传染病治疗剂制造技术

本发明专利技术的课题在于，提供一种细菌的耐药性较少，并具有与抗生素不同特征的传染病治疗剂，该传染病治疗剂通过组合投入不具有细胞毒性的１５Ｋ颗粒溶素，从而比单独使用１５Ｋ颗粒溶素具有更强的杀菌效果。本发明专利技术通过提供一种副作用较少，且细菌难以获得耐药性的有效的传染病治疗剂，从而解决了所述课题。该传染病治疗剂的有效成分包含：１５Ｋ颗粒溶素和１５Ｋ颗粒溶素的体内表达载体的组合；１５Ｋ颗粒溶素和ＩＬ－６、ＩＬ－２３或ＩＬ－２７的组合；１５Ｋ颗粒溶素的体内表达载体和ＩＬ－６、ＩＬ－２３或ＩＬ－２７的组合；１５Ｋ颗粒溶素的体内表达载体以及ＨＳＰ６５ＤＮＡ和ＩＬ－１２ＤＮＡ体内表达载体的组合。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是一种涉及用于治疗结核等传染病的传染病治疗剂的专利技术。
技术介绍
在医疗中，传染病治疗剂的存在是不可缺少的。现在，许多抗生素和合成抗菌剂等 传染病治疗剂被提供于医疗处理中。但是，现在主要被作为传染病治疗剂提供的抗菌剂，事实上伴随着耐药菌的出现 这一不可避免的问题。即，重复着由于出现新的抗菌剂而导致产生新的耐药菌的这种状态。例如，在单一的传染病中占死亡率第一位的结核最近有增加的趋势，已成为世界 性的问题。并且，还证实了对大部分的抗生素具有耐药性的耐药菌的存在，并且该问题日益 明显。现在已经明确了，被称为颗粒溶素且出现在NK细胞和CTL中的分子，对于结核杆 菌等细菌具有直接的杀伤能力[Stenger, S. et al.，Science 282,121-125(1998)]。颗粒溶素被制造成15K后，在细胞毒性颗粒内被加工成9K。15K和9K的颗粒溶素 分别进入巨噬细胞，从而杀伤被巨噬细胞吞入的结核杆菌等细菌。但是，为了使9K颗粒溶 素进入巨噬细胞，而需要作为相同的细胞毒性颗粒内分子的穿孔蛋白。这是由于为了使9K 颗粒溶素进入细胞内需要通过穿孔蛋白对靶细胞打孔。因此，9K颗粒溶素具有细胞毒性。 可是，15K颗粒溶素不需要对靶细胞打孔的穿孔蛋白，就进入巨噬细胞内，从而杀伤被巨噬 细胞吞入的结核杆菌等细菌。因此，15K颗粒溶素没有细胞毒性。本专利技术人制成了 9K颗粒溶素转基因小鼠和15K颗粒溶素转基因小鼠，对各自的小 鼠和野生型对照小鼠，从尾部静脉中静脉内投入了 5X IO5CFU的H37Rv人型结核杆菌，四周 后分别测量了在肺脏中的结核杆菌数。其结果证实，在15K颗粒溶素转基因小鼠的肺脏中， 具有统计学上的显著性差异(t检验为ρ < 0. 05)，15K颗粒溶素转基因小鼠的肺脏比9K颗 粒溶素转基因小鼠的肺脏中的结核杆菌数更少。根据该事实，本专利技术人首次发现，15K颗粒 溶素比9K颗粒溶素在生体内的抗结核杀伤效果、抗结核抑制效果更加强大，而且，该事实 提示了 9K颗粒溶素在生体内的抗结核抑制效果非常弱。根据上述的结果，本专利技术人已经申请了，将不具有细胞毒性且具有比9K颗粒溶素 更强大的结核抑制效果的15K颗粒溶素作为有效成分的传染病治疗剂；以及作为有效成 分，包含插入有对15K颗粒溶素进行编码的基因且使15K颗粒溶素在体内表达的载体的传 染病治疗剂，并获得了专利权(专利文献1)。但是，为了制成更强大的传染病治疗剂，而需 要一种通过组合投入15K颗粒溶素，与单独投入15K颗粒溶素相比，对被巨噬细胞吞入的结 核杆菌等细菌引起的传染病更加有效的传染病治疗剂。现有技术文献专利文献1 日本专利第4149713号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的课题在于，提供一种细菌的耐药性较少，并具有与抗生素不同特征的传 染病治疗剂，通过将不具有细胞毒性的15K颗粒溶素组合投入，从而比单独使用15K颗粒溶 素具有更强大的对被巨噬细胞吞入的结核杆菌等细菌的杀伤效果。用于解决课题的手段第一项所涉及的专利技术为一种传染病治疗剂，其有效成分包含15K颗粒溶素；以及 载体，该载体中插入有对15K颗粒溶素进行编码的基因，从而使15K颗粒溶素在体内表达。 第二项所涉及的专利技术为一种传染病治疗剂，其有效成分包含15K颗粒溶素；以及以下的物 质(a)至(c)中的任意一个。(a)白细胞介素6(b)白细胞介素23(c)白细胞介素27第三 项所涉及的专利技术为一种传染病治疗剂，其有效成分包含载体，其中插入有对15K颗粒溶素 进行编码的基因，从而使15K颗粒溶素在体内表达；以及以下的物质(a)至(c)中的任意一 个。(a)白细胞介素6(b)白细胞介素23(c)白细胞介素27第四项所涉及的专利技术为一种传 染病治疗剂，其有效成分包含以下的(a)、(b)。(a)插入有对15K颗粒溶素进行编码的基 因，从而使15K颗粒溶素在体内表达的载体；(b)在仙台病毒的被膜上，插入对人型结核杆 菌H37Rv的65KDa热休克蛋白进行编码的基因以及对白细胞介素12进行编码的基因，从而 使65KDa的热休克蛋白和白细胞介素12在体内表达的载体。第五项所涉及的专利技术是一种 根据第一项或第二项所述的传染病治疗剂，其特征在于，所述15K颗粒溶素是重组蛋白质。 第六项所涉及的专利技术是一种根据第一项至第五项中任意一项所述的传染病治疗剂，传染病 的致病菌是结核杆菌。专利技术的效果根据第一项所述的专利技术，传染病治疗剂的有效成分包含15K颗粒溶素以及载体， 该载体中插入有对15K颗粒溶素进行编码的基因，从而使15K颗粒溶素在体内表达(以下 称为15K颗粒溶素的体内表达载体)，与单独投入15K颗粒溶素或者单独投入15K颗粒溶素 的体内表达载体相比，通过投入该传染病治疗剂，能够获得不显示细胞毒性、且具有更强的 杀伤被巨噬细胞吞入的结核杆菌等细菌的效果。根据第二项所述的专利技术，传染病治疗剂的有效成分包含15K颗粒溶素；以及白细 胞介素6(以下称为IL-6)、白细胞介素23(以下称为IL-23)、白细胞介素27(以下称为 IL-27)中的任意一个，与单独投入15K颗粒溶素或者单独投入IL-6、或IL-23、或IL-27相 比，通过投入该传染病治疗剂，能够获得不显示细胞毒性、且具有更强的杀伤被巨噬细胞吞 入的结核杆菌等细菌的效果。根据第三项所述的专利技术，传染病治疗剂的有效成分包含15K颗粒溶素的体内表 达载体；以及IL-6、IL-23、IL-27中的任意一个，与单独投入15K颗粒溶素的体内表达载体 或者单独投入IL-6、或IL-23、或IL-27相比，通过投入该传染病治疗剂，能够获得更强的杀 伤被巨噬细胞吞入的结核杆菌等细菌的效果。根据第四项所述的专利技术，传染病治疗剂的有效成分包含15K颗粒溶素的体内表 达载体；以及本专利技术人开发出的对结核杆菌的体内表达载体，其不仅在小鼠类中，而且在作为最接近于人的结核感染模型的弥猴类中，也表现出较强的结核治疗效果的HVJ-被膜 HSP65DNA和IL-12的DNA的体内表达载体(以下称为HSP65DNA和IL-12DNA体内表达载 体)。与单独投入15K颗粒溶素的体内表达载体、或者单独投入HSP65DNA和IL-12DNA体 内表达载体相比，通过投入该传染病治疗剂，能够获得更强的杀伤被巨噬细胞吞入的结核 杆菌等细菌的效果。而且，众所周知，HSP65DNA和IL-12DNA体内表达载体，是在仙台病毒 (HVJ)的被膜上，插入人型结核杆菌H37Rv的65KDa热休克蛋白的DNA(HSP65DNA)和IL-12 的DNA的体内表达载体，并对于结核杆菌具有较强的治疗效果(Okada et. al,Jpn. J. Clin. Immunol. ,31 (5) 356 368 (2008))。根据第五项所述的专利技术，能够稳定地大量供给15K颗粒溶素蛋白质。根据第六项所述的专利技术，能够提供对结核杆菌有效的传染病治疗剂。根据本专利技术，通过15K颗粒溶素和15K颗粒溶素的体内表达载体的组合；15K颗粒 溶素和IL-6、或IL-23、或IL-27的组合；15K颗粒溶素的体内表达载体和IL-6、或IL-23、 或IL-27的组合；以及15K颗粒溶素的体内表达载体和HSP65DNA和IL-12DNA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种传染病治疗剂，其有效成分包含：１５Ｋ颗粒溶素；以及载体，该载体中插入有对１５Ｋ颗粒溶素进行编码的基因，从而使１５Ｋ颗粒溶素在体内表达。

【技术特征摘要】
US 2009-4-24 12/386,974一种传染病治疗剂，其有效成分包含15K颗粒溶素；以及载体，该载体中插入有对15K颗粒溶素进行编码的基因，从而使15K颗粒溶素在体内表达。2.一种传染病治疗剂，其有效成分包含15K颗粒溶素；以及以下的物质(a)至(c)中 的任意一个，(a)白细胞介素6、(b)白细胞介素23、(c)白细胞介素27。3.一种传染病治疗剂，其有效成分包含载体，该载体中插入有对15K颗粒溶素进行编 码的基因，从而使15K颗粒溶素在体内表达；以及以下的物质(a)至(c)中的任意一个，(a)白细胞介素6、(b)白细胞介素23、(c)白细胞介素27。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：冈田全司，高森靖，小川一行，永田钦也，
申请(专利权)人：独立机构近畿中央胸部疾患中心，冈田全司，株式会社AZ生物器材，高森靖，
类型：发明
国别省市：JP[日本]