【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于丝膜菌培养基，具体为一种培养中华丝膜菌的培养基及其制备方法和应用。
技术介绍
1、中华丝膜菌(cortinarius sinensis)最初在2020年被报道生长于中国西北地区，主要在宁夏和内蒙古的贺兰山区被大量采食，在四川部分地区也有少量分布，具有较高的食用价值和经济价值。大型真菌在实验室中通常采用马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基，在25℃条件下进行培养。但中华丝膜菌无法在该条件下培养，更遑论大量人工驯化栽培。因此，如何改变培养条件使中华丝膜菌在培养基上生长是我们面临的首要问题。
2、中华丝膜菌的采集地海拔较高，从2000m-4000m不等；采集的时间集中在每年的8月-9月。以上生长条件导致中华丝膜菌生长所需的温度可能较低；其通常生活在针叶林地面上，所需的营养与普通大型真菌也不尽相同。目前而言，有关中华丝膜菌的有效培养方法鲜有发表。
技术实现思路
1、鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种培养中华丝膜菌的培养基及其制备方法和应用，该培养基能够促进中华丝膜菌生长。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种培养中华丝膜菌的培养基，包括以下重量份组分：马铃薯180～220g、葡萄糖8～15g、琼脂15～25g、麦芽浸粉5～10g、蚯蚓酶0.003～0.008g、磷酸二氢钾0.3～0.8g、硫酸镁0.3～0.8g、牛肉浸膏1～2g、青海云杉松针浸提液150～250ml、蒸馏水600～1000ml
4、优选地，所述青海云杉松针浸提液的制备方法包括如下步骤：青海云杉针叶洗净，于60～70℃烘干并研磨；将研磨后的松针与水以1：8～15重量比放入水浴锅，85～95℃浸提0.5～3h，提取2～3次，将提取液合并、过滤，即可。
5、优选地，所述培养基的ph为6.5～7。
6、本专利技术还提供了一种所述培养基的制备方法，包括如下步骤：
7、马铃薯削皮、切块，水开后煮20～30min，用纱布过滤，加入葡萄糖、琼脂、麦芽浸粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和牛肉浸膏，加热搅拌均匀，稍冷后加入青海云杉松针浸提液，最后加入蒸馏水定容，分装至锥形瓶中，加塞、包扎、高压灭菌获得灭菌后培养基；
8、蚯蚓酶加无菌水得蚯蚓酶稀释液，将蚯蚓酶稀释液过滤至无菌后加入晾凉的灭菌后培养基，摇晃均匀倒至培养皿中即可。
9、优选地，所述灭菌后培养基晾凉至35～45℃。
10、优选地，所述高压灭菌条件为101kpa、120～121℃灭菌15～25min。
11、优选地，所述马铃薯切至0.5～2cm3的小块。
12、本专利技术还提供了一种中华丝膜菌的培养方法，包括如下步骤：将中华丝膜菌子实体接种于所述培养基或所述制备方法制备得到的培养基中培养20～35天至长出菌落；从上述菌落中挑取菌丝块转接于上述培养基中培养45～60天即可。
13、优选地，所述培养温度为15～25℃。
14、优选地，所述菌丝块面积为3mm2～15mm2。
15、本专利技术与现有技术相比，具有以下有益效果：
16、本专利技术根据中华丝膜菌常生长于针叶林地面上、生长环境偏酸性的特点，在常用的马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基中加入一定量的麦芽浸粉、蚯蚓酶、磷酸二氢钾(kh2po4)和硫酸镁(mgso4)以及青海云杉松针浸提液配成pda+培养基，该培养基的ph呈弱酸性，同时还可以为菌丝生长提供一定量的矿物元素，促进中华丝膜菌生长。本专利技术在冷却好的培养基上接种灭菌中华丝膜菌子实体，15～20℃培养，10～20d后有菌丝生长；至菌丝生长为直径1cm左右菌落时，再挑取中华丝膜菌菌丝块于培养基中，45d～60d后生长成直径为4～6cm的圆形菌落，颜色由内向外呈环状逐渐变浅，中心为白色，靠近中心内圈为紫褐色，最外圈为白色。本专利技术的培养基以及培养方法能有效解决中华丝膜菌无法在实验室条件下生长的难题。
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1.一种培养中华丝膜菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份组分：马铃薯180～220g、葡萄糖8～15g、琼脂15～25g、麦芽浸粉5～10g、蚯蚓酶0.003～0.008g、磷酸二氢钾0.3～0.8g、硫酸镁0.3～0.8g、牛肉浸膏1～2g、青海云杉松针浸提液150～250mL、蒸馏水600～1000mL。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述青海云杉松针浸提液的制备方法包括如下步骤：青海云杉针叶洗净，于60～70℃烘干并研磨；将研磨后的松针与水以1：8～15重量比放入水浴锅，85～95℃浸提0.5～3h，提取2～3次，将提取液合并、过滤，即可。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于，所述培养基的pH为6.5～7。
4.权利要求1～3任意一项所述培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述灭菌后培养基晾凉至35～45℃。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述高压灭菌条件为101kPa、120～121℃灭菌15～25min。
...【技术特征摘要】
1.一种培养中华丝膜菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份组分：马铃薯180～220g、葡萄糖8～15g、琼脂15～25g、麦芽浸粉5～10g、蚯蚓酶0.003～0.008g、磷酸二氢钾0.3～0.8g、硫酸镁0.3～0.8g、牛肉浸膏1～2g、青海云杉松针浸提液150～250ml、蒸馏水600～1000ml。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述青海云杉松针浸提液的制备方法包括如下步骤：青海云杉针叶洗净，于60～70℃烘干并研磨；将研磨后的松针与水以1：8～15重量比放入水浴锅，85～95℃浸提0.5～3h，提取2～3次，将提取液合并、过滤，即可。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于，所述培养基的ph为6.5～7。
4.权利要求1～3任意一项所述培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
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