【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种干细胞在治疗血管损伤药物中的用途。
技术介绍
1、1997年，asahara 等人发现了一类骨髓来源的循环内皮祖细胞（epcs），有助于血管生成和/或缺血组织中的血管生成。从那时起，多项研究报道了干细胞和祖细胞促进新生血管形成的能力，减少了缺血性损伤。临床研究结果也表明了自体干细胞移植适用于cli患者，患者临床症状改善，疼痛减轻，无痛总步行距离增加，截肢率降低。
2、新血管形成涉及祖细胞的迁移、增殖和分化以及生长因子和细胞因子之间的相互作用，从而在先前已经存在的血管中生长出新血管。新血管形成的过程也很复杂。在血管生成期间，存在于血管壁中的ecs 响应于各种刺激而被激活，并开始表达各种生长因子、血管生成素（ang1和ang2）、血管内皮生长因子（vegf）等，它们在血管形成过程中起重要作用。
3、作为能够自我更新而且分化成各种其它细胞的细胞，目前干细胞有两类：胚胎干细胞与成体干细胞。成体干细胞是部分定向分化细胞，具有产生专门细胞的能力。成体干细胞有三种：（1）骨髓基质干细胞，（2）干/祖细胞（也源自骨髓）的循环池，（3）组织驻留干细胞。
4、内皮祖细胞在血液和骨髓中均较少存在，较难获取，需要从大量的血液或骨髓中方可获得，而且需要很长时间培养，培养费、价格很高，这些问题使得内皮祖细胞的临床应用受到的限制，很难开展。而 msc从自身骨髓中获取，方便易行，更重要的是，可在体外短期内通过纯化与扩增从而获得大量msc。因此，msc成为近年来作为移植干细胞更可靠的来源，而且m
5、mscs能够促进血管生成，因为它们具有刺激ec迁移和管形成的能力。此外，mscs支持新血管生成，释放有助于刺激血管生成的可溶性因子。mscs是在其表面上表达有特异性的分子如 cd73，cd90 和 cd105的细胞亚群; msc同时也会表达cd54/cd102，cd166与 cd49（α整联蛋白），调节细胞与细胞之间的相互作用，mscs可以在胎儿和成体组织中发现，通常从骨髓、脂肪组织、脐带血和密质骨分离提取出来。此外，mscs 能够迁移到受损部位并归巢于损伤部位，并且通过分化成特异性细胞以及分泌营养因子来激活旁分泌信号。这些细胞与免疫应答交互而具备调节作用，通过抑制肿瘤坏死因子-α（tnfa）和干扰素-γ（ifn-γ）和通过增加白细胞介素 10（il-10）等而起作用。这种独特的免疫调节特性使这些细胞适合自体和异种移植，因为其能够抑制移植的排斥反应。由于它们能够分化成肌肉、神经前体、心肌细胞和血管周围细胞，mscs显示出巨大的治疗潜力。
6、目前，已经有一些研究结果显示无论是自体msc移植还是异体 msc移植，两种方法均可以治疗血管缺血性疾病引起的损伤，可以使血管再生，改善血供，具有较好的临床应用价值。然而，目前的问题在于，干细胞移植后存活率低，toma等应用干细胞移植治疗心肌梗塞，结果显示，4 天后移植的干细胞仅有0.44%存活，绝大部分凋零死亡，而且，移植的干细胞病变的心肌梗塞部位迁移能力也很低。
7、shake等应用多达6×107个干细胞来治疗心肌梗死的猪模型，结果显示，移植的干细胞仅仅促进了梗死灶边缘周围的部分心肌功能改善，但是msc迁移能力较低，到达损伤病变部位的移植干细胞少，这对修复损伤部位血管再生有不利影响，达不到治疗效果，影响了临床应用。所以，目前的研究结果显示，干细胞移植治疗血管损伤所导致缺血性疾病，关键因素是移植的干细胞必须具有较强的存活、迁移以及分化能力。
8、现有技术cn114558115 b公开了应用ela改善adscs的生存和迁移。在ela改善adscs生存和迁移的研究中发现，缺血缺氧条件下ela促进adscs的存活并抑制adscs的凋亡，同时促进adscs的迁移。这些结果表明，ela可被作为一种有前途的干细胞处理方法，用于延长adscs的寿命，提高干细胞在治疗缺血性心脏病和血管损伤等疾病中的应用效果。
9、现有技术cn113736731b公开了一种脂肪间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法，所述基础培养基包括dmem/f12培养基；所述添加物包括转铁蛋白、重组人胰岛素、成纤维细胞生长因子、纤连蛋白、黄芪甲苷、党参提取物和芦荟提取物。通过各组分的协同配合作用，不但能促进脂肪干细胞的生长和增殖，而且能够降低细胞损伤，提高细胞的存活率，从而提高脂肪干细胞体外扩增能力。
10、潘晓茜研究发现衰老的管周脂肪干细胞促进了外膜成肌纤维的增殖，加剧了血管损伤后重塑；与年轻组相比，年老组脂肪干细胞 mir-146b-3p表达显著下降；与对照组相比，过表达mir-146b-3p可改善老年小鼠脂肪干细胞的成棕脂能力；而年轻小鼠脂肪干细胞的成脂能力随mir-146b-3p表达下降而降低；干扰年轻小鼠脂肪干细胞内 mir-146b-3p的表达可抑制其向棕色脂肪分化，且影响其功能；因此，脂肪干细胞向棕色脂肪细胞分化能力随年龄增加而降低，mir- 146b-3p 参与调控衰老脂肪干细胞的成脂分化，并影响其脂肪细胞分泌功能，从而参与调节衰老机体的代谢紊乱（参见“衰老对脂肪干细胞分化与功能影响及相关机制研究”，《上海交通大学硕士学位论文》）。
11、因此，亟需获得具有较强的存活、迁移以及分化能力的脂肪干细胞，并且可以依据mir-146b-3p的表达量作为一个脂肪干细胞衡量指标，从而为治疗血管损伤提供更好的应用。
技术实现思路
1、本专利技术首先提供一种干细胞在治疗血管损伤药物中的用途，所述干细胞包含脂肪干细胞、骨髓干细胞、脐带血干细胞。
2、优选地，所述干细胞为脂肪干细胞。
3、优选地，所述脂肪干细胞制备方法包含以下步骤：（1）脂肪干细胞分离提取；（2）脂肪干细胞培养；（3）脂肪干细胞鉴定。
4、优选地，所述（2）脂肪干细胞培养使用包含scf、尼克酰胺和vegf的培养基。
5、优选地，所述scf、尼克酰胺和vegf在培养基中的浓度依次为0.1-1ng/ml、10-20mmol/l和20-100ng/ml。
6、优选地，所述scf、尼克酰胺和vegf在培养基中的浓度依次为0.2-0.8ng/ml、12-18mmol/l和30-80ng/ml。
7、优选地，所述scf、尼克酰胺和vegf在培养基中的浓度依次为0.5ng/ml、15 mmol/l和45ng/ml。
8、优选地，所述脂肪干细胞高表达mir-146b-3p。
9、其次，本专利技术还提供一种治疗血管损伤药物，所述药物包含上述脂肪干细胞。
10、最后，本专利技术还提供一种用于制备脂肪干细胞的培养基，所述培养基的组分包含10% fbs（胎牛血清）的低糖 dmem、scf、尼克酰胺和vegf。
11、本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
12、本专利技术使用的培养基制备得本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种干细胞在治疗血管损伤药物中的用途，其特征在于：所述干细胞包含脂肪干细胞；
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述SCF、尼克酰胺和VEGF在培养基中的浓度依次为0.1-1ng/mL、10-20 mmol/L和20-100ng/mL。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述SCF、尼克酰胺和VEGF在培养基中的浓度依次为0.2-0.8ng/mL、12-18 mmol/L和30-80ng/mL。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述SCF、尼克酰胺和VEGF在培养基中的浓度依次为0.5ng/mL、15 mmol/L和45ng/mL。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述脂肪干细胞高表达miR-146b-3p。
6.一种治疗血管损伤药物，其特征在于，所述药物包含脂肪干细胞；
7.一种用于制备脂肪干细胞的培养基，其特征在于，所述培养基的组分包含10% FBS的低糖DMEM、SCF、尼克酰胺和VEGF。
【技术特征摘要】
1.一种干细胞在治疗血管损伤药物中的用途，其特征在于：所述干细胞包含脂肪干细胞；
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述scf、尼克酰胺和vegf在培养基中的浓度依次为0.1-1ng/ml、10-20 mmol/l和20-100ng/ml。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述scf、尼克酰胺和vegf在培养基中的浓度依次为0.2-0.8ng/ml、12-18 mmol/l和30-80ng/ml。
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【专利技术属性】
技术研发人员：戴晓宇，李栋，李树建，
申请(专利权)人：山东省泉溪生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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