【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药品质量控制，具体涉及一种还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法。
技术介绍
1、还原型谷胱甘肽(gsh)是体内最丰富、最主要的抗氧化剂。能激活多种酶[如巯基(-sh)酶等]，从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢，并能影响细胞的代谢过程；它可通过巯基与体内的自由基结合，可以转化成容易代谢的酸类物质从而加速自由基的排泄，有助于减轻化疗、放疗的毒副作用，对化疗、放疗的疗效无明显影响。在国内，gsh临床上广泛应用于肝脏疾病、放疗、化疗患者、有机磷中毒、药物中毒等。
2、还原型谷胱甘肽具有还原型，易被氧化，但国内外药典均仅对氧化型谷胱甘肽进行了研究，均未对巯基被氧化的杂质进行研究。本研究开发了一种检测还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，该方法简便易操作，对于提高还原型谷胱甘肽的质量控制具有现实意义。
技术实现思路
1、为解决以上的技术问题，本专利技术提供了一种还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法。
2、其技术方案如下：一种还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，其要点在于：包括以下步骤：
3、步骤一、供试品溶液制备：取还原型谷胱甘肽用溶剂溶解配制；
4、步骤二、对照溶液制备：取供试品溶液进行稀释，摇匀配制；
5、步骤三、hplc检测：将供试品溶液、对照溶液送入高效色谱仪中，进样检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相
6、步骤四、得到检测结果。
7、优选地：所述步骤一中供试品溶液制备方法是取还原型谷胱甘肽约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，用7％的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
8、优选地：所述步骤二中的对照溶液制备是精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀。
9、优选地：所述步骤三中流动相a缓冲盐溶液的制取过程为取磷酸二氢钾1.36g及含40％水溶液的四丁基氢氧化铵为0.65～12.98g，加水1000ml使溶解，加磷酸调节ph值至4.8～5.2之间，用0.45μm水系滤膜抽滤得到。
10、优选地：所述含40％水溶液的四丁基氢氧化铵的用量为6.49g，所述流动相a的ph值为5.0。
11、优选地：所述步骤三中的检测波长为210nm，检测样品进样体积为10μl，流动相a：流动相b的体积比＝(88～92)：(8～12)，流动相的流速为0.9～1.1ml/min，色谱柱的柱温：28～32℃。
12、优选地：所述流动相a：流动相b的体积比＝90:10。
13、优选地：所述流动相的流速为1ml/min。
14、优选地：所述色谱柱的柱温：30℃。
15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术的hplc检测方法能快速、有效的对还原型谷胱甘肽主成分及其他杂质与磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽进行分离，该方法操作简便，专属性、线性、精密度均良好，且溶液稳定，灵敏度高、准确度高、方法耐用性好，可以有效提高还原型谷胱甘肽质量标准体系。
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1.一种还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述步骤一中供试品溶液制备方法是取还原型谷胱甘肽约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，用7％的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
3.根据权利要求1或2所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述步骤二中的对照溶液制备是精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀。
4.根据权利要求1所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述步骤三中HPLC检测的流动相A缓冲盐溶液的制取过程为取磷酸二氢钾1.36g及含40％水溶液的四丁基氢氧化铵0.65～12.98g，加水1000ml使溶解，加磷酸调节pH值至4.8～5.2之间，用0.45μm水系滤膜抽滤得到。
5.根据权利要求4所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征
6.根据权利要求1所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述步骤三中的检测波长为210nm，检测样品进样体积为10μl，流动相A：流动相B的体积比＝(88～92)：(8～12)，流动相流速为0.9～1.1ml/min，色谱柱的柱温：28～32℃。
7.根据权利要求6所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述流动相A：流动相B的体积比＝90:10。
8.根据权利要求6所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述流动相的流速为1ml/min。
9.根据权利要求6所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的HPLC检测方法，其特征在于：所述色谱柱的柱温：30℃。
...【技术特征摘要】
1.一种还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，其特征在于：所述步骤一中供试品溶液制备方法是取还原型谷胱甘肽约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，用7％的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
3.根据权利要求1或2所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，其特征在于：所述步骤二中的对照溶液制备是精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀。
4.根据权利要求1所述还原型谷胱甘肽中磺酸谷胱甘肽和亚磺酸谷胱甘肽的hplc检测方法，其特征在于：所述步骤三中hplc检测的流动相a缓冲盐溶液的制取过程为取磷酸二氢钾1.36g及含40％水溶液的四丁基氢氧化铵0.65～12.98g，加水1000ml使溶解，加磷酸调节ph值至4.8～5.2之间，用0.45μm水系滤膜抽滤得到。
5.根据权利...
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