【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程，尤其涉及转录因子klf4和rxrα在鉴定/提高蛹虫草虫草素产量中的应用。
技术介绍
1、蛹虫草cordyceps militaris又名北冬虫夏草、北虫草，是虫草科cordycipitaceae虫草属cordyceps的模式种。蛹虫草是食药两用真菌，其蛋白质含量高达40.7％，其中所含人体必需的氨基酸不仅种类齐全，数量充足，而且比例适当。蛹虫草中含有多种生物活性物质，包括虫草素、腺苷、虫草多糖、各种氨基酸、麦角甾和多球壳菌素等，具有扩展气管、镇静、抗菌、降血压等作用。其中，虫草素是蛹虫草最重要的生物活性成分之一，是衡量蛹虫草质量好坏的标准。
2、虫草素(cordycepin)是最早从蛹虫草中分离提取的一种腺苷类似物，化学名为3'-脱氧腺苷。近年来，研究者通过化学合成、优化液体发酵、子实体提取和诱变育种等各种方法来提高虫草素产量，也有研究者通过研究虫草素的生物合成途径进一步提高产量。虫草素通过核苷酸激酶催化腺苷磷酸化形成3'-amp，再由磷酸水解酶催化3'-amp去磷酸化生成2'-c-3'-da，最后通过氧化还原酶催化还原反应产生虫草素，从腺嘌呤开始合成虫草素，有关途径涉及到31个基因、21个酶、25个生物化学反应。但目前，尚未有研究报道如何从转录因子角度实现精准调控虫草素表达水平。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供转录因子klf4和rxrα在提高蛹虫草虫草素产量中的应用，通过转录因子klf4和rxrα过表达提高蛹虫草虫草素产量
2、本专利技术的目的还在于提供转录因子klf4和rxrα在鉴定高产虫草素的蛹虫草菌株中的应用，通过鉴定转录因子klf4和rxrα的基因相对表达量鉴别得到高产虫草素的蛹虫草菌株。
3、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
4、本专利技术提供了转录因子klf4和rxrα在提高蛹虫草虫草素产量中的应用。
5、优选的，所述转录因子klf4的氨基酸序列如seq id no:1所示。
6、优选的，所述转录因子klf4的核苷酸序列如seq id no:2所示。
7、优选的，所述转录因子rxrα的氨基酸序列如seq id no:3所示。
8、优选的，所述转录因子rxrα的核苷酸序列如seq id no:4所示。
9、优选的，转录因子klf4和rxrα上调嘌呤核苷酸代谢中的氧化还原酶、3'，5'-环amp磷酸二酯酶、转移酶和腺苷酸环化酶表达量。
10、优选的，转录因子klf4和rxrα过表达促进虫草素生物合成和代谢途径中3'-amp的产生。
11、优选的，转录因子klf4和rxrα同时过表达提高蛹虫草虫草素产量。
12、本专利技术还提供了转录因子klf4和rxrα在鉴定高产虫草素的蛹虫草菌株中的应用。
13、本专利技术还提供了一种鉴定高产虫草素的蛹虫草菌株的方法，包括以下步骤：检测转录因子klf4和rxrα的基因相对转录量，两基因相对转录量log2(fold change)≥1.0，即为高产虫草素的蛹虫草菌株。
14、相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
15、本专利技术首次提出了转录因子klf4和rxrα可以上调虫草素生物合成的有关基因，即上调嘌呤核苷酸代谢中的氧化还原酶、3'，5'-环amp磷酸二酯酶、转移酶和腺苷酸环化酶。转录因子klf4和rxrα过表达，可以促进虫草素生物合成和代谢途径中3'-amp的产生，提高蛹虫草虫草素产量。通过检测蛹虫草转录因子klf4和rxrα的表达量，可以有效鉴定高产虫草素的蛹虫草菌株。
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1.转录因子Klf4和Rxrα在提高蛹虫草虫草素产量中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子Klf4的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子Klf4的核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子Rxrα的氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子Rxrα的核苷酸序列如SEQ IDNO:4所示。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，转录因子Klf4和Rxrα上调嘌呤核苷酸代谢中的氧化还原酶、3'，5'-环AMP磷酸二酯酶、转移酶和腺苷酸环化酶。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，转录因子Klf4和Rxrα过表达促进虫草素生物合成和代谢途径中3'-AMP的产生。
8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，转录因子Klf4和Rxrα同时过表达提高蛹虫草虫草素产量。
9.转录因子Klf4和Rxrα在
10.一种鉴定高产虫草素的蛹虫草菌株的方法，其特征在于，包括以下步骤：检测转录因子Klf4和Rxrα的基因相对转录量，两基因相对转录量log2(Fold Change)≥1.0，即为高产虫草素的蛹虫草菌株。
...【技术特征摘要】
1.转录因子klf4和rxrα在提高蛹虫草虫草素产量中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子klf4的氨基酸序列如seq idno:1所示。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子klf4的核苷酸序列如seq idno:2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子rxrα的氨基酸序列如seq idno:3所示。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述转录因子rxrα的核苷酸序列如seq idno:4所示。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，转录因子klf4和rxrα上调嘌呤核苷酸代谢...
【专利技术属性】
技术研发人员：张虎成，杨国伟，杨军，范海涛，杨冬清，罗帅，刘霖颖，高博，
申请(专利权)人：北京电子科技职业学院，
类型：发明
国别省市：
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