【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体制备，特别涉及人c反应蛋白单克隆抗体、抗体对和检测试剂或试剂盒及其应用。
技术介绍
1、c反应蛋白(c-reaction protein，crp)是一种急性时相反应蛋白，在组织受损、发炎或感染时，经细胞因子如il-6、il-2、tnf等诱导，主要在肝脏中合成后存在于人的血液中，其它组织局部如神经细胞、单核细胞、淋巴细胞及动脉粥样硬化斑块内可少量产生crp，其在血中半衰期稳定，约为19h，血液中crp浓度主要依赖于肝脏的生成量。人crp基因位于人1号染色体，在1q21和1q23之间，包含2263个核苷酸，并有一个内含子。crp蛋白以5个相同亚单位形成环状的五聚体，每个单体呈球体形(由206个氨基酸组成)，以非共价形式构成对称的环状五球体，是五聚蛋白(pentraxin)蛋白质家族的成员，相对分子量为115-140kd，沉降系数6.5-7.5，等电点为5.5，不易溶于水。
2、crp具有多种生物学功能，参与多种自身生理及病理过程。crp与磷脂胆碱残基具有高度亲和力，并且可以和多种自身配体(如浆细胞脂蛋白、损伤细胞的细胞膜、小核糖体蛋白颗粒和调理素细胞等)或外来配体(如多聚糖、磷脂以及细菌、真菌、寄生虫等微生物的组分)相结合。crp与这些配体结合后，能激活补体活化经典途径的初级阶段，限制补体激活晚期炎症反应的发展及强度。crp还能增加淋巴细胞活性，加强吞噬细胞的吞噬能力，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。crp广泛参与体内的各种炎症及免疫反
3、鉴于crp的重要生物学功能，检测该指标变得尤为重要。目前，免疫学方法如酶联免疫吸附法、免疫比浊法、免疫沉淀法、免疫荧光法检测crp由于操作简便、结果易于判定，已成为主流方向。不同方法都需要针对于crp的特异性单克隆抗体。传统临床诊断使用的都是鼠源单克隆抗体，其亲和力和特异性普遍较低，可在感染或组织损伤时检测出大于8mg/l的crp，但是不能检测出低浓度(<8mg/l)的crp水平变化。因此，开发新型有效且特异性结合crp的高亲和性抗体具有重要意义和临床价值。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了抗人crp蛋白的特异性强、亲和力高的兔源单克隆抗体和抗体对，利用前述抗体和抗体对构建的检测体系用于检测人crp蛋白，具有灵敏、准确、特异、稳定和抗干扰性强等优点，适用于定性和定量检测极微量水平的人crp蛋白，由此，本专利技术还提供了前述抗体和抗体对在制备人crp蛋白检测试剂或试剂盒中的应用，并提供了含有前述抗体和抗体对的检测试剂或试剂盒。
2、为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案实现：
3、本专利技术第一方面提供了一种人c反应蛋白单克隆抗体，为第一抗体或第二抗体，其中：所述第一抗体轻链可变区上cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.5-7所示，重链可变区上cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.8-10所示；所述第二抗体轻链可变区上cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.15-17所示，重链可变区上cdr1-3的氨基酸序列分别如seqid no.18-20所示。
4、进一步地，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.3所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示；所述第二抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq idno.13所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.14所示。
5、进一步地，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.1所示，重链的氨基酸序列如seq id no.2所示；所述第二抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.11所示，重链的氨基酸序列如seq id no.12所示。
6、进一步地，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或抗体片段；所述抗体片段选自fab片段、f(ab)2片段、fv片段、(fv)2片段、scfv片段和sc(fv)2片段中的至少一种。
7、本专利技术第二方面提供了一种核酸分子、包含所述核酸分子的重组载体或宿主细胞，所述核酸分子编码如上所述的第一抗体或第二抗体。
8、本专利技术第三方面提供了一种人c反应蛋白抗体对，由如上所述的第一抗体和第二抗体组成。
9、本专利技术第四方面提供了如上所述的人c反应蛋白单克隆抗体或抗体对在制备人c反应蛋白检测试剂或试剂盒中的应用。
10、本专利技术第五方面提供了一种人c反应蛋白检测试剂或试剂盒，所述检测试剂或试剂盒包括如上所述的第一抗体和/或第二抗体。
11、进一步地，所述检测试剂或试剂盒包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体为捕获抗体，所述第二抗体为检测抗体，且所述第二抗体修饰有可检测标记。
12、更进一步地，所述可检测标记为生物素。
13、与现有技术相比，本专利技术的优点及积极效果为：
14、本专利技术提供的含有上述cdr序列的抗体异性识别人crp蛋白，具有结合活性好和亲和力高等优势，且第一抗体和第二抗体特异性识别人crp蛋白的不同抗原决定簇，能够形成双抗夹心酶联免疫吸附检测体系，有利于实现微量水平人crp蛋白的灵敏性、准确性、特异性和稳定性检测，在临床诊断和科研领域上均具有重要意义和广泛的应用前景。
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1.一种人C反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为第一抗体或第二抗体，其中：
2.根据权利要求1所述的人C反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；
3.根据权利要求2所述的人C反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
4.根据权利要求1所述的人C反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或抗体片段；
5.一种核酸分子、包含所述核酸分子的重组载体或包含所述核酸分子的宿主细胞，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-4任一项所述的第一抗体或第二抗体。
6.一种人C反应蛋白抗体对，其特征在于，由如权利要求1-4任一项所述的第一抗体和第二抗体组成。
7.如权利要求1-4任一项所述的人C反应蛋白单克隆抗体或如权利要求6所述的人C反应蛋白抗体对在制备人C反应蛋白检测试剂或试剂盒中的应
8.一种人C反应蛋白检测试剂或试剂盒，其特征在于，所述检测试剂或试剂盒包括如权利要求1-4任一项所述的人C反应蛋白单克隆抗体或如权利要求6所述的人C反应蛋白抗体对。
9.根据权利要求8所述的人C反应蛋白检测试剂或试剂盒，其特征在于，所述检测试剂或试剂盒包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体为捕获抗体，所述第二抗体为检测抗体，且所述第二抗体修饰有可检测标记。
10.根据权利要求9所述的人C反应蛋白检测试剂或试剂盒，其特征在于，所述可检测标记为生物素。
...【技术特征摘要】
1.一种人c反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为第一抗体或第二抗体，其中：
2.根据权利要求1所述的人c反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.3所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示；
3.根据权利要求2所述的人c反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.1所示，重链的氨基酸序列如seq id no.2所示；
4.根据权利要求1所述的人c反应蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或抗体片段；
5.一种核酸分子、包含所述核酸分子的重组载体或包含所述核酸分子的宿主细胞，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-4任一项所述的第一抗体或第二抗体。
【专利技术属性】
技术研发人员：颜清成，吴海，黄长青，王新文，张玉冰，谢志文，管翠翠，
申请(专利权)人：武汉爱博泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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