【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及fpv-vp2蛋白检测，更具体地说是涉及一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体及其应用。
技术介绍
1、猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus，fpv)最早发现于20世纪20年代。该病毒主要通过口-鼻方式进行传播，同时患病动物也可通过粪便向外界排毒。fpv可以感染家猫及猫科、浣熊科、鼬科等野生动物，且幼龄动物感染率较高，对野生动物和家猫造成很大的威胁。该病毒引起的临床症状主要为呕吐、腹泻、排稀便，体温呈明显的双相热，并且能够导致猫体内的白细胞显著减少。fpv属于细小病毒科、细小病毒属的单链dna病毒，主要由2种蛋白组成，分别是结构蛋白(vp1蛋白、vp2蛋白)和非结构蛋白(ns1蛋白、ns2蛋白)。vp2蛋白是细小病毒衣壳的最主要成分，该蛋白中某些关键位点的氨基酸变化会导致细小病毒的抗原特性和细胞向性发生改变，同时也会造成细小病毒发病机制的改变。由vp2蛋白组成的病毒样颗粒可以用于制备多种病毒的候选疫苗，并且能够很好的诱导体液和细胞免疫，通常被用做诊断抗原。
2、核酸适配体(简称适配体)是通过指数富集的配体系统进化(systematicevolution of ligands by exponential enrichments，selex)技术筛选得到的能够与多种靶物质特异性结合的单链dna或rna片段。与抗体相比，适配体具有可结合的靶物质种类广(病毒、细菌、细胞、蛋白质、多肽、重金属离子等)、免疫原性低、稳定性好、成本低、制备快速简单和易于标记，且分子量小等优
3、现有检测fpv的方法存在成本高，特异性与敏感性低，不易商品化和批量检测等不同的缺陷，尤其是一些基于抗体建立的检测方法，由于抗体的不稳定性，且制备过程复杂、周期长，影响和限制了相关检测方法的临床应用，而适配体在很多方面优于抗体，可以克服上述缺点。
4、因此，提供一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体及其应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体序列如seq idno.3和/或seq id no.4所示：
4、5'-ccaagactgttaagttcctaaagtcaggtacaagccatgcacgac-3'，如seq id no.3所示；
5、5'-cgatcgaactgtaacgggtcagaggaaagtacacggcaagcacga-3'，如seq id no.4所示。
6、优选地，所述适配体5'端和3'端分别结合有5'-atcgtctgctccgtccaata-3'和5'-tttggtgtgaggtcgtgc-3'核苷酸序列，为筛选适配体时，用于pcr扩增获得次级筛选文库的接头引物。
7、优选地，所述适配体的核苷酸序列上结合有氨基酸及其衍生物、多肽、蛋白质、维生素、激素、核苷酸、生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、酶或胶体金。
8、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的适配体在制备检测fpv试剂盒中的应用。
9、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的适配体在制备抗fpv药物中的应用。
10、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的一种含有所述的适配体的药物。
11、作为与上述技术方案相同的专利技术构思，本专利技术还请求保护所述的一种含有所述的适配体的试剂。
12、本专利技术利用selex技术，以fpv-vp2蛋白作为结合抗原从核酸文库中筛选出适配体，后续通过适配体二级结构预测、适配体亲和力测定、适配体特异性检测等鉴定出两条结合力最高、特异性良好的适配体，其核心序列分别如seq id no.3和seq id no.4所示。本专利技术筛选和制备的fpv-vp2蛋白特异性适配体具有极好的特异性和亲和力，为fpv抗原检测技术的进一步研究提供了重要技术支撑。
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1.一种可特异性结合FPV-VP2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体序列如SEQ IDNO.3和/或SEQ ID NO.4所示：
2.根据权利要求1所述的一种可特异性结合FPV-VP2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体5，端和3，端分别结合有5，-ATCGTCTGCTCCGTCC AATA-3，和5，-TTTGGTGTGAGGTCGTGC-3，核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的一种可特异性结合FPV-VP2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体的核苷酸序列上结合有氨基酸及其衍生物、多肽、蛋白质、维生素、激素、核苷酸、生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、酶或胶体金。
4.根据权利要求3所述的一种可特异性结合FPV-VP2蛋白的适配体，其特征在于，在SEQID NO.3所述序列的第23为C碱基上以FAM标记，在SEQ ID NO.4所述序列第30位T碱基上以FAM标记。
5.根据权利要求3所述的一种可特异性结合FPV-VP2蛋白的适配体，其特征在于，以5μl400μM Biotin-dCTP对所述适配体进行标记。
7.根据权利要求1-5任一所述的适配体在制备抗FPV药物中的应用。
8.一种含有权利要求1-5任一所述的适配体的药物。
9.一种含有权利要求1-5任一所述的适配体的试剂。
...【技术特征摘要】
1.一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体序列如seq idno.3和/或seq id no.4所示：
2.根据权利要求1所述的一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体5，端和3，端分别结合有5，-atcgtctgctccgtcc aata-3，和5，-tttggtgtgaggtcgtgc-3，核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的一种可特异性结合fpv-vp2蛋白的适配体，其特征在于，所述适配体的核苷酸序列上结合有氨基酸及其衍生物、多肽、蛋白质、维生素、激素、核苷酸、生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、酶或胶体金。
4.根据权利要求3...
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