【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及伊贝母提取，具体涉及一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途。
技术介绍
1、伊贝母(fritillariae pallidiflorae bulbus)是百合科植物新疆贝母fritillaria walujewii regel或伊犁贝母fritillaria pallidiflora schrenk的干燥鳞茎，正式记载于2020年版《中国药典》中，主要分布于新疆天山北部的伊犁、塔城、博尔塔拉一带，是新疆的道地名贵药材之一，具有产量高、生物碱含量高及抗病虫害等优点。川贝母作为川产道地药材，是治疗肺部疾病最常用的中药之一，然而由于川贝母野生资源稀缺且价格昂贵，应合理开发利用其他贝母资源，扩大药用资源。
2、目前，伊贝母已实现大规模人工种植，在新疆伊犁莫合尔乡有着大规模的种植基地，与川贝母相比，伊贝母资源蕴藏量丰富，且价格相对低廉。伊贝母中含有生物碱、皂苷、萜类、类黄酮、多糖、香豆素、脂肪酸甘油酯、氨基酸等多种化学成分，其中生物碱是其主要的活性成分。然而伊贝母药材中生物碱的含量极低，2020年版《中国药典》规定，伊贝母的含量测定以西贝母碱苷和西贝母碱为质量控制的指标，总量不得少于0.070％，因此对其进行富集纯化十分重要。
3、现代化研究表明，伊贝母总生物碱具有镇咳、祛痰、抗哮喘、抗炎、抗菌和乙酰胆碱酯酶抑制活性，且等量给药前提下，在止咳和祛痰方面的药效作用优于川贝母总生物碱。本实验室前期研究证实，川贝母总生物碱可延缓肺纤维化疾病进展，但目前伊贝母高纯度总生物碱的制备工艺研究较少，在制备纯度高、得率高
技术实现思路
1、本专利技术意在提供一种以制备高得率、高纯度、成分明确的伊贝母总生物碱的方法，并通过探究此种方法制备组合物延缓肺纤维化和慢性阻塞性肺疾病的药效学及作用机制，为后续抗肺纤维化的新药研发及作用靶点研究提供理论依据。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、本专利技术提供了一种伊贝母总生物碱的制备方法，包括如下步骤：
4、s1、粗提取物a的制备
5、取适量伊贝母干燥鳞茎粉碎，过筛，用体积浓度为60-80％乙醇溶液回流提取，将提取液过滤后减压浓缩至干膏状，得到伊贝母总生物碱粗提物a；
6、s2、离子交换树脂初纯化
7、将伊贝母总生物碱粗提物a采用1-3％hcl溶液溶解，过滤，将滤液过阳离子交换树脂反复上样至流出液明显变浅，静态吸附1-2h；去离子水洗脱至洗脱液molish反应为阴性；再用体积浓度为50-70％，含nacl的乙醇溶液洗脱至洗脱液生物碱沉淀反应为阴性收集洗脱液，减压浓缩至干，得到伊贝母总生物碱粗提物b；
8、s3、除盐
9、将伊贝母总生物碱粗提物b采用无水乙醇热回流提取，每次提取前溶液中需加入饱和naoh溶液调节ph＝8-9，将提取液过滤后减压浓缩至无醇味，得到伊贝母总生物碱粗提物c；
10、s4、大孔树脂纯化
11、将伊贝母总生物碱粗提物c加入1-3％hcl完全溶解，采用饱和naoh溶液调节溶液至ph＝8-9，后过大孔树脂反复上样至流出液明显变浅，静态吸附1-2h；首先用去离子水洗脱至洗脱液molish反应为阴性；再用不同体积浓度的第一乙醇溶液、第二乙醇溶液和第三乙醇溶液进行梯度洗脱，第一乙醇溶液洗脱至洗脱液molish反应为阴性，第二乙醇溶液和第三乙醇溶液洗脱至洗脱液生物碱沉淀反应为阴性；合并第二乙醇溶液和第三乙醇溶液的洗脱液，减压浓缩、干燥即得伊贝母总生物碱提取物。
12、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s1中，乙醇的用量为伊贝母重量的8-12倍，热回流提取2-3次，每次提取3-4h。
13、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s2中，nacl的体积浓度为4-6％。
14、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s2中和步骤s4，洗脱流速均为2-4bv/h。
15、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s2中，阳离子交换树脂为001x4型阳离子交换树脂。
16、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s3中，乙醇的用量为伊贝母总生物碱粗提物a重量的3-5倍，热回流提取2-3次，每次提取1-2h。
17、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s4中，第一乙醇溶液、第二乙醇溶液和第三乙醇溶液的体积浓度分别为：20-30％、80-90％和99.5％-99.9％。
18、根据本专利技术的一些实施例，所述步骤s4中，大孔吸附树脂为hpd722型大孔吸附树脂。
19、本专利技术还提供了一种伊贝母总生物碱的制备方法制备得到的伊贝母总生物碱提取物用于作为制备治疗慢性呼吸系统疾病的药物的用途。
20、优选的地，所述慢性呼吸系统疾病包括：慢性阻塞性肺炎、慢性咽炎、肺纤维化。
21、根据本专利技术的伊贝母总生物碱提取物的制备方法及用途，至少具有以下优点：
22、本专利技术用离子交换树脂与大孔吸附树脂联用纯化伊贝母中的总生物碱成分，制备得到的总生物碱纯度显著高于单一树脂纯化；且通过采用高浓度乙醇热回流脱盐后接大孔吸附树脂水洗脱脱盐，操作方法简便，解决了其余制备工艺单独乙醇回流、渗漉或超声脱盐不彻底的问题。
23、本专利技术制备的总生物碱中含有针对慢性阻塞性肺部疾病、炎症和氧化应激具有较好疗效的生物碱成分(西贝母碱)，且该成分在总生物碱中的纯度最高，能为慢性呼吸系统的治疗提供新的解决方案。
24、本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
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1.一种伊贝母总生物碱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S1中，乙醇的用量为伊贝母重量的8-12倍，热回流提取2-3次，每次提取3-4h。
3.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S2中，NaCl的体积浓度为4-6％。
4.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S2中和步骤S4，洗脱流速均为2-4BV/h。
5.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S2中，阳离子交换树脂为001x4型阳离子交换树脂。
6.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S3中，乙醇的用量为伊贝母总生物碱粗提物A重量的3-5倍，热回流提取2-3次，每次提取1-2h。
7.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S4中，第一乙醇溶液、第二乙醇溶液和第三乙醇溶液的体积浓
8.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤S4中，大孔吸附树脂为HPD722型大孔吸附树脂。
9.如权利要求1-8任一项所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法制备得到的伊贝母总生物碱提取物用于作为制备治疗慢性呼吸系统疾病的药物的用途。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述慢性呼吸系统疾病包括：慢性阻塞性肺炎、慢性咽炎、肺纤维化。
...【技术特征摘要】
1.一种伊贝母总生物碱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤s1中，乙醇的用量为伊贝母重量的8-12倍，热回流提取2-3次，每次提取3-4h。
3.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤s2中，nacl的体积浓度为4-6％。
4.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤s2中和步骤s4，洗脱流速均为2-4bv/h。
5.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在于，所述步骤s2中，阳离子交换树脂为001x4型阳离子交换树脂。
6.根据权利要求1所述的一种伊贝母总生物碱的制备方法及用途，其特征在...
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