裙带菜与海带杂交育种方法技术

本发明专利技术是采用室内保存培养的裙带菜雌配子体和海带雌雄配子体互为父母本，采用配子体切碎的方法，按照裙带菜雌配子体×海带雄配子体、海带雌配子体×裙带菜雄配子体进行混合，用组织捣碎机切碎至２００μｍ的藻段后撒在维尼纶苗帘上，将苗帘置于适合于裙带菜、海带配子体发育成熟的温度下培养，７天～１０天后，裙带菜、海带雌配子体成熟形成卵囊并排出卵分别与海带、裙带菜雄配子体成熟后放出精子受精萌发形成杂交种幼苗，能够充分利用裙带菜、海带远缘杂交的杂种优势，所获得的杂交种具有裙带菜、海带的遗传性状，抗逆性强、生长速度快、质量好，可大幅度提高杂交裙带菜、海带的栽培产量和质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种科间杂交的育种方法，尤其是一种操作简单、成本低廉，能够充分利用裙带菜、海带远缘杂交的杂种优势，可大幅度提高杂交裙带菜、海带的栽培产量和质量 的。
技术介绍
裙带菜(Undaria pinnatifida)属于褐藻门、褐子纲、海带目、翅藻科、裙带菜属， 属于广温性藻类，其味道鲜美，营养丰富，含有包括全部人体必需氨基酸的19种氨基酸、蛋 白质、糖份和维生素，由于裙带菜的纤维素含量仅为干重的3%左右，因此易于被人体消化， 是深受消费者欢迎的健康食品。 海带(Laminaria japonica)在分类上属于褐藻门、褐子纲、海带目、海带科、海带 属，属于冷水性藻类。因海带中蛋白、糖类和维生素含量丰富，具有降血压、降血脂和抗氧化 的功能，特别是多糖含量较高，具有增强人体免疫力，预防和抑制癌症的作用，药用和保健 价值很高，是目前国内消费量最大的海藻。 目前，裙带菜苗种生产主要有室内全人工育苗和人工采孢子海区半人工育苗两种 方式，其中在全人工育苗生产中主要采用孢子采苗方式，同时也进行小规模的配子体采苗 室内育苗方式；海带是自然光低温全人工育苗，主要采用孢子采苗方式；两者的遗传育种 均采用的是种内杂交或控制倍性的方法进行种质改良，迄今为止还没有关于裙带菜与海带 科间杂交育种的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种操作简单、成本低廉，能够充分利用裙带菜、海带远缘杂 交的杂种优势，可大幅度提高杂交裙带菜、海带的栽培产量和质量的裙带菜与海带杂交育 种方法。 本专利技术的技术解决方案是一种，其特征在于按如下 步骤进行 a.在裙带菜的繁殖期内，取浮筏栽培成熟的种藻成熟的孢子叶，经阴干剌激后放 入添加消毒海水的烧杯内，当烧杯中的海水呈浅褐色时捞出孢子叶，用吸管取孢子水移到 添加培养液的培养皿内，将培养皿移到温度为2(TC、光照强度为2000Lx的条件下培养1个 月，培养液每10天全量交换1次； b.在海带繁殖期内，取浮筏栽培成熟种藻，用剪刀剪下生有孢子囊部分，采用与a 步骤相同方法将孢子采集在培养皿内，培养条件、时间同a步骤； c.在显微镜下辨别a步骤和b步骤所产出的雌配子体和雄配子体，将雌配子体或 雄配子体分别移到不同的培养皿内，进行裙带菜雌、雄配子体、海带雌、雄配子体分离培养， 培养3个月，将雌雄配子体藻团从培养皿底面剥下，移到烧瓶中，加入培养液进行保存培 养，培养液l个月全量交换l次；3 d.取保存培养的裙带菜雌配子、裙带菜雄配子体、海带雌配子体和海带雄配子体 各湿重5mg，按照裙带菜雌配子体X海带雄配子体、海带雌配子体X裙带菜雄配子体组合 将雌雄配子体混合，分别向混合体中添加300ml消毒海水后用组织搅拌机切碎至200 ii m的 藻段，撒在铺有缠绕直径3mm养殖用绳的苗帘上，待配子体在维尼纶绳上附着牢固后，裙带 菜雌配子体X海带雄配子体组合移到温度为15t:、光照强度为2000Lx、光照时间为12小 时/日条件下在培养液内培养至少7天，培养液每3天全量交换1次；海带雌配子体X裙 带菜组合移到温度为1(TC、光照强度为2000Lx、光照时间为12小时/日条件下在培养液内 培养至少10天，培养液每3天全量交换1次； 所述培养液为向1L加热至8(TC经过滤后的自然海水中添加化冊3 100mg、 NaH2P04 12H20 20mg及PI溶液1ml 。 本专利技术操作简单、成本低廉，可实现裙带菜与海带的正逆杂交(属于科间杂交，在 生物学上属于远缘杂交)，与现有的海带种间杂交等杂交育种技术相比，能够充分利用裙带 菜、海带远缘杂交的杂种优势，所获得的杂交种具有裙带菜、海带的遗传性状，抗逆性强、生 长速度快、质量好，不仅可以大幅度提高杂交裙带菜、杂交海带的栽培产量和质量，而且可 以通过定向选育和回交，培育出裙带菜、海带新品种。具体实施例方式a.在裙带菜的繁殖期内，取浮筏栽培成熟的种藻成熟的孢子叶，经阴干剌激后放 入添加消毒海水的烧杯内，当观察到有大量孢子放散孢子水呈浅褐色时捞出孢子叶，用吸 管取少量孢子水移到添加培养液的培养皿(直径9cm，下同)内，2小时后，可见培养皿底面 有圆形的胚孢子附着，将培养皿移到温度为20°C 、光照强度为2000Lx的条件下培养1个月， 培养液每10天全量交换1次。 b.在海带繁殖期内，取浮筏栽培成熟种藻，用剪刀剪下生有孢子囊部分，采用与a 步骤相同方法将孢子采集在培养皿内，培养条件、时间同a步骤。 培养2天后，附着在培养皿内的裙带菜、海带胚孢子萌发形成雌雄配子体，培养1 个月后，肉眼可见生长在培养皿内的雌雄配子体藻团。 c.在显微镜下辨别a步骤和b步骤所产出的雌配子体和雄配子体，将消毒镊子雌 配子体或雄配子体分别移到不同的培养皿内，进行裙带菜雌、雄配子、海带雌、雄配子体分 离培养，培养3个月后，雌雄配子体藻团达到0. 4 0. 6mm，将雌雄配子体藻团从培养皿底面 剥下，移到300ml烧瓶中，加入培养液进行保存培养，培养液1个月全量交换1次； d.取保存培养的裙带菜雌配子、裙带菜雄配子体、海带雌配子体和海带雄配子体 各湿重5mg，按照裙带菜雌配子体X海带雄配子体、海带雌配子体X裙带菜雄配子体组合 将雌雄配子体混合，分别向混合体中添加300ml消毒海水后用组织搅拌机切碎至200 ii m的 藻段，撒在铺有缠绕直径3mm维尼纶绳的苗帘上，待配子体在维尼纶绳上附着牢固后，裙带 菜雌配子体X海带雄配子体组合移到温度为15t:、光照强度为2000Lx、光照时间为12小 时/日条件下在培养液内培养至少7天，培养液每3天全量交换1次；海带雌配子体X裙 带菜组合移到温度为1(TC、光照强度为2000Lx、光照时间为12小时/日条件下在培养液内 培养至少10天，培养液每3天全量交换1次。 裙带菜雌配子体X海带雄配子体组合在培养7天后观察，可见裙带菜雌配子体开始发育成熟形成卵囊并排出卵；海带雄配子体也发育成熟形成精子囊并放出精子，卵受精 后萌发成裙带菜与海带杂交种幼苗。 同样，海带雌配子体X裙带菜组合在培养10天后开始发育成熟，海带雌配子体形 成卵囊并排出卵；裙带菜雄配子体形成精子囊并放出精子，卵受精后萌发成海带、裙带菜杂 交种幼苗。 a d步骤所述培养液与现有技术相同，即添加营养盐的消毒海水，参照参考文 献。 实验当裙带菜雌配子体X海带雄配子体、海带雌配子体X裙带菜两组合杂交种 幼苗生长至200 i！ m左右时，将生长杂交幼苗的苗帘移到海区浮筏上暂养；经过1个月的海 区暂养，两组合杂交幼苗长度达到0. 5cm，将生长幼苗的维尼纶绳剪成3cm小段，以35cm间 距夹在长8m、直径3cm的栽培苗绳上，再将栽培苗绳平挂在裙带菜栽培浮筏上栽培为杂交 种成体。结果所育杂交品种抗逆性强、生长速度快、质量好。 所述培养液为向1L加热至80°C经过滤后的自然海水中添加NaN03 1 00mg、 NaH2P04 12H20 20mg及PI溶液1ml 。 PI溶液公开于西澤一俊，千原光雄。藻类研究法東京共立出版株式会社， 1979 :281 293.权利要求一种，其特征在于按如下步骤进行a.在裙带菜的繁殖期内，取浮筏栽培成熟的种藻成熟的孢子叶，经阴干刺激后放入添加消毒海水的烧杯内，当烧杯中的海水呈浅本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种裙带菜与海带杂交育种方法，其特征在于按如下步骤进行：ａ．在裙带菜的繁殖期内，取浮筏栽培成熟的种藻成熟的孢子叶，经阴干刺激后放入添加消毒海水的烧杯内，当烧杯中的海水呈浅褐色时捞出孢子叶，用吸管取孢子水移到添加培养液的培养皿内，将培养皿移到温度为２０℃、光照强度为２０００Ｌｘ的条件下培养１个月，培养液每１０天全量交换１次；ｂ．在海带繁殖期内，取浮筏栽培成熟种藻，用剪刀剪下生有孢子囊部分，采用与ａ步骤相同方法将孢子采集在培养皿内，培养条件、时间同ａ步骤；ｃ．在显微镜下辨别ａ步骤和ｂ步骤所产出的雌配子体和雄配子体，将雌配子体或雄配子体分别移到不同的培养皿内，进行裙带菜雌、雄配子、海带雌、雄配子体分离培养，培养３个月，将雌雄配子体藻团从培养皿底面剥下，移到烧瓶中，加入培养液进行保存培养，培养液１个月全量交换１次；ｄ．取保存培养的裙带菜雌配子、裙带菜雄配子体、海带雌配子体和海带雄配子体各湿重５ｍｇ，按照裙带菜雌配子体×海带雄配子体、海带雌配子体×裙带菜雄配子体组合将雌雄配子体混合，分别向混合体中添加３００ｍｌ消毒海水后用组织搅拌机切碎至２００μｍ的藻段，撒在铺有缠绕直径３ｍｍ养殖用绳的苗帘上，待配子体在绳上附着牢固后，裙带菜雌配子体×海带雄配子体组合移到温度为１５℃、光照强度为２０００Ｌｘ、光照时间为１２小时／日条件下在培养液内培养至少７天，培养液每３天全量交换１次；海带雌配子体×裙带菜组合移到温度为１０℃、光照强度为２０００Ｌｘ、光照时间为１２小时／日条件下在培养液内培养至少１０天，培养液每３天全量交换１次；所述培养液为向１Ｌ加热至８０℃经过滤后的自然海水中添加ＮａＮＯ↓［３］１００ｍｇ、ＮａＨ↓［２］ＰＯ↓［４］.１２Ｈ↓［２］Ｏ２０ｍｇ及ＰＩ溶液１ｍｌ。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张泽宇，李晓丽，曹淑青，由学策，
申请(专利权)人：大连水产学院，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]