【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种磷酸乙醇胺甲基转移酶基因及制备方法和应用，属于基因工程。
技术介绍
1、植物磷酸乙醇胺甲基转移酶通过连续三次甲基化生成磷酸胆碱，磷酸胆碱在磷酸胆碱磷酸酶的水解作用下生成胆碱和磷脂酸。而胆碱是小分子有机渗透调节物质甘氨酸甜菜碱合成底物。甜菜碱是一种溶性生物碱，可以增强植物抗旱、耐盐等抗逆性。研究发现高等植物中胆碱的合成速度受到严格限制，而磷酸乙醇胺甲基转移酶在甜菜碱的底物胆碱合成中的关键限速酶。此外，磷酸脂不仅是植物细胞膜的组成部分，而且还是脂质代谢以及对生物和非生物胁迫等过程的脂质第二信使，在植物生长发育期间及逆境胁迫条件下快速积累，通过结合靶蛋白并调节其活性和亚细胞定位，在各种信号传导途径中发挥重要作用。因此，磷酸乙醇胺甲基转移酶在植物抗逆胁迫调控中具有重要作用。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种磷酸乙醇胺甲基转移酶基因及制备方法和应用，具体涉及木碱蓬磷酸乙醇胺甲基转移酶基因sdnmt及其在提高植物耐盐性中的应用。本专利技术中基因sdnmt的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2、本专利技术克隆获得了sdnmt基因并构建植物过表达载体，同时发现木碱蓬中磷酸乙醇胺甲基转移酶基因sdnmt在800mmo/lnacl胁迫下的表达显著升高，本专利技术将构建的植物过表达载体通过农杆菌介导法导入加工番茄基因组中，达到增强转基因植株耐盐能力的效果。所述植物过表达载体中插入的基因片段仅为磷酸乙醇胺甲基转移酶基因sdnmt；优选的，所述
3、进一步的，扩增所述基因sdnmt的引物序列分别为seq id no.2和seq id no.3。
4、进一步的，所述植物过表达载体的构建方法为：通过kpn ⅰ和bamh ⅰ酶将基因sdnmt构建至植物表达载体pcambia2300上。
5、本专利技术还包括，所述转移酶基因sdnmt及构建的植物过表达载体在植物耐盐中的应用，进一步在创建耐盐新品种中的应用。
6、本专利技术相较于现有技术的有益效果如下：
7、本专利技术木碱蓬磷酸乙醇胺甲基转移酶基因sdnmt及过表达载体可以明显提高植物的耐盐性，尤其是通过对转基因植株的sod活性、pod活性及cat活性的测定分析以及对转基因加工番茄植株表型和生物量的检测，结果表明：导入植物过表达载体的加工番茄植株，显著增强了其耐盐能力。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1. 一种磷酸乙醇胺甲基转移酶基因，其特征在于，所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2. 扩增如权利要求1所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的引物序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。
3.一种含有如权利要求1所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的植物过表达载体。
4.根据权利要求3所述的植物过表达载体，其特征在于，所述植物过表达载体的空载体为pCAMBI2300T。
5.如权利要求3或4所述植物过表达载体的构建方法，其特征在于，所述构建方法如下：
6.如权利要求1所述转移酶基因SdNMT在植物耐盐中的应用。
7.如权利要求1所述转移酶基因SdNMT在创建耐盐新品种中的应用。
8.如权利要求3或4所述植物过表达载体在植物耐盐中的应用。
9.如权利要求3或4所述植物过表达载体在创建耐盐新品种中的应用。
【技术特征摘要】
1. 一种磷酸乙醇胺甲基转移酶基因，其特征在于，所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2. 扩增如权利要求1所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的引物序列分别为seq id no.2和seq id no.3。
3.一种含有如权利要求1所述磷酸乙醇胺甲基转移酶基因的植物过表达载体。
4.根据权利要求3所述的植物过表达载体，其特征在于，所述植物过表达载体的空载体为...
【专利技术属性】
技术研发人员：马盼盼，孙国清，王亮，田又升，宋方圆，王志军，朱金成，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。