【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于兽用生物制品，尤其涉及一种提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法。
技术介绍
1、胚蛋注射被认为是促进家禽生长发育的一种有效的方式，该方式可将营养输送到胚胎内，在受精种蛋胚胎发育过程中，通过增加某些营养素的供应，减少疾病的发病率以弥补在孵化过程中发生能量不足的问题。考虑到刚孵化的雏鸡对各种病原体的易感性，胚蛋注射技术可以起到增强孵化雏鸡的免疫反应性，同时降低它们对病原体的易感性。胚蛋注射微生态制剂技术同样存在局限性，如储存运输、稀释方法、注射时机和部位、注射设备是否无菌、操作手法或孵化场管理是否规范等。
2、大量研究表明，在胚胎发育时期注射营养物质后，营养物质通过羊水被口腔吞食进入胃肠道内，可提高种蛋的孵化率和出壳后雏鸡的体增重，与对照组相比，体重增加的趋势可以维持到35日龄，但胚蛋注射存在一定的应激反应。胚蛋注射效果受注射部位、注射时间、注射液的种类和注射剂量等多种因素影响。注射条件不同，注射液被胚胎吸收的利用率不同，促进胚胎发育的效果也不同。
3、目前，胚胎发育时期注射微生态制剂进行早期营养调控的研究较少，如果可以在胚胎发育期注射黏膜免疫微生态制剂达到早期营养调节的目的，一方面能改善雏鸡的生长发育，另一方面可以刺激机体局部黏膜免疫，为进一步探究微生态制剂进行胚蛋注射对雏鸡免疫功能的影响奠定基础。大量研究表明在不同胚胎发育时期注射不同的生物活性物质可以促进雏鸡生长发育。胚蛋注射对于更好地推动家禽行业的健康生产与稳定发展有着重要意义，迫切需要研究绿色、安全和无残留的生物活性物质应用于家
4、通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：
5、(1)本技术将注射时间和部位定为孵化第18.5天羊膜腔注射，能否将注射时间进一步提前或延迟，注射其他部位如气室或卵黄囊，以取得更好的促进生长、发育作用有待进一步研究。
6、(2)胚蛋注射构建的乳酸菌微生态制剂对spf仔鸡的整个生命周期是否具有促进作用，从成本方面考虑是否为正效益等有关问题，还有待进一步的研究。
7、(3)胚蛋注射不同浓度微生态制剂对胚胎发育影响的分子机制及对spf鸡的免疫机制尚不明确还有待进一步研究。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法。
2、本专利技术目的是为了有效解决家禽胚胎发育中出现的能量供应不足的问题，提出了一种在胚胎发育末期注射微生态制剂的注射方法，更早地刺激机体免疫，为雏鸡出壳后良好的生长发育奠定基础，为家禽生产提供了新的思路。
3、本专利技术旨在探究胚蛋注射微生态制剂作为一种有效的早期营养调控手段的作用机理。为此，我们将以spf蛋鸡为实验对象，在第18.5胚龄，将构建成功的微生态制剂乳糖诱导后注射到羊膜腔内。我们将从分子水平上揭示胚蛋注射微生态制剂对雏鸡早期生长发育潜在的作用机理。具体而言，我们将测定注射组和对照组的雏鸡生长发育指标，以及肠道消化酶活性，并通过数据分析深入探究其作用机理。该研究有望为开发新型早期营养调控手段提供科学依据。
4、一种用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，该系统包括：
5、蛋处理模块，用于对spf级种蛋进行室温放置、表面消毒、分组称重和孵化器内的孵化，其中孵化器设置有温度控制装置和湿度控制装置，以及自动翻蛋机制；
6、制剂注射模块，用于在胚胎发育的第18.5天确定羊膜腔位置，并在每枚蛋内注射指定浓度的微生态制剂溶液；
7、注射孔密封模块，用于在注射后使用灭菌石蜡密封注射孔，确保胚蛋的无菌状态；
8、数据收集与分析模块，用于收集雏鸡出壳后的体重数据、孵化率、料重比以及肠道消化酶活性数据，并进行相应的分析。
9、其中该系统使用的微生态制剂溶液为浓度为1.0×10^9cfu/ml和1.0×10^11cfu/ml的乳酸菌。
10、其中该系统包括一个自动计算模块，用于根据孵出鸡数、入孵种蛋数、未受精种蛋数和破损种蛋数计算受精种蛋的孵化率。
11、其中该系统包括一个料重比计算模块，用于计算总耗料与总增重的比值，以评估雏鸡的生长效率和饲料利用效率。
12、本专利技术是这样实现的，一种提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法，包括：
13、s1，将spf级种蛋(蛋重范围56.8-57.0g，平均蛋重56.92g，购自北京勃林格翰维通生物技术有限公司)，购自北京勃林格翰维通生物技术有限公司室温放置16小时后，用浓度为75％的酒精对蛋壳表面进行全面消毒，随机分组称重后放于孵化器(广东依爱孵化机厂)；将孵化温度设置为37.5℃-38.2℃，湿度设置为60％-70％，每间隔2h自动翻蛋一次；
14、s2，在18.5胚龄，经照蛋后确定羊膜腔的位置，每枚蛋内各注射0.2ml溶液；
15、s3，胚蛋注射完成后，将灭菌石蜡滴在蛋壳上的注射孔进行密封，再将胚蛋迅速放回孵化出雏器内，所有受精蛋在孵化器外30min内完成胚蛋注射程序；
16、s4，待雏鸡出壳12h后称重，统计各组孵化率；选择1、7、14和21日龄各组雏鸡空腹12h后称量体重，每组随机抽取5-6羽。观察体重增长情况，称量采食量，计算平均每周增重和料重比；
17、s5，在出壳后的第1、7、14、21日龄，分别从对照组和注射组中随机抽取3只鸡，剖杀后取空肠5cm，去除肠道食物残渣后，刮去肠道黏膜表面，用提前在4℃冰箱预冷1.0ml含0.1mg/ml的胰蛋白酶抑制剂的pbst溶液对肠段进行反复冲洗，5000rpm离心6min后取上清，转移至新的1.5ml ep管中，将分离的肠洗液并做好标记，并检测肠道消化酶活性。
18、进一步，s2中注射液为1.0×10 9cfu/ml和1.0×10 11cfu/ml乳酸菌微生态制剂。
19、进一步，s4中，在孵化时，记录孵化和未孵化的雏鸡数量，以计算每个重复的雏鸡孵化率，公式如下：
20、受精种蛋孵化率hatchability(％)＝孵出鸡数/(入孵种蛋数－未受精种蛋数－破损种蛋数)×100；
21、料重比：料重比(g/g-1)＝总耗料/总增重。
22、结合上述的技术方案和解决的技术问题，本专利技术所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
23、第一，本专利技术利用胚蛋照蛋技术,进行羊膜腔注射微生态制剂,为家禽营养调控开辟了一个全新的领域-胚蛋注射营养,本专利技术适用于给适龄胚蛋提供营养,在不影响孵化率前提从而提高雏鸡早期个体生长发育,本专利技术在不影响孵化率前提下,提高了雏禽的周增重、采食量、改善饲料料重比；提高了雏鸡早期消化酶活性。
24、第二，胚蛋注射微生态制剂能有效解决家禽胚胎发育中出现的能量供应不足的问题，更早地刺激机体免疫，为雏鸡出壳后良好的生长发育奠定基础，为家禽生产提供了新的思路。本专利技术构建的微生态制剂可以将编码外源性抗原本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，该系统包括：
2.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，该系统使用的微生态制剂溶液为浓度为1.0×10^9CFU/mL和1.0×10^11CFU/mL的乳酸菌。
3.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其中该系统包括一个自动计算模块，用于根据孵出鸡数、入孵种蛋数、未受精种蛋数和破损种蛋数计算受精种蛋的孵化率。
4.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其中该系统包括一个料重比计算模块，用于计算总耗料与总增重的比值，以评估雏鸡的生长效率和饲料利用效率。
5.一种基于权利要求1所述系统的提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法，其特征在于，包括：
6.根据权利要求5所述的提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法，其特征在于，
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，S4中孵化率的计算方法如下：\[\text{受精种蛋孵化率(hatchability)}＝\frac{\text{孵出鸡数}}{\text{入孵种蛋数}\text{未受精种蛋数}\text{破损种蛋数}}\times 100\％\]。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，S4中料重比的计算方法为总耗料与总增重的比值：\[\text{料重比}＝\frac{\text{总耗料}}{\text{总增重}}\]。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，S3中使用灭菌石蜡进行注射孔的密封，以防微生物污染，并保持胚蛋在孵化过程中的无菌状态。
10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，S1中孵化器具备自动翻蛋机制，每2小时翻蛋一次，以模拟自然孵化过程中母鸡翻动蛋的行为，促进胚胎均匀发育。
...【技术特征摘要】
1.一种用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，该系统包括：
2.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，该系统使用的微生态制剂溶液为浓度为1.0×10^9cfu/ml和1.0×10^11cfu/ml的乳酸菌。
3.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其中该系统包括一个自动计算模块，用于根据孵出鸡数、入孵种蛋数、未受精种蛋数和破损种蛋数计算受精种蛋的孵化率。
4.如权利要求1所述的用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其特征在于，用于提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射系统，其中该系统包括一个料重比计算模块，用于计算总耗料与总增重的比值，以评估雏鸡的生长效率和饲料利用效率。
5.一种基于权利要求1所述系统的提高雏鸡早期个体发育的胚蛋微生态制剂注射方法，其特征在于，包括：
6.根据权利要求5所述的提高雏...
【专利技术属性】
技术研发人员：鞠安琪，杨树宝，秦延军，段傲毅，张英楠，马馨，栾维民，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院中国农业科技东北创新中心，
类型：发明
国别省市：
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