【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及mir1867在水稻种质资源改良中的应用，属于植物基因工程。
技术介绍
1、稻(oryza sativa l.)，通常称为水稻，主要是禾本科一年生、水生草本(目前已有多年生稻品种)，其作为世界上最重要的粮食作物之一，为满足人类对粮食的巨大需求做出了重大贡献。水稻的产量是一个复杂的农艺性状，受分蘖数、穗数、每穗粒数、结实率和千粒重等因素的影响，其中，粒型是决定千粒重的重要指标之一。粒型包括粒长、粒宽、粒厚和长宽比，是由多基因控制的数量遗传性状。水稻粒型不仅关系到产量的高低，对稻米品质的优劣也至关重要。因此通过生物技术手段改善水稻籽粒的粒型，进而提高水稻籽粒大小，对于提高水稻产量具有重要意义。
2、目前已克隆出多个调控粒型的关键基因，这些基因主要参与植物激素合成和信号、泛素-蛋白酶体、丝裂原活化蛋白激酶(mapk)信号、g蛋白信号及表观修饰等多个调控通路。但是，长期以来，水稻产量的提高一直没有出现巨大的突破，主要原因是现代栽培稻品种选育所用的种质资源遗传基础狭窄，优异种质资源利用的同质化较为严重。
3、microrna(mirna)是一类广泛的内源性小rna分子，在调节真核生物的生长发育和信号转导途径中处于核心地位。以小rna为基础的生物技术正成为作物改良的新目标和新策略，mirna逐渐成为培育优良籽粒大小和作物产量的新靶标。近年来，随着研究手段的深入和实验技术的发展，单一mirna调节水稻籽粒千粒重的研究陆续被报道。在水稻中过量表达mir156靶基因osspl16可以通过促进水稻籽粒细胞分裂的
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供mir1867在水稻种质资源改良中的应用，为现有技术中水稻产量的提高提供一种新的可利用基因资源。
2、为了实现上述目的，本专利技术mir1867在水稻种质资源改良中的应用所采用的技术方案是：
3、mir1867在水稻种质资源改良中的应用，所述mir1867的核苷酸序列如seq idno.1所示；所述水稻种质资源改良为增加水稻的产量。
4、上述技术方案的有益效果在于：本专利技术的mir1867在水稻种质资源改良中的应用为开拓性专利技术。本专利技术提供了一种可用于调控水稻籽粒粒型和千粒重的mirna，通过构建组成型启动子ubi驱动的mir1867过表达载体，并利用农杆菌侵染水稻胚性愈伤组织，共培养、筛选、分化得到转基因阳性植株(即过表达mir1867的水稻植株)，对转基因阳性植株收获时期籽粒产量相关的表型进行鉴定，验证mir1867与水稻籽粒大小的关系。发现过表达mir1867的转基因株系籽粒粒长、粒宽和千粒重显著增加，表明mir1867在调控水稻籽粒大小和千粒重以及增加作物产量上具有潜在的工业应用价值，能产生更高的经济效益，同时为水稻种质资源改良提供新的基因资源。
5、作为进一步地改进，所述增加水稻的产量为增加水稻籽粒的粒长、粒宽和/或千粒重。
6、上述技术方案的有益效果在于：水稻籽粒的千粒重受库容大小及籽粒充实程度的影响。水稻籽粒由胚、胚乳、种皮和颖壳组成，颖壳作为库容对水稻籽粒大小(粒长、粒宽、粒厚)发挥一定限制作用。本专利技术通过增加水稻籽粒的粒长和粒宽，提高籽粒的库容进而增加水稻的千粒重，对于提高水稻的产量有重要意义。
7、作为进一步地改进，通过基因工程手段过表达mir1867，水稻籽粒的粒长、粒宽和千粒重显著增加。
8、作为进一步地改进，所述过表达为构建mir1867的过表达载体，对水稻中mir1867进行过表达。
9、作为进一步地改进，所述过表达载体由包括以下步骤的方法获得：将表达mir1867的基因片段插入出发载体中，转化、培养、验证获得过表达载体。
10、作为进一步地改进，所述出发载体为ptck303。
11、作为进一步地改进，所述基因片段采用核苷酸序列如seq id no.2及seq id no.3所示的引物扩增获得。
12、作为进一步地改进，所述水稻为日本晴。
13、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
14、本专利技术提供了一种可用于调控水稻籽粒粒型的和千粒重的mirna—mir1867。本专利技术通过构建组成型启动子ubi驱动的mir1867过表达载体，并利用农杆菌侵染水稻胚性愈伤组织，共培养、筛选、分化得到转基因阳性植株，对转基因阳性植株收获时期籽粒产量相关的表型进行鉴定，验证mir1867与水稻籽粒大小的关系，其中过表达mir1867的转基因株系籽粒粒长、粒宽和千粒重显著增加，表明mir1867在调控水稻籽粒大小和千粒重以及增加作物产量上具有潜在的工业应本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述miR1867的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述水稻种质资源改良为增加水稻的产量。
2.根据权利要求1所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述增加水稻的产量为增加水稻籽粒的粒长、粒宽和/或千粒重。
3.根据权利要求1或2所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：通过基因工程手段过表达miR1867，水稻籽粒的粒长、粒宽和千粒重显著增加。
4.根据权利要求3所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述过表达为构建miR1867的过表达载体，对水稻中miR1867进行过表达。
5.根据权利要求4所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述过表达载体由包括以下步骤的方法获得：将表达miR1867的基因片段插入出发载体中，转化、培养、验证获得过表达载体。
6.根据权利要求5所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述出发载体为pTCK303。
8.根据权利要求1所述的miR1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述水稻为日本晴。
...【技术特征摘要】
1.mir1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述mir1867的核苷酸序列如seq id no.1所示；所述水稻种质资源改良为增加水稻的产量。
2.根据权利要求1所述的mir1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述增加水稻的产量为增加水稻籽粒的粒长、粒宽和/或千粒重。
3.根据权利要求1或2所述的mir1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：通过基因工程手段过表达mir1867，水稻籽粒的粒长、粒宽和千粒重显著增加。
4.根据权利要求3所述的mir1867在水稻种质资源改良中的应用，其特征在于：所述过表达为构建mir1867的过表达载体，对水稻中mir1867进行...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭廷，赵亚帆，彭玉，李源，杨培果，李佳露，张静，计长莉，金玉蔓，张荔锋，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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