【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业种植，具体涉及一种黄牛肝菌yafmf012及其分离方法和根苗侵染方法。
技术介绍
1、云南松(pinus yunnanensis)属松科(pinaceae)松属的常绿针叶乔木，是西南地区荒山造林的先锋树种和重要的用材树种，具有较高的经济价值和生态效益。云南松以云贵高原为起源中心和分布中心,是云贵高原上成林面积最广的树种。然而，云南省内的云南松80%为纯林，生物多样性低，而且，近段时期以来，由于砍优留劣、毁林开荒、极端天气、生物入侵、火灾及病虫害的频繁干扰，使云南松种源质量下降,出现了云南松单株或成片死亡的现象，绝大部分云南松林区都出现不同程度的退化，扭曲林分、疏林、低产林日益增多，这使得人们对云南松林的经营前景产生疑虑和担忧。
2、松科树种具有公认发达的外生菌根(ectomycorrhizal fungi)系统，对外生菌根的依赖性极强，自然状态下如果没有菌根，松树会生长不良，甚至停止生长。云南松具有良好抗性的原因之一是其根系与土壤中真菌共生形成菌根，已有的研究发现云南松外生菌根种类多样，主要有红菇属(russula)、牛肝菌属(boletus)、乳菇属(lactarius)、乳牛肝菌属(suillus)等。
3、ecf对于维持生态系统稳定性与多样性、促进植物根际养分循环、恢复生态植被、改良土壤等具有重要生态作用。在林业生产中，菌根技术已广泛应用于引种、育苗、造林和防治苗木根部病害等方面，取得了良好的效果。黄牛肝菌(boletus speciosus）属于牛肝菌科(boletaceae)，
技术实现思路
1、针对现有技术不足，本专利技术提供一种黄牛肝菌yafmf012及其分离方法和根苗侵染方法，通过新保藏的黄牛肝菌yafmf012对云南松的进行根苗侵染，能够提高云南松幼苗成活率，促进云南松生长。
2、为实现以上目的，本专利技术的技术方案通过以下技术方案予以实现：
3、一种黄牛肝菌yafmf012，所述黄牛肝菌yafmf012属于黄牛肝菌 boletus speciosus，且黄牛肝菌yafmf012保藏名称为黄牛肝菌yafmf012 boletus speciosusyafmf012；保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏地址是：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为cctcc no：m 20232695，保藏日期为2023年12月27日。
4、优选的，所述黄牛肝菌yafmf012的its基因序列包括seq id no.1所示的核苷酸序列。
5、黄牛肝菌yafmf012的分离方法包括以下步骤：
6、s1-1、采集黄牛肝菌子实体样品制备组织破碎液；
7、s1-2、将上述组织破碎液稀释后涂布于pdmykas平板上培养15d；
8、s1-3、将上述平板上培养15d后得到的菌落进行鉴定，获得黄牛肝菌，再将黄牛肝菌的菌丝转接至pdmy固体培养基上继续培养20d，对菌株进行分子鉴定，得到黄牛肝菌yafmf012。
9、优选的，所述pdmykas平板的配方为：新鲜土豆汁500ml/l、酵母提取物1g/l、麦芽浸粉 2.1g/l、葡萄糖 5g/l、卡拉霉素100μg/ml、氨苄青霉素100μg/ml、链霉素100μg/ml、琼脂10g/l。
10、优选的，所述pdmy固体培养基的配方为：新鲜土豆汁500ml/l、酵母提取物1g/l、麦芽浸粉2.1g/l、葡萄糖5g/l、琼脂16g/l。
11、黄牛肝菌yafmf012对云南松进行根苗侵染，且具体方法包括以下步骤：
12、s2-1、菌种制备：将黄牛肝菌yafmf012菌丝体破碎后接种至pdmy液体培养基中，28℃，150rpm的恒温摇床中培养10d，得到液体黄牛肝菌；
13、s2-2、根苗培育：取萌发的云南松种子置于含有培养基的组培瓶中，并且每颗种子周围加入1ml液体黄牛肝菌，后封口于光照培养室进行培养；
14、s2-3、幼苗移栽：将经过高压灭菌的育苗基质装入备用的育苗盘，将上述步骤s2-2培养得到的侵染根苗移栽入育苗盘中进行种植。
15、优选的，所述步骤s2-1中pdmy液体培养基的配方为新鲜土豆汁500ml/l、酵母提取物1g/l、麦芽浸粉2.1g/l、葡萄糖5g/l，其余为水。
16、优选的，所述步骤s2-2中萌发的云南松种子幼根长度为5-10mm。
17、优选的，所述步骤s2-2中每个组培瓶中的培养基组成为大米10.5g，生土9g，草炭1.5g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.3g，硫酸钙0.3g，葡萄糖0.6g，自来水55ml
18、本专利技术提供一种黄牛肝菌yafmf012及其分离方法和根苗侵染方法，与现有技术相比优点在于：
19、专利技术提供一种新保藏的黄牛肝菌yafmf012，并且采用该菌种对云南松根苗进行侵染，充分综合了无菌条件下的菌种制备和根苗培育技术，结合成功的接种和无菌基质的移栽操作，显著提高了黄牛肝菌的单一侵染率，这一方法促进了云南松幼苗与黄牛肝菌之间的侵染成功，促进云南松生长，且通过云南松幼苗与黄牛肝菌形成侵染后的根苗后，显著提高了云南松幼苗的生长指标，这为培育出优良的云南松苗木创造了有利的条件；这一综合的侵染方法为云南松和黄牛肝菌共生系统的建立提供了创新和可行的途径，为推动相关产业的发展和提高经济效益提供了有力的技术支持。
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1.一种黄牛肝菌YAFMF012，其特征在于，所述黄牛肝菌YAFMF012属于黄牛肝菌Boletus speciosus，且黄牛肝菌YAFMF012保藏名称为黄牛肝菌YAFMF012 Boletus speciosusYAFMF012；保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏地址是武汉大学；保藏编号为CCTCC NO：M20232695。
2.根据权利要求1所述的一种黄牛肝菌YAFMF012，其特征在于：所述黄牛肝菌YAFMF012的ITS基因序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
3.黄牛肝菌YAFMF012的分离方法，其特征在于：所述分离方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的黄牛肝菌YAFMF012的分离方法，且特征在于，所述PDMY固体培养基的配方为：新鲜土豆汁500ml/L、酵母提取物1g/L、麦芽浸粉2.1g/L、葡萄糖5g/L、琼脂16g/L。
5.一种如权利要求1所述的黄牛肝菌YAFMF012的根苗侵染方法，其特征在于，所述黄牛肝菌YAFMF012对云南松进行根苗侵染，且具体方法包括以下步骤：
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7.根据权利要求5所述的根苗侵染方法，其特征在于：所述步骤S2-2中萌发的云南松种子幼根长度为5-10mm。
8.根据权利要求5所述的根苗侵染方法，其特征在于：所述步骤S2-2中每个组培瓶中的培养基组成为大米10.5g，生土9g，草炭1.5g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.3g，硫酸钙0.3g，葡萄糖0.6g，自来水55mL。
...【技术特征摘要】
1.一种黄牛肝菌yafmf012，其特征在于，所述黄牛肝菌yafmf012属于黄牛肝菌boletus speciosus，且黄牛肝菌yafmf012保藏名称为黄牛肝菌yafmf012 boletus speciosusyafmf012；保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏地址是武汉大学；保藏编号为cctcc no：m20232695。
2.根据权利要求1所述的一种黄牛肝菌yafmf012，其特征在于：所述黄牛肝菌yafmf012的its基因序列包括seq id no.1所示的核苷酸序列。
3.黄牛肝菌yafmf012的分离方法，其特征在于：所述分离方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的黄牛肝菌yafmf012的分离方法，且特征在于，所述pdmy固体培养基的配方为：新鲜土豆汁500ml/l、酵母提取物1g/l、麦芽浸粉2...
【专利技术属性】
技术研发人员：王毅，
申请(专利权)人：云南省林业和草原科学院，
类型：发明
国别省市：
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