【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药学领域，尤其涉及一种多羽凤尾蕨中的新化合物及提取分离纯化方法和应用。
技术介绍
1、在贵州苗族地区调研时，发现当地的苗族同胞将多羽凤尾蕨pteris decrescens同该属其它形态相似的植物混淆使用，用于治疗肠炎，黄疸型肝炎、臃肿疮毒、止血、衄血等疾病。经查阅文献，目前国内外未见有关多羽凤尾蕨活性成分研究的报道，而该属其它种的研究较为成熟，如半边旗、凤尾草等，主要含有二萜、倍半萜、黄酮以及多糖类化合物[1-4]，其中二萜成分大多具有较强的抗肿瘤活性如5f(11α-hydroxy-15-oxo-ent-kaur-16-en-19-oic acid)，而多糖类化合物有可能是该属植物主要的水溶性抗肿瘤活性成分。另外，本课题组前期也对该属其它植物化学成分进行深入研究，如半边旗、蜈蚣草、全缘凤尾蕨等，分离得到了较多具有生物活性的单体化合物，尤其以对映-贝壳杉烷型二萜及其苷为主。根据同属植物具有相似成分的原理，为进一步探明多羽凤尾蕨化学成分组成以及药效物质基础，课题组展开了对多羽凤尾蕨化学成分的研究，通过对其化学成分的预试验研究，发现该植物中可能含有糖苷类、黄酮类、香豆素类以及酚类等化学成分。
2、本专利技术课题组对多羽凤尾蕨甲醇浸提物进行化学成分研究，从中分离得到多个二萜类化合物，其中新化合物4个，分别为：15(8→9)-迁移-对映-贝壳杉-7,16-二烯-19-酸-β-d-吡喃葡萄糖酯(1)、12β-羟基-15-酮-对映-贝壳杉-19-酸-葡萄糖酯(2)、(s)-6-羟基-3-甲基-4-酮-1,4,5,6
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种多羽凤尾蕨中的新化合物。
2、本专利技术的另一目的在于提供一种多羽凤尾蕨中的新化合物的提取分离纯化方法。
3、本专利技术的另一目的在于提供多羽凤尾蕨中的新化合物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
4、为了实现本专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案和步骤实现：
5、本专利技术所述的一种多羽凤尾蕨中的新化合物，所述化合物及结构式分别如下：
6、(1)化合物1(15(8→9)-迁移-对映-贝壳杉-7,16-二烯-19-酸-β-d-吡喃葡萄糖酯)的结构式：
7、
8、(2)化合物2(12β-羟基-15-酮-对映-贝壳杉-19-酸-葡萄糖酯)的结构式：
9、
10、(3)化合物3((s)-6-羟基-3-甲基-4-酮-1,4,5,6-四氢环戊二烯并[b]吡咯-2-羧基)的结构式：
11、
12、(4)化合物4(2,4-双(4-羟基苯基)-3-(甲氧羰基)环丁烷-1-羧酸)的结构式：
13、
14、本专利技术所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗抗肿瘤药物方面的应用。
15、优选的，本专利技术所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗人白血病、人肺癌、人肝癌、人结肠癌药物中的应用。
16、本专利技术所述药物可以加入药学上可接受的辅料制成药学上可接受的固体制剂或液体制剂。
17、本专利技术所述固体制剂为颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、冻干粉针剂。
18、本专利技术所述液体制剂为注射制剂、口服液。
19、本专利技术所述的多羽凤尾蕨中的化合物的提取分离纯化方法，包括以下步骤：
20、1)药材的提取与粗分离
21、多羽凤尾蕨药材经自然阴干，粉碎成粗粉，过80～100目筛，常温下用2倍/次80-98％的甲醇浸泡4-6次，合并浸泡液，减压回收得到稠浸膏；稠浸膏用温水溶解作为水相，采用液-液萃取法，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，有机相和水相比例为1∶1，萃取后分别减压回收溶剂，得乙酸乙酯部位记为a部分，正丁醇部位记为b部分；
22、2)乙酸乙酯部位分离和纯化
23、将乙酸乙酯部位用少量甲醇溶解，取聚酰胺拌样，采用mci柱层析，以1∶1，3∶2，7∶3，4∶1，9∶1的甲醇-水为洗脱系统，进行梯度洗脱，最后以纯甲醇洗脱，得到a1～a5共5个部分；
24、a4部分样品分离：a4部分样品，加入适量甲醇使之溶解，取100～200目硅胶拌样，采用硅胶柱色谱进行分离；先以二氯甲烷洗脱，再以50∶1，25∶1，10∶1，7∶1，5∶1，2∶1的二氯甲烷-甲醇系统梯度洗脱，最后用甲醇洗脱；经tlc检测后，合并相近流分得到a4-1～a4-5共5个部分，再将a4-4部分，采用硅胶柱层析，以20∶1的二氯甲烷-甲醇系统洗脱，得到a4-4-1和a4-4-2两个部分，a4-4-2发现有晶体析出，经过反复重结晶得到化合物1(15(8→9)-迁移-对映-贝壳杉-7,16-二烯-19-酸-β-d-吡喃葡萄糖酯)；
25、3)正丁醇部位分离和纯化
26、取正丁醇部分浸膏，采用mci柱层析，以1∶1，3∶2，7∶3，4∶1，9∶1的甲醇-水为洗脱系统进行梯度洗脱，最后以纯甲醇洗脱，流分通过薄层层析检测合并为b1～b4个部分；
27、b1部分样品分离：将b1以30～60目聚酰胺按1∶1进行拌样，通过c18反相柱，以3∶7，5∶5，7∶3，1∶0的甲醇-水为洗脱剂进行梯度洗脱，通过tlc检测合并得到b1-1～b1-3；将b1-1通过硅胶柱色谱进行分离，以石油醚/乙酸乙酯10∶1，7∶1，5∶1，1∶1进行梯度洗脱，tlc检测合并得到b1-1-1～b1-1-4；再将b1-1-4依次通过硅胶柱色谱，以二氯甲烷/乙酸乙酯20∶1为洗脱剂、c18反相柱色谱，以甲醇-水5∶5，7∶3，1∶0为洗脱剂进行分离，得到化合物4(2,4-双(4-羟基苯基)-3-(甲氧羰基)环丁烷-1-羧酸)；
28、b2部分样品分离：b2部分样品，加入适量甲醇使之溶解，称取100-200目硅胶拌样，采用硅胶柱色谱进行分离；先以乙酸乙酯洗脱，再以50∶1，30∶1，10∶1，5∶1，1∶1的乙酸乙酯-甲醇系统梯度洗脱，最后用甲醇洗脱，经tlc检测后，合并相近流分得到b2-1～b2-4共4个部分；将b2-2部分，采用硅胶柱层析，以30∶1的乙酸乙酯-甲醇系统洗脱，得到b2-2-1和b2-2-2共2个部分，再将b2-2-1经过反复硅胶柱层析得到化合物2(12β-羟基-15-酮-对映-贝壳杉-19-酸-葡萄糖酯)；
29、将b-2-2通过硅胶柱色谱进行分离，以二氯甲烷/甲醇20∶1，10∶1，5∶1，3∶1进行梯本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述化合物及结构式分别如下：
2.根据权利要求1所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗抗肿瘤药物方面的应用。
3.根据权利要求2所述的多羽凤尾蕨中的化合物，其特征在于，所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗人白血病、人肺癌、人肝癌、人结肠癌药物中的应用。
4.根据权利要求2或3任一项所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述药物可加入药学上可接受的辅料制成药学上可接受的固体制剂或液体制剂。
5.根据权利要求4所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述固体制剂为颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、冻干粉针剂。
6.根据权利要求4所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述液体制剂为注射制剂、口服液。
7.一种如权利要求1所述的多羽凤尾蕨中的新化合物的提取分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
8.根据权利要求7所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤1)中所述常温下用2倍/次9
9.根据权利要求7所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤1)中所述浸提提取的时间为：每次浸渍提取4～6天。
10.根据权利要求9所述的提取分离纯化方法，其特征在于，步骤1)中所述浸提提取的时间为：每次浸渍提取5天。
...【技术特征摘要】
1.一种多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述化合物及结构式分别如下：
2.根据权利要求1所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗抗肿瘤药物方面的应用。
3.根据权利要求2所述的多羽凤尾蕨中的化合物，其特征在于，所述化合物1、化合物2、化合物3、化合物4在制备治疗人白血病、人肺癌、人肝癌、人结肠癌药物中的应用。
4.根据权利要求2或3任一项所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述药物可加入药学上可接受的辅料制成药学上可接受的固体制剂或液体制剂。
5.根据权利要求4所述的多羽凤尾蕨中的新化合物，其特征在于，所述固体...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹娟，何康，王蕾，李广杰，叶江海，赵臣亮，杨雅欣，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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