【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物检测技术，尤其涉及一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法。
技术介绍
1、紫背天葵草为菊科千里光属植物裸茎千里光senecio nudicaulisbuch.-ham.exd.don的全草，记载历史最早可追溯到南北朝雷敩所著的《雷公炮制论》：“如要形坚，岂忘‘紫背’。”因其叶背面皆成紫红色，故被称为“紫背天葵草”。清代《植物名实图考》第十三卷亦将紫背天葵草收录其中。紫背天葵草有许多别名，例如：紫背鹿含草(《滇南本草》)，紫背鹿衔草(《昆明民间草药》)，反背红，草板背红、天青地红、反背绿丸、老母猪花头(《云南中草药》)。夏、秋采收，洗净，干燥。其性辛、微苦，平。有小毒。归心、肝、脾经。具有解毒消肿，活血散瘀，消积的功效。用于月经不调，崩漏带下，水肿，食积，小儿疳积，疮疡肿毒，乳痈；跌打损伤。作为云南地方特色用药，需求量大。但目前关于紫背天葵草含量测定或特征图谱测定等质量控制的文献相对较少，较难准确评价紫背天葵草的质量，存在一定的用药安全隐患。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法。
2、为实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：
3、一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，包括以下步骤：
4、1)取紫背天葵草制备供试品溶液；
5、取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸制备对照品溶液；
6、2)分别
7、其中，高效液相色谱检测过程中，采用乙腈为流动相a、0.1～0.3wt％的磷酸水溶液为流动相b进行梯度洗脱，洗脱条件为：
8、0～14min，5％→7％流动相a，95％→93％流动相b；
9、14～22min，7％→12％流动相a，93％→88％流动相b；
10、22～32min，12％→28％流动相a，88％→72％流动相b；
11、32～33min，28％→87％流动相a，72％→13％流动相b。
12、进一步的，高效液相色谱检测的检测波长为330～340nm、流速为0.8～1.2ml/min、柱温为30～40℃。
13、进一步的，对照品溶液中新绿原酸的含量在2.48～79.33μg/ml之间、绿原酸的含量在3.48～111.41μg/ml之间、隐绿原酸的含量在2.46～78.66μg/ml之间和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸的含量在1.44～46.24μg/ml之间。
14、进一步的，供试品溶液是取紫背天葵草，加入浓度为65～75wt％甲醇水溶液，超声提取，过滤制得；
15、其中，紫背天葵草与甲醇水溶液的重量体积比为1g：230～280ml。
16、一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，包括以下步骤：
17、取紫背天葵草制备供试品溶液；
18、对供试品溶液进行高效液相色谱检测，所得不同化学成分的峰面积代入各化学成分相应的标准曲线，分别计算得紫背天葵草中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸及4,5-o-二咖啡酰基奎宁酸的含量；
19、其中，采用乙腈为流动相a、0.1～0.3wt％的磷酸水溶液为流动相b进行梯度洗脱，洗脱条件为：
20、0～14min，5％→7％流动相a，95％→93％流动相b；
21、14～22min，7％→12％流动相a，93％→88％流动相b；
22、22～32min，12％→28％流动相a，88％→72％流动相b；
23、32～33min，28％→87％流动相a，72％→13％流动相b。
24、进一步的，各化学成分相应的标准曲线分别为：
25、新绿原酸对应的标准曲线为：y＝19213x-4942.5，r2＝0.9999；
26、绿原酸对应的标准曲线为：y＝18826x-1623，r2＝0.9999；
27、隐绿原酸对应的标准曲线为：y＝18865x-1542.3，r2＝1；
28、4,5-o-二咖啡酰基奎宁酸对应的标准曲线为：y＝19031x-2650.2，r2＝0.9999。
29、进一步的，各化学成分相应的标准曲线的获得方法如下：
30、取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸共4种化学成分共同制备不同浓度的对照品系列溶液；
31、分别取不同浓度的对照品系列溶液进行高效液相色谱检测，并根据不同化学成分的浓度和相应化学成分对应浓度测定的峰面积，绘制不同化学成分相应的标准曲线。
32、进一步的，不同浓度的对照品系列溶液中新绿原酸的浓度在2.48～79.33μg/ml之间、绿原酸的浓度在3.48～111.41μg/ml之间、隐绿原酸的浓度在2.46～78.66μg/ml之间和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸的浓度在1.44～46.24μg/ml之间。
33、进一步的，高效液相色谱检测的检测波长为330～340nm、流速为0.8～1.2ml/min、柱温为30～40℃。
34、进一步的，供试品溶液是取紫背天葵草，加入浓度为65～75wt％的甲醇水溶液，超声提取，过滤制得；
35、其中，紫背天葵草与甲醇水溶液的重量体积比为1g：230～280ml。
36、本专利技术的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法的有益效果为：
37、本专利技术通过构建hplc检测紫背天葵草特征图谱中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸这4个特征峰同时定量的方法，实现对紫背天葵草中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸这4个指标成分的定量分析及控制，为后期紫背天葵草物质基础研究过程中，成分与活性研究提供依据，使之发挥更大的药用价值，也为紫背天葵草制剂二次开发提供了有力支撑；
38、由于紫背天葵草的品质受药材来源、种植方法、饮片炮制等因素影响，且紫背天葵草化学成分复杂，将紫背天葵草中的化学成分量化，有利于保证制备的紫背天葵草制剂的质量及疗效；
39、本专利技术的构建方法通过选择合适的色谱条件和前处理条件，实现了通过一次进样，同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸这4种化学成分的含量，能够快速、简便的获知紫背天葵草的质量情况，解决了现有技术的检测方法仅能够一次测定一种或两三种化学成分含量，需要多次调整色谱条件才能完成多种化学成分含量测定的问题，节省了操作步骤，能够实现对4种最主要的化学成分进行定量分析，从而更为全面的控制紫背天葵草的质量，实现了通过同时定量分析紫背天葵草中4种化学成分来控制紫背天葵草质量的目的；
40、本专利技术的紫背天葵草特征图本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，高效液相色谱检测的检测波长为330～340nm、流速为0.8～1.2mL/min、柱温为30～40℃。
3.根据权利要求1或2所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，对照品溶液中新绿原酸的含量在2.48～79.33μg/mL之间、绿原酸的含量在3.48～111.41μg/mL之间、隐绿原酸的含量在2.46～78.66μg/mL之间和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的含量在1.44～46.24μg/mL之间。
4.根据权利要求1或2所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，供试品溶液是取紫背天葵草，加入浓度为65～75wt％甲醇水溶液，超声提取，过滤制得；
5.一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的紫背天葵草特征图谱
7.根据权利要求5或6所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，各化学成分相应的标准曲线的获得方法如下：
8.根据权利要求7所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，不同浓度的对照品系列溶液中新绿原酸的浓度在2.48～79.33μg/mL之间、绿原酸的浓度在3.48～111.41μg/mL之间、隐绿原酸的浓度在2.46～78.66μg/mL之间和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的浓度在1.44～46.24μg/mL之间。
9.根据权利要求5、6或8所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，高效液相色谱检测的检测波长为330～340nm、流速为0.8～1.2mL/min、柱温为30～40℃。
10.根据权利要求5、6或8所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，供试品溶液是取紫背天葵草，加入浓度为65～75wt％的甲醇水溶液，超声提取，过滤制得；
...【技术特征摘要】
1.一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，高效液相色谱检测的检测波长为330～340nm、流速为0.8～1.2ml/min、柱温为30～40℃。
3.根据权利要求1或2所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，对照品溶液中新绿原酸的含量在2.48～79.33μg/ml之间、绿原酸的含量在3.48～111.41μg/ml之间、隐绿原酸的含量在2.46～78.66μg/ml之间和4,5-o-二咖啡酰奎宁酸的含量在1.44～46.24μg/ml之间。
4.根据权利要求1或2所述的紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，供试品溶液是取紫背天葵草，加入浓度为65～75wt％甲醇水溶液，超声提取，过滤制得；
5.一种紫背天葵草特征图谱中4个特征峰同时定量的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的紫背天葵草...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁彩娟，李思远，田方，高晗，李军山，田伟，姜国志，耿彦梅，张亚茹，肖德琳，郝晓卓，苏凤丽，庞丽华，李振江，
申请(专利权)人：神威药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。