【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及发酵纯化，具体涉及一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法及应用。
技术介绍
1、细胞氧化损伤、氧化应激、内质网应激等都是引起皮肤衰老的因素，虽然不能完全阻止细胞的衰老，但是却可以通过抑制细胞氧化损伤、氧化应激、内质网应激等方面改善或延缓衰老，也可以通过激活细胞自噬抵抗衰老。天然活性成分是抵御衰老的重要宝库，是我们开发药品、功能食品、功能化妆品的重要且安全的来源。而研究人员也一直在天然活性成分中寻找具有能抵抗衰老的成分。
2、淫羊藿，又名三枝九叶草，在我国应用历史悠久，其主要活性成分是黄酮类化合物，天然的淫羊藿黄酮主要有朝藿定a、朝藿定b、朝藿定c、淫羊藿苷、宝藿苷i等活性物质。2022年王瑜婷等人发表文章《淫羊藿总黄酮提取工艺优化与抗氧化活性研究》公开了淫羊藿总黄酮表现出较强的dpph、abts自由基清除活性，具有良好的体外抗氧化活性。但淫羊藿总黄酮中活性成分种类繁多，如淫羊藿素等起到抗氧化活性的物质含量较少，申请号为cn2007100990251，专利名称为淫羊藿素的制备方法的专利文件公开了一种利用淫羊藿苷和β-葡萄糖苷酶为原料，酶解制备淫羊藿素的方法，还包括淫羊藿总黄酮的提取和淫羊藿苷的纯化。但直接用淫羊藿苷和β-葡萄糖苷酶为原料，成本较高，而从淫羊藿总黄酮开始提取、淫羊藿苷纯化后得到的淫羊藿苷作为原料操作步骤繁琐，不利于扩大生产，并且上述技术方案中仅将淫羊藿苷转化为淫羊藿素，转化单一，对淫羊藿总黄酮的利用率低。
3、因此，需要提供一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法及应用，以解决淫羊藿总黄酮
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法及应用，实现淫羊藿总黄酮转化为抗氧化活性物质时的高利用率，便于扩大生产的目的。
2、为实现上述目的，本专利技术提供一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，包括以下步骤：s1.菌株发酵：将米曲霉 aspergillus oryzae接入含有麦麸提取物和诱导物的无菌培养基中，搅拌培养；s2.糖苷酶提取：发酵结束后，离心除去菌体，得发酵上清液，在所述发酵上清液中加入硫酸铵，离心获得糖苷酶沉淀；s3.转化：将所述糖苷酶沉淀溶解于去离子水中，加热，边搅拌边缓慢加入淫羊藿总黄酮，进行转化反应；s4.酶解产物分离：反应结束后，分离得沉淀，然后溶解沉淀，离心得上清液，再浓缩干燥即得酶解产物。
3、本申请提供的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，使用米曲霉为发酵菌株，通过麦麸提取物和诱导物的共同作用使米曲霉发酵时产生糖苷酶，米曲霉发酵工艺简单、便于培养、发酵产生的糖苷酶含量高，转化淫羊藿总黄酮得到的组合物抗氧化效果好，并且便于扩大生产，获得糖苷酶的成本降低。
4、本申请中通过硫酸铵提取的糖苷酶，直接与淫羊藿总黄酮进行转化反应得到酶解产物，对淫羊藿总黄酮中淫羊藿苷纯度要求低，节省将淫羊藿总黄酮中淫羊藿苷纯化的步骤，并且对淫羊藿总黄酮中与淫羊藿苷结构相似的活性物质皆有转化为酶解产物的效果，从而增加淫羊藿总黄酮的转化利用率。
5、可选的，所述诱导物含有西洋参总皂苷时，获得含有宝霍苷i的酶解产物。
6、本申请中采用的诱导物含有西洋参总皂苷时，得到的酶解产物中主要成分为宝霍苷i，经过实验验证，酶解产物可以显著减少uvb照射引起的ros的积累；改善uvb损伤后细胞线粒体膜电位下降的情况；显著降低uvb损伤后细胞中线粒体超氧化物含量，改善uvb诱导后出现的氧化损伤；显著提高beclin-1表达水平，激活beclin-1自噬，从而起到保护细胞的作用；显著降低grp78表达量，对uvb损伤后引起的内质网应激进行调控，从而起到保护细胞的作用。
7、可选的，所述诱导物的含量范围为0.3~0.7%。
8、可选的，所述诱导物含有芦丁、人参皂苷rb1和人参皂苷re时，获得含有淫羊藿素的酶解产物。
9、本申请采用的诱导物中含有芦丁、人参皂苷rb1和人参皂苷re时，得到的酶解产物中主要成分为淫羊藿素，经过实验验证，酶解产物可以减少户外紫外线（uvb）照射造成的细胞中ros的积累；改善uvb损伤后细胞线粒体膜电位下降的情况；降低uvb损伤后细胞中线粒体超氧化物含量，改善uvb诱导后出现的氧化损伤；提高beclin-1和lc3b表达水平，激活beclin-1和lc3b自噬，从而起到保护细胞的作用；可显著降低内质网应激相关基因的表达量，对uvb损伤后引起的内质网应激进行调控，从而起到保护细胞的作用；增加ho-1的蛋白表达，从而改善氧化应激造成的细胞凋亡。
10、可选的，所述芦丁、人参皂苷rb1、人参皂苷re按照1：（0.1-10）：（0.1-10）的比例混合。
11、可选的，所述麦麸提取物的含量范围为2~4%，所述硫酸铵的饱和度为40~80%。
12、可选的，所述淫羊藿总黄酮的添加量为10~15%。
13、可选的，所述麦麸提取物的制备方法为：麦麸与水的质量比为1:8~15，浸泡20~30min，加热至沸腾，保持温度为80~120℃，维持30~40min；过滤后得滤液，浓缩干燥得所述麦麸提取物。
14、可选的，包括以下步骤：s1.菌株发酵：将米曲霉 aspergillus oryzae接入含有3%麦麸提取物和0.5%诱导物的无菌培养基中，在28-30℃搅拌培养5-10d；s2.糖苷酶提取：发酵结束后，离心除去菌体，得发酵上清液，在所述发酵上清液中加入70%饱和度的硫酸铵，离心获得糖苷酶沉淀；s3.转化：将所述糖苷酶溶解于20-50倍去离子水中，加热至45-50℃，边搅拌边缓慢加入15%重量的淫羊藿总黄酮，保持转化反应24-48h；s4.酶解产物分离：反应结束后，分离得到沉淀，加入95%乙醇进行充分溶解，乙醇与沉淀的重量比为1：20~30，离心得酶解产物上清液，再浓缩干燥即得酶解产物。
15、为实现上述目的，本申请还提供一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法得到的酶解产物应用于化妆品。
16、本申请中淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法得到的酶解产物可显著改善户外紫外线照射细胞形成的氧化损伤，改善内质网应激以及氧化应激，从而起到保护细胞的作用，提高抗氧化、抗衰老的效果，在化妆品领域具有广泛的应用市场。
17、本专利技术的上述技术方案至少包括以下有益效果：
18、本申请提供的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，通过麦麸提取物和诱导物的共同作用，米曲霉菌株发酵产生的糖苷酶，对淫羊藿总黄酮进行转化，诱导物和麦麸提取物的共同作用使产生的糖苷酶含量高，转化效果好，并且便于扩大生产。
19、通过米曲霉菌株发酵产生的糖苷酶对淫羊藿总黄酮进行转化，成本低，对淫羊藿总黄酮中淫羊藿苷纯度要求低，省去淫羊藿苷纯化步骤，并且对与淫羊藿总黄酮中与淫羊藿苷结构相似的活性本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物含有西洋参总皂苷时，获得含有宝霍苷I的酶解产物。
3.根据权利要求2所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物的含量范围为0.3~0.7%。
4.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物含有芦丁、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re时，获得含有淫羊藿素的酶解产物。
5.根据权利要求4所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述芦丁、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re按照1：（0.1-10）：（0.1-10）的比例混合。
6.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述麦麸提取物的含量范围为2~4%，所述硫酸铵的饱和度为40~80%。
7.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述淫羊藿总黄酮的添加量为10~15%。
8.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产
9.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
10.一种如权利要求1-9任一项所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法得到的酶解产物应用于化妆品。
...【技术特征摘要】
1.一种淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物含有西洋参总皂苷时，获得含有宝霍苷i的酶解产物。
3.根据权利要求2所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物的含量范围为0.3~0.7%。
4.根据权利要求1所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述诱导物含有芦丁、人参皂苷rb1和人参皂苷re时，获得含有淫羊藿素的酶解产物。
5.根据权利要求4所述的淫羊藿总黄酮酶解产物的制备方法，其特征在于，所述芦丁、人参皂苷rb1、人参皂苷re按照1：（0.1-10）：（0.1-10）的比例混合。
6.根据权利要求1所述的淫...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖永坤，王东明，李伊璇，李梦珊，
申请(专利权)人：三蚁科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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