【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种针对间皮素的单克隆抗体及应用。
技术介绍
1、在探索单克隆抗体治疗实体瘤的进程中，间皮素(mesothelin,msln)首次发现在卵巢癌中有特异性表达。人间皮素基因位于染色体16p 13.3上，长度约为8kb，由16个长度为7733bp的外显子组成。间皮素的前体蛋白是约69kd的糖基磷脂酰肌醇(gpi)锚定的膜糖蛋白，可以在精氨酸295(arg 295)处被蛋白水解酶水解成两部分，分别为30kd的巨核细胞增强因子(megakaryocyte potentiating factor,mpf)和40kd的具有细胞黏附性的间皮素膜结合片段。此片段也可在肿瘤坏死因子“转化蛋白酶”的作用下从细胞表面脱落。间皮素在正常组织中很少表达，但是在恶性间皮瘤、胰腺癌、卵巢癌和肺癌等多种肿瘤中高表达。间皮素生物学功能目前尚不清楚，间皮素基因敲除小鼠不显示任何可检测的表型，且雌性和雄性都能繁殖出正常的后代，这也表明间皮素是生长发育非必需蛋白。间皮素在肿瘤细胞增殖、粘附及耐药性方面起着重要作用，因此可作为相关肿瘤标志物，进行癌症早期诊断、评估癌症治疗效果、检测原发肿瘤和转移病灶的分布，成为治疗新靶点进行肿瘤免疫靶向治疗(j clin oncol.2016dec 1；34(34):4171–4179.)。
2、近年来以间皮素为靶点的抗肿瘤药物研究如抗体、抗体偶联药物(adc)、免疫毒素、肿瘤疫苗等逐步发展，尤其是adc药物研究进展突飞猛进。目前正处于临床ii期试验阶段的adc药物dmot4039a是由人源化
3、杂交瘤融合技术于1975年由kohler和milstein首创，并于1984年荣获得若贝尔医学生物学奖。由于b细胞不能无限增殖，体外存活时间不超多20天，不能大规模产生单克隆抗体，而肿瘤细胞可以无限增殖存活，因此在peg(聚乙二醇)融合剂作用下使能够产生特异性抗体的b细胞与骨髓瘤细胞发生细胞融合(或电融合)，并经多次阳性克隆筛选获得可以稳定分泌抗特定抗原的单克隆杂交瘤细胞株，所产生的抗体即为针对一种抗原决定簇的单克隆抗体，其具有高特异性、高纯度、均质性好、高亲和力、高效价以及成本低等特点。近年来基于单克隆抗体的肿瘤靶向治疗被认为最有潜力和最受瞩目的肿瘤治疗策略之一。据统计截止2018年，fda共批准24款治疗实体肿瘤的单抗药物，分别靶向了cd抗原(包括cd19，cd20，cd30，cd33，cd38和cd53)、肿瘤细胞表面分子(her2，egfr，pd-l1，gd2，pmsa以及slamf7)、靶向免疫细胞表面抑制性受体pd-1和ctla-4以及抑制肿瘤血管生成。但现阶段可以用于单抗药物研发的靶点非常有限，因此发现新的肿瘤特异性抗原，尤其在肿瘤组织中表达量高且发挥重要作用的抗原并研究制备靶向这些抗原的单克隆抗体，用于扩大单抗在肿瘤靶向治疗领域中的应用具有重要意义。
4、力达霉素(lidamycin，ldm)是高效抗肿瘤抗生素，包括辅基蛋白(ldp)和发色团(ae)两部分。其ldp可以通过基因工程的方法制备，ldp的空间结构可以形成一个疏水口袋，保护其活性的烯二炔发色团(ae)，ldp和ae通过非共价键结合，两者结合具有特异性和牢固性，并可以拆分和进行分子重建。ldm以其独特的分子结构适合作为“弹头”药物。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种针对间皮素的单克隆抗体及应用。
2、本专利技术所提供的抗人间皮素的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为vh的重链可变区和名称为vl的轻链可变区，所述vh和vl均由决定簇互补区和框架区组成；所述vh和所述vl的决定簇互补区均由cdr1、cdr2和cdr3组成；
3、所述vh的cdr1的氨基酸序列如seq id no：5的第31-35位所示；
4、所述vh的cdr2的氨基酸序列如seq id no：5的第50-66位所示；
5、所述vh的cdr3的氨基酸序列如seq id no：5的第99-109位所示；
6、所述vl的cdr1的氨基酸序列如seq id no：7的第24-34位所示；
7、所述vl的cdr2的氨基酸序列如seq id no：7的第50-56位所示；
8、所述vl的cdr3的氨基酸序列如seq id no：7的第89-97位所示。
9、所述cdr的命名系统为kabat系统。
10、所述抗人间皮素的单克隆抗体可为人源化单克隆抗体。所述人源化单克隆抗体是将鼠源单克隆抗体进行人源化改造得到的。
11、具体的，所述抗人间皮素的单克隆抗体，其重链可变区如seq id no：5的第1-120位所示，其轻链可变区如seq id no：7的第1-104位所示。
12、具体的，所述抗人间皮素的单克隆抗体，其重链如seq id no：5所示，其轻链如seqidno：7所示。
13、所述抗人间皮素的单克隆抗体可为鼠源单克隆抗体。
14、鼠源单克隆抗体中，所述vh和所述vl的框架区来源于小鼠。
15、具体的，所述抗人间皮素的单克隆抗体，其重链可变区如seq id no：1的第20-139位所示，其轻链可变区如seq id no：3的第21-127位所示。
16、具体的，所述抗人间皮素的单克隆抗体，其重链可变区如seq id no：1所示，其轻链可变区如seq id no：3所示。
17、本专利技术还保护生物材料，为如下(a)、(b)、(c)、(d)或(e)：
18、(a)编码以上任一所述的单克隆抗体或其抗原结合部分的核酸分子；
19、(b)具有(a)所述核酸分子的表达盒；
20、(c)具有(a)所述核酸分子的重组载体；
21、(d)具有(a)所述核酸分子的重组微生物；
22、(e)具有(a)所述核酸分子的转基因细胞系。
23、编码重链可变区的核酸分子具体可为如下(f1)或(f2)：
24、(f1)seq id no：2的第58-417位所示；
25、(f2)seq id no：2所示。
26、编码轻链可变区的核酸分子具体可为如下(f3)或(f4)：
27、(f3)seq id no：4的第61-381位所示；
28、(f4)seq id no：4所示。
29、编码重链可变区的核酸分子具体可如seq id no：6的第1-360位所示。
30、编码轻链可变区的核酸分子具体可如se本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.抗人间皮素的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区，所述VH和VL均由决定簇互补区和框架区组成；所述VH和所述VL的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；
2.如权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其重链可变区如SEQ ID No：5的第1-120位所示，其轻链可变区如SEQ ID No：7的第1-104位所示。
3.如权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其重链可变区如SEQ ID No：1的第20-139位所示，其轻链可变区如SEQ ID No：3的第21-127位所示。
4.杂交瘤细胞或所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体；
5.生物材料，为如下(a)、(b)、(c)、(d)或(e)：
6.权利要求1至3中任一所述的单克隆抗体或其抗原结合部分或者权利要求4所述杂交瘤细胞或者权利要求4所述单克隆抗体或者权利要求5所述生物材料的应用，为如下(Ⅰ)或(Ⅱ)或(Ⅲ)或(Ⅳ)：
7.一
8.抗体和药物的偶联物；所述抗体为权利要求1至3中任一所述的单克隆抗体或其抗原结合部分或者权利要求4所述单克隆抗体。
9.权利要求8所述偶联物在制备药物中的应用。
10.一种药物，其活性成分包括权利要求8所述偶联物。
...【技术特征摘要】
1.抗人间皮素的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为vh的重链可变区和名称为vl的轻链可变区，所述vh和vl均由决定簇互补区和框架区组成；所述vh和所述vl的决定簇互补区均由cdr1、cdr2和cdr3组成；
2.如权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其重链可变区如seq id no：5的第1-120位所示，其轻链可变区如seq id no：7的第1-104位所示。
3.如权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其重链可变区如seq id no：1的第20-139位所示，其轻链可变区如seq id no：3的第21-127位所示。
4.杂交瘤细胞或所述杂...
【专利技术属性】
技术研发人员：苗庆芳，周丹丹，段爱军，高瑞娟，孙丽平，张兰文，谢梓慧，甄永苏，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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