【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及属于微生物的，具体涉及一种链霉菌复合菌剂及其微生物育苗基质、应用。
技术介绍
1、设施作物生产过程中，育苗基质是种苗工厂化生产的基础物质。目前设施土壤连作障碍问题日趋严重，对健康抗病种苗的需求量不断增大。研究者通过向育苗基质中添加生防促生作用的功能菌，制备的微生物育苗基质对种苗抗病和促生具有积极作用。而功能菌株在基质中的活力持久性和在目标作物中的定殖能力影响了微生物育苗基质对栽培作物的作用效果以及持效性，需对常规育苗基质成分进行改良，以充分释放功能菌株效用。
2、草莓果实鲜美、营养价值高、生产周期短、经济效益高，草莓产业已成为现代农业的支柱产业之一。但草莓生育期的高温高湿天气导致草莓苗期病害十分严重，其中草莓炭疽病是最为高发的病害之一。炭疽病可在草莓整个生长期产生危害，尤其是苗期和移栽期的匍匐茎等，严重可导致整株死亡。目前生产上主要采用甲氧基丙烯酸酯类、三唑类等化学杀菌剂进行草莓炭疽病的防治。而利用生防菌拮抗草莓炭疽病研究目前较少。
3、放线菌是一类呈菌丝状生长，主要以孢子繁殖，革兰氏阳性的单细胞原核微生物。链霉菌属于高等放线菌，可产生多种抗菌化合物、植物激素等活性物质，具有抑制致病菌的生长、增强植物的抗病能力、促进植物生长等益生作用，在防治各种植物病害方面具有很大潜力。目前未见利用链霉菌为活性成分制备的微生物育苗基质可同时防治草莓炭疽病和促进草莓幼苗生长的报道。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种链霉菌复合菌剂，该
2、本专利技术的另一目的为提供了一种利用上述链霉菌复合菌剂制备得到的微生物育苗基质。
3、本专利技术还提供了一种上述微生物育苗基质在防治草莓炭疽病和促进草莓幼苗生长中的应用。
4、本专利技术的为了实现上述目的所采用的技术方案为：
5、本专利技术提供了一种链霉菌（ streptomyces sp.）复合菌剂，包括链霉菌cmb19和链霉菌cmb20；所述链霉菌cmb19保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc no.30422，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 streptomyces sp.；所述链霉菌cmb20保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmccno.30423，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 streptomyces sp.。
6、本专利技术还提供了一种利用上述链霉菌复合菌剂制备得到的微生物育苗基质，所述微生物育苗基质通过cmb19发酵液、cmb20发酵液和育苗基质辅料混合物按照重量比1:1:20组成。
7、本专利技术提供的微生物育苗基质中，其育苗基质辅料混合物按重量份的组成为：辣椒秸秆发酵物2~3份，茄子秸秆发酵物1~2份，番茄秸秆发酵物1~2份，蛭石 3~6份，珍珠岩 3~6份，无机盐溶液 0.5~1份。
8、进一步的，上述辣椒秸秆发酵物、茄子秸秆发酵物和番茄秸秆发酵物为辣椒秸秆、茄子秸秆和番茄秸秆的木霉发酵物，具体制备方法为：将辣椒秸秆、茄子秸秆或番茄秸秆分别机械粉碎，然后按109cfu/kg的量混入非洲哈茨木霉ta97的pdb发酵液，常温发酵30d，高压灭菌后晾干并粉碎至直径3~6mm，即为辣椒秸秆发酵物、茄子秸秆发酵物或番茄秸秆发酵物；所述无机盐溶液含有以下组分：(nh4)3po43g/l，mgso4·7h2o 0.5g/l。
9、进一步的，所述cmb19发酵液、cmb20发酵液的具体制备方法为：
10、（1）将链霉菌cmb19、链霉菌cmb20分别在高氏一号培养基上划线，分别得纯化的单菌落；
11、（2）将单菌落分别接种至种子培养基，进行培养，分别得cmb19种子液和cmb20种子液；
12、（3）将cmb19种子液、cmb20种子液分别加入到发酵培养基中，发酵培养得cmb19发酵液和cmb20发酵液。
13、进一步的，步骤（1）中，所述高氏一号培养基的配方为：kno31 g，kh2po40.5 g，mgso4• 7h2o 0.5 g，nacl 0.5 g，feso4•7h2o 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，琼脂15 g，去离子水1000 ml，调节ph 至7.2 - 7.4；121 ℃条件下灭菌 20 min，冷却到50 - 55℃时，每300ml高氏一号培养基里加入1 ml 3 %的重铬酸钾；步骤（2）中，所述种子培养基为高氏一号培养基，配方为：kno31 g，kh2po40.5 g，mgso4• 7h2o 0.5 g，nacl 0.5 g，feso4•7h2o 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，去离子水1000 ml，调节ph 至7.2 - 7.4；121 ℃条件下灭菌 20 min，冷却到50 - 55℃时，每300 ml高氏一号培养基里加入1 ml 3 %的重铬酸钾；步骤（3）中，所述发酵培养基为高氏一号培养基，配方为：kno31 g，kh2po40.5 g，mgso4• 7h2o 0.5 g，nacl0.5 g，feso4•7h2o 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，去离子水1000 ml，调节ph 至7.2 - 7.4；121℃条件下灭菌 20 min，冷却到50 - 55℃时，每300 ml高氏一号培养基里加入1 ml 3 %的重铬酸钾。
14、进一步的，步骤（2）中，所述培养为28℃，160~180rpm条件下培养72h。
15、进一步的，步骤（3）中，所述cmb19种子液和发酵培养基的重量比1:50；所述cmb20种子液和发酵培养基的重量比1:50。
16、进一步的，步骤（3）中，所述发酵培养为28℃，160~180rpm条件下培养120h。
17、本专利技术还提供了一种利用链霉菌复合菌剂制备得到的微生物育苗基质在防治草莓炭疽病和促进草莓幼苗生长中的应用。
18、本专利技术提供的两株链霉菌，是从设施大棚草莓根际分离、筛选出来的，并且采用高氏一号培养基进行培养。将cmb19和cmb20的16s rdna测序序列，在genbank中blast比对结果表明，cmb19与链霉菌 streptomyces caeruleatuslb27（genbank登记号：ku870780.1）的同源性达到98.69%（query cover: 100%, e value: 0），cmb20与链霉菌 streptomyces canus（genbank登记号：mt083986.1）的同源性达到99.93%（query co本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种链霉菌复合菌剂，其特征在于，包括链霉菌CMB19和链霉菌CMB20；所述链霉菌CMB19保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.30422，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 Streptomyces sp.；所述链霉菌CMB20保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.30423，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 Streptomyces sp.。
2.一种利用如权利要求1所述的链霉菌复合菌剂制备得到的微生物育苗基质，其特征在于，所述微生物育苗基质通过CMB19发酵液、CMB20发酵液和育苗基质辅料混合物按照重量比1:1:20组成。
3.根据权利要求2所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述育苗基质辅料混合物按重量份的组成为：辣椒秸秆发酵物2~3份，茄子秸秆发酵物1~2份，番茄秸秆发酵物1~2份，蛭石3~6份，珍珠岩 3~6份，无机盐溶液 0.5~1份。
4.根据权利要求3所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述辣椒秸秆发酵物、茄子秸秆发酵
5.根据权利要求2所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述CMB19发酵液、CMB20发酵液的具体制备方法为：
6.根据权利要求5所述的微生物育苗基质，其特征在于，步骤（1）中，所述高氏一号培养基的配方为：KNO3 1 g，KH2PO4 0.5 g，MgSO4• 7H2O 0.5 g，NaCl 0.5 g，FeSO4•7H2O 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，琼脂15 g，去离子水1000 mL，调节pH 至7.2 - 7.4；121 ℃条件下灭菌20 min，冷却到50 - 55℃时，每300 mL高氏一号培养基里加入1 mL 3 %的重铬酸钾；步骤（2）中，所述种子培养基为高氏一号培养基，配方为：KNO3 1 g，KH2PO4 0.5 g，MgSO4• 7H2O0.5 g，NaCl 0.5 g，FeSO4•7H2O 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，去离子水1000 mL，调节pH 至7.2 - 7.4；121 ℃条件下灭菌 20 min，冷却到50 - 55℃时，每300 mL高氏一号培养基里加入1 mL 3 %的重铬酸钾；步骤（3）中，所述发酵培养基为高氏一号培养基，配方为：KNO3 1g，KH2PO4 0.5 g，MgSO4• 7H2O 0.5 g，NaCl 0.5 g，FeSO4•7H2O 0.01 g，可溶性淀粉 20 g，去离子水1000 mL，调节pH 至7.2 - 7.4；121 ℃条件下灭菌 20 min，冷却到50 - 55℃时，每300 mL高氏一号培养基里加入1 mL 3 %的重铬酸钾。
7.根据权利要求6所述的微生物育苗基质，其特征在于，步骤（2）中，所述培养为28℃，160~180rpm条件下培养72h。
8.根据权利要求5所述的微生物育苗基质，其特征在于，步骤（3）中，所述CMB19种子液和发酵培养基的重量比1:50；所述CMB20种子液和发酵培养基的重量比1:50。
9.根据权利要求8所述的微生物育苗基质，其特征在于，步骤（3）中，所述发酵培养为28℃，160~180rpm条件下培养120h。
10.一种如权利要求2-9任一项所述的微生物育苗基质在防治草莓炭疽病和促进草莓幼苗生长中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种链霉菌复合菌剂，其特征在于，包括链霉菌cmb19和链霉菌cmb20；所述链霉菌cmb19保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc no.30422，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 streptomyces sp.；所述链霉菌cmb20保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc no.30423，保藏日期为2024年04月24日，分类命名为链霉菌 streptomyces sp.。
2.一种利用如权利要求1所述的链霉菌复合菌剂制备得到的微生物育苗基质，其特征在于，所述微生物育苗基质通过cmb19发酵液、cmb20发酵液和育苗基质辅料混合物按照重量比1:1:20组成。
3.根据权利要求2所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述育苗基质辅料混合物按重量份的组成为：辣椒秸秆发酵物2~3份，茄子秸秆发酵物1~2份，番茄秸秆发酵物1~2份，蛭石3~6份，珍珠岩 3~6份，无机盐溶液 0.5~1份。
4.根据权利要求3所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述辣椒秸秆发酵物、茄子秸秆发酵物和番茄秸秆发酵物为辣椒秸秆、茄子秸秆和番茄秸秆的木霉发酵物，具体制备方法为：将辣椒秸秆、茄子秸秆或番茄秸秆分别机械粉碎，然后按109cfu/kg的量混入非洲哈茨木霉ta97的pdb发酵液，常温发酵30d，高压灭菌后晾干并粉碎至直径3~6mm，即为辣椒秸秆发酵物、茄子秸秆发酵物或番茄秸秆发酵物；所述无机盐溶液含有以下组分：(nh4)3po43g/l，mgso4·7h2o 0.5g/l。
5.根据权利要求2所述的微生物育苗基质，其特征在于，所述cmb19发酵液、cmb20发酵液的具体制备方法为：
6.根据权利要求5所述的微生物育苗基质，其特征在于，步骤（1）中，所述高氏一号培养基的配方为：kno3 1 g，kh2po4 0.5 g，m...
【专利技术属性】
技术研发人员：范素素，张新建，凌春丽，贺晓玉，周方园，吴晓青，谢雪迎，赵晓燕，张广志，
申请(专利权)人：山东省科学院生态研究所山东省科学院中日友好生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：
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