【技术实现步骤摘要】
本申请涉及用于免疫疗法的多特异性抗体的，更具体地涉及制备和使用针对免疫细胞和肿瘤细胞的表面分子具有多种结合活性的制导和导航控制(gnc)抗体。
技术介绍
1、癌症通过获得突变而发展，这些突变使癌细胞能够在逃避免疫监视和应答的同时转化、增殖和转移。用于治疗癌症的抗体疗法具有多种不同的机制。例如，靶向肿瘤细胞上过度表达的生长受体(egfr、her2等)的单克隆抗体可用于阻断肿瘤细胞增殖。使用抗体阻断抑制性t细胞检查点信号(抗pdl1、抗pd1、抗ctla4)是一种防止肿瘤细胞减弱免疫应答的策略，否则免疫应答将设法控制其生长。另一种治疗策略是抑制血管生成(例如，抗vegf)，其中氧气和营养物的减少会减缓肿瘤细胞的生长。单克隆抗体和抗体－药物缀合物(adc)最初可有效控制肿瘤。然而，对抗体疗法的癌症抗性经常通过逃避机制发生，如胞外结构域脱落、受体下调和受体突变(miller等人，clin cancer res.(临床癌症研究)2017；reslan等人，mabs.(单克隆抗体)2009；loganzo等人，mol cancer ther.(分子癌症治疗)2016)。例如，对抗her2 mab曲妥珠单抗的抗性可通过her2的胞外结构域脱落或通过her2上的曲妥珠单抗表位的封闭而发生(fiszman和jasnis，international journal of breast cancer(国际乳腺癌杂志)，2011)。
2、组合多种治疗机制(包括化学疗法、放射疗法和抗体疗法)的组合疗法已成为主流治疗策略。在本文中，多特异性抗体
技术实现思路
1、以下概述仅是说明性的，并不旨在以任何方式进行限制。除了上述说明性方面、实施例和特征之外，通过参考附图和以下详细描述，其他方面、实施例和特征将变得显而易见。
2、一方面，本申请提供了可同时结合效应细胞和靶细胞的制导和导航控制(gnc)蛋白。gnc蛋白可以是单体或单体的二聚体。gnc蛋白可以是抗体或抗体样蛋白。gnc蛋白可具有至少5个或至少6个结合结构域。
3、在一个实施方案中，本申请提供了具有n-末端和c-末端的多特异性抗体样蛋白，其从n-末端到c-末端依次包含n-末端的第一结合结构域(d1)、包含轻链部分的第二结合结构域(d2)、fc区、第三结合结构域(d3)和c-末端的第四结合结构域(d4)。轻链部分包括共价连接到c-末端的第五结合结构域(d5)、共价连接到n-末端的第六结合结构域(d6)、或两者。d1、d2、d3、d4、d5和d6各自针对肿瘤抗原、免疫信号抗原或其组合具有结合特异性。
4、肿瘤抗原可以是组织抗原、新抗原、肿瘤特异性抗原(tsa)、肿瘤相关抗原(taa)或其组合。
5、d2可以包括ch1。在一个实施方案中，d2中的轻链部分可以包括cl。在一个实施方案中，轻链部分可以包括cκ/cλ。
6、d2可以包括二聚体。
7、在一个实施方案中，d2可以包括fab区。在一个实施方案中，fab区可在vl和vh之间具有二硫键。在一个实施方案中，d2可以包括vl和vh。
8、在一个实施方案中，d2可以包括受体。在一个实施方案中，受体可以为nkg2d。在一个实施方案中，d2可以包括连接到ch1和cl的nkg2d。在一个实施方案中，d2可具有与seq idno.155-116具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。
9、d2可以通过铰链与fc区连接。
10、fc区可包括无效突变，其可具有减少或消除效应子功能的作用。在一个实施方案中，fc区可以是野生型fc。在一个实施方案中，fc区可包括无效fc的lalaka突变。在一个实施方案中，无效fc的lalaka突变可包括l234a/l235a/k322a(eu编号)突变。在一个实施方案中，fc区可包含g237a(eu编号)突变。在一个实施方案中，fc区可包含n297a(eu编号)突变。在一个实施方案中，fc区可以包括糖基化的fc。在一个实施方案中，fc区可以是非糖基化fc以降低效应子功能。
11、在一个实施方案中，本申请可提供具有n-末端和c-末端的多特异性抗体样蛋白，其从n-末端到c-末端的依次包含n-末端的第一结合结构域(d1)、包含连接到cl和ch1的二聚体的第二结合结构域(d2)、包含ch2和ch3的fc区(其中ch2通过铰链连接到ch1)、第三结合结构域(d3)和c-末端的第四结合结构域(d4)。轻链部分可具有共价连接到c-末端的第五结合结构域(d5)、共价连接到n-末端的第六结合结构域(d6)、或两者。d1、d2、d3、d4、d5和d6各自针对肿瘤抗原、免疫信号抗原或其组合可具有结合特异性。
12、d2中的二聚体可以包括分别与cl和ch连接的vl和vh对，在这种情况下，d2结构域可以是fab区，gnc蛋白可以是多特异性抗体单体或多特异性抗体。
13、在一个实施方案中，多特异性抗体样蛋白可以是五特异性或六特异性的。
14、在一个实施方案中，d2中的轻链部分可以具有共价连接到c-末端的第五结合结构域(d5)，并且多特异性抗体样蛋白是五特异性的。在一个实施方案中，轻链部分可以具有共价连接到n-末端的第六结合结构域(d6)，并且多特异性抗体样蛋白是五特异性的。在一个实施方案中，轻链部分可以具有共价连接到c-末端的第五结合结构域(d5)和同时共价连接到n-末端的第六结合结构域(d6)，这使得多特异性抗体样蛋白成为六特异性的。
15、d1、d2、d3、d4、d5和d6可以独立地为scfv结构域、受体或配体。
16、scfv结构域可以具有从n-末端到c-末端的vlvh或vhvl构型。在一个实施方案中，scfv结构域可包含r19s(kabat)突变。在一个实施方案中，scfv结构域可以包括vl和vh之间的二硫键。在一个实施方案中，二硫键可以在scfv结构域的vl100和vh44(kabat)之间。在一个实施方案中，scfv结构域可具有与seq id no.72-112具有至少50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列。
17、在一个实施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6均可以为scfv结构域。
18、在一个实施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6各自可以独立地为受体或配体。在一个实施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6中的至少一个、两个、三个、四个或五个可以为受体或配体。在一个实施方案中，d1、d2、d3、d4、d5和d6均可以为受体或配体。在一个实施方案中，d4、d5或d6可以为受体或配体。在一个实施方案中，受体或配体可具有与seq id n本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种具有N-末端和C-末端的多特异性抗体样蛋白，其从N-末端到C-末端依次包含N-末端的第一结合结构域(D1)、包含轻链部分的第二结合结构域(D2)、Fc区、第三结合结构域(D3)和C-末端的第四结合结构域(D4)，
2.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D2包括与CL和CH1连接的二聚体。
3.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D2包括Fab区。
4.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D2包括受体。
5.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D2包括NKG2D。
6.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述轻链部分包括与C-末端共价连接的第五结合结构域(D5)，并且其中所述多特异性抗体样蛋白是五特异性的。
7.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述轻链部分包括与N-末端共价连接的第六结合结构域(D6)，并且其中所述多特异性抗体样蛋白是五特异性的。
8.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述轻链部分包括与C-末端共
9.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D1、D2、D3、D4、D5和D6独立地为scFv结构域、受体或配体。
10.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述D2针对CD3或肿瘤相关抗原(TAA)具有结合特异性。
...【技术特征摘要】
1.一种具有n-末端和c-末端的多特异性抗体样蛋白，其从n-末端到c-末端依次包含n-末端的第一结合结构域(d1)、包含轻链部分的第二结合结构域(d2)、fc区、第三结合结构域(d3)和c-末端的第四结合结构域(d4)，
2.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述d2包括与cl和ch1连接的二聚体。
3.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述d2包括fab区。
4.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述d2包括受体。
5.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述d2包括nkg2d。
6.根据权利要求1所述的多特异性抗体样蛋白，其中所述轻链部分包括与c-末端共价连接的第五结合结构域(...
【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼斯·R·古利特，苏米里·查特吉，蔡宗義，布莱尔·伦肖，安德鲁·韦特，麦雅丝，朱义，
申请(专利权)人：西雅图免疫公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。