【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子标记，具体涉及与大豆耐老化相关的qtl、分子标记、引物及应用。
技术介绍
1、种子是植物生长周期最后一部分，种子的质量影响下一代的生长发育，进而关系到农业生产、遗传资源的利用和生态环境恢复等。种子活力是反映种子老化状态最直接的指标，只有种子有生命力，种胚才有生命，在适当的条件下才能发芽。种子活力影响种子出苗，幼苗生长，最终收获量，但在环境和遗传因素的共同影响下，种子成熟后在储藏或休眠阶段种子活力的丧失是不可避免的，种子库中种子活力的丧失对种子储藏、销售、和后续的生产带来负面影响。种子老化是自然界不可避免的现象，也是农业生产中的一个严重问题。大豆作为一种高脂肪、高蛋白种子，与其他作物相比耐贮性差，更易发生劣变。老化会降低大豆的种子活力，从而影响大豆种子的萌发和幼苗生长进程，严重时会导致大豆的产量和品质降低。
2、生物为适应环境变化，会根据环境发生进化，改变dna的序列，这种变化在一定程度上会被遗传给后代，这是分子标记辅助选择的基础。分子标记辅助育种的基本原理是利用与目标基因密切相关或共分离的分子标记，筛选被选择个体的显性基因型，从而得到所需目标，节约育种成本。分子标记辅助育种比传统的育种方法，所需要耗费的时间短，更为精准，利用分子标记对数量性状基因座（quantitative trait locus，qtl）进行定位，是进行标记辅助选择育种的重要手段。目前国内外科研工作者已经报道了一些关于大豆耐老化相关的qtl研究，大部分qtl都是在初级作图群体中得到的，定位区间大。而且群体双亲多为栽培种，在人类长期
3、qtl随机定位是在不同组合的不同遗传背景下发生多样化的重组过程，因此定位的qtl具有杂交组合特异性，然而目前大豆耐老化相关性状的标记区间过大，随着世代和遗传背景的改变可能会丧失，不利于应用。难于进行分子辅助选择。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供了与大豆耐老化相关的qtl、分子标记、引物及应用，
2、与大豆耐老化相关的qtl的分子标记，所述的qtl位于大豆第2号染色体的4069291bp-4189632bp区间，所述分子标记的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、用于所述分子标记的引物，所述引物的序列如seq id no.2-3所示。
4、所述引物在筛选具有耐老化性状的大豆品系中的应用。
5、所述引物在大豆分子育种、培育转基因大豆或大豆种质资源改良中的应用。
6、优选的，所述改良指提高大豆的耐老化性状。
7、一种鉴定大豆耐老化性状的方法，包括以下步骤：
8、提取参照大豆和待鉴定大豆材料基因组dna；
9、利用所述引物对参照大豆和待鉴定大豆材料基因组dna进行pcr扩增；
10、对扩增产物进行电泳分析，鉴定大豆材料扩增产物的电泳带型。
11、如果待鉴定材料电泳带型与参照大豆的电泳带型一致则为大豆耐老化优异材料；
12、所述参照大豆的电泳目标所在的位置在250-300bp之间。
13、优选的，所述参照大豆为吉育432、0902-14、吉林25、吉育309、1130-2、齐农1号、徐豆9号、辽豆30、龙豆1号、海6050、石大豆1号、铁豆47、t308、辽豆20、t171、吉农84、吉育97、克豆57、吉林小粒8号、ck-p、warsawska 1、吉林15、通农15、07t645、晋品42、franklin、长农30中的任一个。
14、优选的，使用ctab法提取大豆叶片基因组dna。
15、优选的，pcr反应体系为模板dna 50 ng/µl 1µl，上游引物 2 mmol/µl 0.5µl，下游引物 2 mmol/µl 0.5µl，buffer 1µl，dntp 2.5 mmol/µl 0.85µl，taq酶 5 u/µl 0.15µl，无菌水6µl，总体系10µl。
16、优选的，pcr反应程序为pcr反应程序为95℃ 5 min，95℃ 30 s，50-60℃ 30 s，72℃ 30 s，72℃ 7 min，4℃。
17、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
18、本专利技术得到的大豆耐老化相关的qtl区间lod值为3.07，对表型的贡献率较高，达到10.89%，而且在该区间开发了1个与大豆耐老化相关的分子标记ssr-02-222，可用于分子标记辅助选择育种以及挖掘相关功能基因，同时可以利用野生资源，拓宽栽培大豆的遗传基础。
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1.与大豆耐老化相关的QTL的分子标记，其特征在于，所述的QTL位于大豆第2号染色体的4069291bp-4189632bp区间，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.用于扩增权利要求1所述分子标记的引物，其特征在于，所述引物的序列如SEQ IDNO.2-3所示。
3.权利要求1所述引物在筛选具有耐老化性状的大豆品系中的应用。
4.权利要求1所述引物在大豆分子育种、培育转基因大豆或大豆种质资源改良中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述改良指提高大豆的耐老化性状。
6.一种鉴定大豆耐老化性状的方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的鉴定大豆耐老化性状的方法，其特征在于，所述参照大豆为吉育432、0902-14、吉林25、吉育309、1130-2、齐农1号、徐豆9号、辽豆30、龙豆1号、海6050、石大豆1号、铁豆47、T308、辽豆20、T171、吉农84、吉育97、克豆57、吉林小粒8号、CK-P、Warsawska 1、吉林15、通农15、07T6
8.根据权利要求6所述的鉴定大豆耐老化性状的方法，其特征在于，使用CTAB法提取大豆叶片基因组DNA。
...【技术特征摘要】
1.与大豆耐老化相关的qtl的分子标记，其特征在于，所述的qtl位于大豆第2号染色体的4069291bp-4189632bp区间，所述分子标记的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.用于扩增权利要求1所述分子标记的引物，其特征在于，所述引物的序列如seq idno.2-3所示。
3.权利要求1所述引物在筛选具有耐老化性状的大豆品系中的应用。
4.权利要求1所述引物在大豆分子育种、培育转基因大豆或大豆种质资源改良中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述改良指提高大豆的耐老化性状。
6.一种鉴定...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢建国，陈庆山，王曙明，范旭红，杨明亮，吕子淼，李广，王明亮，张云峰，郑宇宏，孙星邈，杨振宇，蒋洪蔚，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院中国农业科技东北创新中心，
类型：发明
国别省市：
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