归、或其任何组合。

26.权利要求24所述的方法,其中所述疾病或病症是非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的确定的纤维化阶段或确定的非酒精性脂肪性肝病活动性评分(NAS)。

27.权利要求24所述的方法,其中所述疾病或病症选自肝病、癌症、器官移植排斥、感染性疾病、变应性疾病、自身免疫病、阿尔茨海默病和慢性炎症。

28.权利要求27所述的方法,其中所述肝病包含非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、毒素介导的肝损伤、病毒性肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫肝炎、肝硬化、肝细胞癌(HCC)、原发性胆汁性胆管炎(PBC)、胆管癌、原发性硬化性胆管炎、移植肝的急性或慢性排斥、遗传性肝病、或其组合。

29.权利要求1至28中任一项所述的方法,其中所述可切割接头通过共价键与所述报道物直接连接。

30.权利要求1至29中任一项所述的方法,其中所述报道物包含荧光标记、质量标签、发色团、电化学活性分子、生物层干涉术或表面等离子体共振可检测分子、沉淀物质、质谱和液相色谱基质、磁活性分子、凝胶形成和/或黏度变化分子...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.方法,其包括:

2.权利要求1所述的方法,其中所述酶辅因子包含盐。

3.权利要求2所述的方法,其中所述盐包含锌盐。

4.权利要求3所述的方法,其中所述锌盐包含硫化锌(zns)、碳酸锌(znco3)、铬酸锌(zncro4)、氧化锌(zno)、氯化锌(zncl2)、硫酸锌(znso4)、溴化锌(znbr2)、乙酸锌(zn(ch3co2)2)、硝酸锌(zn(no3)2)、或其任何组合。

5.权利要求4所述的方法,其中所述锌盐包含zncl2。

6.权利要求5所述的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.01mm至约20mm。

7.权利要求5所述的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.1mm至约10mm。

8.权利要求5所述的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.2mm至约5mm。

9.权利要求5所述的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约0.5mm至约2mm。

10.权利要求5所述的方法,其中所述zncl2的最终浓度为约1mm。

11.权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述体液样品选自血液、血浆、骨髓液、淋巴液、胆汁、羊水、黏膜液、唾液、尿、脑脊液、脊髓液、滑液、腹水、精液、导管抽吸物、粪便、大便、阴道流出物、泪液、组织裂解物和患者来源的细胞系上清液。

12.权利要求1至10中任一项所述的方法,其中所述体液样品包含冲洗液、调节介质或缓冲剂、拭子病毒转运介质、盐水、培养基、或细胞培养上清液。

13.权利要求12所述的方法,其中所述冲洗液选自漱口冲洗液,支气管肺泡冲洗液,灌洗液,洗发冲洗液,鼻喷流出物,施加至盐水或任何介质的任何身体表面、孔口、器官结构或实体瘤活检物拭子,或其任何衍生物。

14.权利要求11所述的方法,其中所述体液样品是血浆样品。

15.权利要求14所述的方法,其还包括将抗凝剂引入至所述血浆样品。

16.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含edta,柠檬酸盐,肝素,草酸盐,其任何盐、溶剂合物、对映体、互变异构体和几何异构体,或其任何混合物。

17.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含k2 edta。

18.权利要求15所述的方法,其中所述抗凝剂包含k3 edta。

19.权利要求1至18中任一项所述的方法,其中所述物质是蛋白酶。

20.权利要求19所述的方法,其中所述蛋白酶包含基质金属蛋白酶(mmp)或半胱氨酸蛋白酶。

21.权利要求20所述的方法,其中所述mmp包含mmp2、mmp19、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp27、mpnd、mt1-mmp、mt2-mmp、mt3-mmp、mt4-mmp、mt5-mmp、mt6-mmp、mysm1、或其组合。

22.权利要求1至21中任一项所述的方法,其中所述可切割接头是肽。

23.权利要求22所述的方法,其中所述肽包含选自seq id no:1至677的氨基酸序列。

24.权利要求1至23中任一项所述的方法,其还包括基于对来自所述合成分子的所述释放的报道物进行的所述检测来确定所述对象的疾病或病症。

25.权利要求24所述的方法,其中所述确定包括有监督机器学习分类算法、逻辑回归、朴素贝叶斯、支持向量机、随机森林、梯度提升、神经网络、连续回归方法、岭回归、核岭回归、或支持向量回归、或其任何组合。

26.权利要求24所述的方法,其中所述疾病或病症是非酒精性脂肪性肝炎(nash)的确定的纤维化阶段或确定的非酒精性脂肪性肝病活动性评分(nas)。

27.权利要求24所述的方法,其中所述疾病或病症选自肝病、癌症、器官移植排斥、感染性疾病、变应性疾病、自身免疫病、阿尔茨海默病和慢性炎症。

28.权利要求27所述的方法,其中所述肝病包含非酒精性脂肪性肝炎(nash)、非酒精性脂肪性肝病(nafld)、毒素介导的肝损伤、病毒性肝炎、暴发性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫肝炎、肝硬化、肝细胞癌(hcc)、原发性胆汁性胆管炎(pbc)、胆管癌、原...

【专利技术属性】
技术研发人员:法伊察尔·图蒂梅哈尔·奇马索菲·卡扎纳夫文迪·温克勒·阿达莫维奇
申请(专利权)人:太阳鸟生物有限公司
类型:发明
国别省市:

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