【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种提高蚕丝分泌量的中草药沸石饲料添加剂。
技术介绍
1、蚕化脓病(由病毒和细菌引发的脓病)：随着环境的长时间养殖，蚕在最后吐丝阶段导致化脓病的发生，发病率在20-30％。抗生素的频繁使用不仅造成环境污染,而且因药物残留降低了蚕丝的产品质量。近年来,在许多生物体中发现的抗菌肽具有较强的抗菌活性,与抗生素相比还具有不易产生耐药性,对生物体危害较小等优点,在水产养殖方面成为一个研究的热点.本研究拟以日本鳗鲡为研究对象,从鳗鲡的主要组织器官中提取抗菌肽,为今后鳗鲡细菌性疾病防控提供新的途径.本研究成功的从表皮粘液和脾脏中分离到三个抗菌肽。鱼类是抗菌肽的重要来源，因为它们表达所有主要类别的amps，包括防御素cathelicidins、hepcidins、组蛋白衍生肽等。近年来，关于组蛋白及其衍生肽片段的抗菌作用被广泛研究，其被证明具有强大的抗菌特性，都具有广谱活性。现有的饲料cn111328914a报道，一种中药生物抗病毒饲料及其制备方法，可以在日常生活中给予动物预防病害的优势,节约时间,同时提高生物肉质，cn111887348a提供了一种纳米复合抗病毒饲料添加剂及其制备方法可以能增强动物自身免疫力，有效杀灭多种病毒。但是，均面临着不能解决细菌、病毒联防，增产的问题。因此，开展针对联合增效的新型饲料研究尤为重要。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种提高蚕丝分泌量的中草药沸石饲料添加剂及方法。
2、一种提高蚕丝分泌量的中草药沸石饲料添加剂,
3、进一步的所述抗菌肽的制备方式为:
4、(1)、将鲶鱼粘液以料液比1:100g/ml溶解于蒸馏水中，添加0.85％w/v的木瓜蛋白酶，在ph7和37℃下反应8h，得到酶解物；
5、(2)、酶解物煮沸20min以停止反应，并在冰浴中冷却至室温，酶解物在6℃下以2000×g离心30min，收集上清液；
6、(3)、上清液通过0.22μm滤膜过滤，通过蛋白纯化系统对肽进行高分辨率凝胶过滤纯化，采用流动相为25mmol/l的pbs缓冲液且ph7.0时洗脱，流速0.1ml/min，检测波长250nm，收集所有含有目标肽；
7、(4)、肽液体冻干后得到肽粉。
8、进一步的，所述的目标肽的氨基酸个数10-15。
9、进一步的，所述的鉴定肽的氨基酸序列采用纳升流速的色谱系统进行色谱分离，样品进入色谱分析柱，肽段分离后用质谱仪进行质谱分析，测序，所述的色谱分析柱的色谱条件如下：50min内，流速为300nl/min；流动相a液梯度为0-3min，95-90％；3-4.5min，90-95％；4.5-28min，72-75％；28-40min，60％-80％，流动相b液梯度为0-5min，3％；3-5.5min，3-10％；4.5-28min，8-35％；28-35min，32-45％；31-44min，44-60％；34-45min，99％，参考蛋白质数据库对从头测序分析得到的肽进行鉴定和匹配，通过ncbl网站对已鉴定的所有肽进行比对，选择未报到相应功能，同源性低于70％的序列seq id 1：dkdapavwlwikdvnil、seq id 2：ikvvdwdvdvgwlwd、seq id 3：wlwdwpkasdvdkk。
10、进一步的，所述中草药抗病毒提取物，制备方法为：将墨角藻加入蒸馏水、60％[v/v]乙醇，用超声萃取器分两批提取提取物，3小时；将除去固体的提取液减压浓缩，加入水解酶、风味酶以1：1比例混合的复合酶，按1％至5％加入之后，使用离心机combi-514r在95℃下加热20分钟，并在3,000rpm，4℃下分离酶20分钟，仅收集上清液，上清液通过0.22μm滤膜过滤，通过蛋白纯化系统对肽进行高分辨率凝胶过滤纯化，采用流动相为25mmol/l的pbs缓冲液且ph7.0时洗脱，流速0.1ml/min，检测波长250nm，收集所有含有目标肽；
11、进一步的，所述的目标肽的氨基酸个数10-15。
12、进一步的，所述的鉴定精肽的氨基酸序列采用纳升流速的色谱系统进行色谱分离，样品进入色谱分析柱，肽段分离后用质谱仪进行质谱分析，测序，参考蛋白质数据库对从头测序分析得到的肽进行鉴定和匹配，通过ncbl网站对已鉴定的所有肽进行比对，选择未报到相应功能，同源性低于70％的序列seq id 4：awvikdswdkdapkll、seq id 5：ikvgwlvdwdkasdn、seq id 6：wlidnwvdpddkk。
13、进一步的：所述纳米沸石超载体的制备方式为：市售沸石加入30g二氧化硅球磨。在球磨机中以2500r/min的速度球磨3小时，用筛网筛出罐中粉以5.5℃/min的速度升温至650℃并维持该温度进行氧化灼烧4h，然后粉碎通过100目的筛子。
14、本专利技术取得的技术效果为：
15、采用本产品可以减少细菌、病毒发病率、整体死亡率，促进产丝；采用添加小分子肽、活化沸石同比没有添加的实施例，添加该组分可以显著减少发病率、死亡率，活化沸石可以固载小分子肽，由于其优良的离子交换效果，多孔的物理吸附效应可以延长了药效的时期；添加剂无化学残留，对环境友好制备工艺简单。
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1.一种用于提高提高蚕丝分泌量的抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽原料来源于鲶鱼粘液。
2.根据权利要求1所述的的抗菌肽，其特征在于：所述的抗菌肽的氨基酸个数10-15。
3.根据权利要求1所述的的抗菌肽，其特征在于：所述的抗菌肽包括SEQ ID 1：DKDAPAVWLWIKDVNIL、SEQ ID 2：IKVVDWDVDVGWLWD、SEQ ID 3：WLWDWPKASDVDKK。
4.一种用于提高提高蚕丝分泌量的中草药抗病毒提取物，其特征在于：原料来源于墨角藻。
5.根据权利要求1所述的的中草药抗病毒提取物，其特征在于：所述的提取物的氨基酸个数10-15。
6.根据权利要求1所述的的中草药抗病毒提取物，其特征在于：所述的提取物的氨基酸包括：SEQ ID 4：AWVIKDSWDKDAPKLL、SEQ ID 5：IKVGWLVDWDKASDN、SEQ ID 6：WLIDNWVDPDDKK。
7.一种提高蚕丝分泌量的中草药沸石饲料添加剂,所述组合物包含抗菌肽、中草药抗病毒发酵提取物和纳米沸石超载体，所述各个组分重量
8.根据权利要求1所述的复合饲料添加剂，其特征在于：所述抗菌肽的制备方式为:
9.根据权利要求1所述的复合饲料添加剂，其特征在于：优选地，参考蛋白质数据库对从头测序分析得到的肽进行鉴定和匹配，通过NCBI网站对已鉴定的所有肽进行比对，选择未报到相应功能，同源性低于70％的序列。
10.根据权利要求1所述的复合饲料添加剂，其特征在于：所述中草药抗病毒提取物，制备方法为：
11.根据权利要求1所述的复合饲料添加剂，其特征在于：所述纳米沸石超载体的制备方式为：市售沸石加入二氧化硅10:1球磨，在球磨机中以2500r/min的速度球磨3小时，用筛网筛出罐中粉以6.5℃/min的速度升温至750℃并维持该温度进行氧化灼烧5h，然后粉碎通过100目的筛子。
...【技术特征摘要】
1.一种用于提高提高蚕丝分泌量的抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽原料来源于鲶鱼粘液。
2.根据权利要求1所述的的抗菌肽，其特征在于：所述的抗菌肽的氨基酸个数10-15。
3.根据权利要求1所述的的抗菌肽，其特征在于：所述的抗菌肽包括seq id 1：dkdapavwlwikdvnil、seq id 2：ikvvdwdvdvgwlwd、seq id 3：wlwdwpkasdvdkk。
4.一种用于提高提高蚕丝分泌量的中草药抗病毒提取物，其特征在于：原料来源于墨角藻。
5.根据权利要求1所述的的中草药抗病毒提取物，其特征在于：所述的提取物的氨基酸个数10-15。
6.根据权利要求1所述的的中草药抗病毒提取物，其特征在于：所述的提取物的氨基酸包括：seq id 4：awvikdswdkdapkll、seq id 5：ikvgwlvdwdkasdn、seq id 6：wlidnwvdpddkk。
7.一种提高蚕丝分泌量...
【专利技术属性】
技术研发人员：潘友长，李满娟，岳勇，郑传勇，谢晓芳，张冬冬，
申请(专利权)人：北京攀宝生物科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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