【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，特别是涉及一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，prrs)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)引起的一种以妊娠母猪繁殖障碍以及仔猪呼吸道疾病为主要特征的高度接触性传染疾病。起初依据基因组的同源性特征及血清学上的差别可将prrsv分为2种基因型，即北美型和欧洲型。研究发现，虽然这两种基因型的毒株感染所致疫病的临床特征基本一致，但在基因组同源性、抗原性和毒力等方面均存在明显的不同，核苷酸水平上的同源性在60.0％左右。因此，国际病毒分类委员会(ictv)最新分类已将prrsv的两个基因型分别划分到动脉炎病毒属的两个亚属之中，欧洲型(prrsv-1)和北美型(prrsv-2)被分别重新命名为betaarterivirus suid 1和betaarterivirus suid 2两个种，这标志着prrsv-1和prrsv-2正式被定义为两个不同的病原。因此对这两类不同病原的诊断、监测和防控要区分开来。
2、目前，idexx或金诺研发的针对核衣壳蛋白(n蛋白)抗体的elisa检测方法在临床血清学诊断中应用最广，但此类方法并不能区分prrsv-1或prrsv-2的n蛋白抗体，检测结果与中和抗体的水平也没有相关性，随着prrsv-1在我国的报道越来越多，prrsv-1与prrsv-2混合感染也时有发生，为了能够特异性诊断prrsv-1和prrsv-2病毒及其抗
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该单克隆抗体可以特异性识别北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒，从而为鉴别北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒及其抗体提供了有力的技术支持。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体，包括氨基酸序列如seq id no.3所示的轻链cdr1、氨基酸序列如seq id no.4所示的轻链cdr2、氨基酸序列如seq id no.5所示的轻链cdr3、氨基酸序列如seq id no.6所示的重链cdr1、氨基酸序列如seq id no.7所示的重链cdr2和氨基酸序列如seq id no.8所示的重链cdr3。
4、本专利技术还提供上述的单克隆抗体在制备检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒或其抗体的试剂盒中的应用。
5、进一步地，所述试剂盒为elisa检测试剂盒。
6、进一步地，所述elisa检测试剂盒为阻断elisa检测试剂盒。
7、本专利技术还提供一种检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒或其抗体的试剂盒，包括上述的单克隆抗体。
8、进一步地，所述试剂盒为elisa检测试剂盒。
9、进一步地，所述elisa检测试剂盒为阻断elisa检测试剂盒。
10、进一步地，所述阻断elisa检测试剂盒还包括包被抗原的elisa包被板。
11、进一步地，所述抗原在所述elisa包被板中的包被浓度为500ng/孔。
12、进一步地，所述阻断elisa检测试剂盒还包括tmb底物显色液。
13、本专利技术公开了以下技术效果：
14、本专利技术以北美型prrs疫苗株hun4-f112免疫小鼠，制备得到了一种特异性针对北美型prrsvm蛋白的单克隆抗体，间接免疫荧光试验显示该单克隆抗体仅与北美型prrsv代表株反应，与欧洲型prrsv不反应。亚类鉴定结果表明，该单克隆抗体为igg2a亚类。本专利技术以全病毒为包被抗原，单抗为阻断抗体，通过条件优化，建立了阻断elisa抗体检测方法并组装为试剂盒。本专利技术为特异性鉴别北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒及其抗体提供了有力的技术支持。
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1.一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体，其特征在于，包括氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的轻链CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的轻链CDR2、氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的轻链CDR3、氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的重链CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示的重链CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示的重链CDR3。
2.一种如权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒或其抗体的试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为ELISA检测试剂盒。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述ELISA检测试剂盒为阻断ELISA检测试剂盒。
5.一种检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒或其抗体的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的单克隆抗体。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为ELISA检测试剂盒。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述ELISA检测试剂盒为
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述阻断ELISA检测试剂盒还包括包被抗原的ELISA包被板。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原在所述ELISA包被板中的包被浓度为500ng/孔。
10.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述阻断ELISA检测试剂盒还包括TMB底物显色液。
...【技术特征摘要】
1.一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体，其特征在于，包括氨基酸序列如seq id no.3所示的轻链cdr1、氨基酸序列如seq id no.4所示的轻链cdr2、氨基酸序列如seq id no.5所示的轻链cdr3、氨基酸序列如seq id no.6所示的重链cdr1、氨基酸序列如seq id no.7所示的重链cdr2和氨基酸序列如seq id no.8所示的重链cdr3。
2.一种如权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒或其抗体的试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为elisa检测试剂盒。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述elisa检测试剂盒为阻断eli...
【专利技术属性】
技术研发人员：王倩，田志军，张洪亮，彭金美，周国辉，许浒，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心，
类型：发明
国别省市：
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