【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于油田微生物，涉及一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种及其应用，具体涉及一种黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株、包含其的培养物、包含其的菌剂及其在微生物采油、石油污染治理修复中的应用。
技术介绍
1、石油是工业社会的重要能源，在经济和社会的发展中占有举足轻重的地位。微生物驱提高石油采收率技术(microbial enhanced oil recovery,meor)是利用微生物在油藏中的代谢作用及其代谢产物，对原油/岩石/水界面性质的作用，改善原油的流动性，增加低渗透带的渗透率，提高采收率的一项高新技术。微生物采油技术具有成本低、不污染环境和油藏适应范围广等优点，具有广阔的应用前景。
2、微生物降黏机理，一方面对原油进行降解，使大分子降解为小分子；另一方面通过产生酸、气体、生物表面活性剂、生物聚合物及有机溶剂等，改善原油性质，提高原油的采收率。微生物具有降解长链烷烃和原油重质组分的功能，有利于石油黏度的降低。在石油降解过程中，微生物通常会产生表面活性物质“溶解”原油，以增强它们的微生物吸附性和生物可利用性。生物表面活性物质具备特有的环保性、强生物降解能力和在极端环境条件(如极端温度、ph和盐度)的适应性，以促进原油的乳化。通过降解降黏和乳化降黏，进而实现提高原油采收率。代谢产物中的气体有两方面的作用：一是溶于原油降低黏度，二是增加油藏中的压力，提高开发效率。代谢产物中的有机酸、醇等有机溶剂，可以改变岩石的渗流性质，有利于驱油。
3、但因受限于油藏的极端环境(如温度、酸
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种及其应用，具体提供一种黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株、包含其的培养物、包含其的菌剂及其在微生物采油、石油污染的治理修复中的应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种，所述具有降解和乳化原油功能的黄杆菌命名为黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株，保藏编号为cgmcc no.24543，保藏日期为2022年3月18日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
4、本专利技术从大庆油田南二东区块的原油采出液中分离获得并保藏了一株具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种，将其命名为黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株。该菌株具有降解和乳化原油的能力，可以降低油/水界面张力，将该菌株接种至以原油为唯一碳源的无机盐培养基中，该菌株可以分解原油并利用原油中的有机物进行生长、繁殖和代谢，可以应用于微生物采油、石油污染的治理修复。同时该菌株能够耐受碱性环境，可以应用于盐碱地石油污染环境的治理修复。
5、本专利技术所涉及的黄杆菌的筛选步骤如下：
6、将大庆油田南二东区块的原油采出液使用质量浓度为0.9％的生理盐水分别进行10倍、100倍和1000倍稀释，取100μl涂布于lb固体培养基，30℃培养3天后，挑取单菌落，在新的lb固体培养基上采用三区划线法进行纯化培养。30℃培养3天后，挑取不同形态的单菌落到新的lb固体培养基上采用三区划线法再次进行纯化培养，培养温度30℃，培养3天后，挑取单菌落至lb液体培养基中进行扩大培养，在30℃、150rpm的条件下，培养28h，再使用质量浓度为15％的甘油进行保藏。
7、(2)针对保藏的菌株进行16s rrna分子生物学鉴定。
8、第二方面，本专利技术提供一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌培养物，所述培养物采用包括如下步骤的制备方法制得：将第一方面所述的黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株接种于培养基中，在30-37℃下(例如30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃等)培养12-20h(例如12h、13h、14h、15h、16h、17h、18h、19h、20h等)，即得。
9、上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
10、优选地，所述培养基的配方组成包括：胰蛋白胨、酵母提取物、nacl。
11、具体的，所述培养基(液体)的配方组成包括：胰蛋白胨10g/l、酵母提取物5g/l、nacl 10g/l。
12、第三方面，本专利技术提供一种具有降解和乳化原油功能的菌剂，所述具有降解和乳化原油功能的菌剂中的菌株包括第一方面所述的黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株。
13、本专利技术所涉及的黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株可以被单独地应用于相关产品中，也可以与其他菌株联合应用于相关产品中。
14、优选地，所述具有降解和乳化原油功能的菌剂中，所述黄杆菌flavobacteriumsp.wl-1菌株的活菌数不低于1×108cfu/ml或1.5×108cfu/g，例如1×108cfu/ml、2×108cfu/ml、3×108cfu/ml、5×108cfu/ml、8×108cfu/ml、1×109cfu/ml、1×1010cfu/ml、1.5×108cfu/g、3×108cfu/g、5×108cfu/g、8×108cfu/g、1×109cfu/g、1×1010cfu/g等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
15、优选地，所述具有降解和乳化原油功能的菌剂，还包括保护剂和/或添加剂。
16、优选地，所述保护剂包括甘油和/或黄原胶。
17、优选地，所述添加剂包括β-环糊精、壳寡糖或果胶中的任意一种或至少两种的组合。
18、进一步优选地，所述菌剂中的菌株还包括迪茨氏菌dietzia cercidiphylli orf-0003菌株，所述迪茨氏菌dietzia cercidiphylli orf-0003菌株的保藏编号为cgmccno.16105，保藏日期为2018年07月13日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
19、本专利技术创造性地发现上述黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株能够与迪茨氏菌dietzia cercidiphylli orf-0003菌株进行复配使用，其乳化原油的能力显著优异于单一菌剂或者其他复配方式，说明黄杆菌wl-1菌株与迪茨氏菌orf-0003菌株在乳化原油方面具有协同增效作用。
20、优选地，所述黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株与迪茨氏菌dietziacercidiphylli orf-0003菌株的活菌数之比为(1-2):1，例如1:1、2:1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种，其特征在于，所述具有降解和乳化原油功能的黄杆菌命名为黄杆菌Flavobacterium sp.WL-1菌株，保藏编号为CGMCCNo.24543，保藏日期为2022年3月18日。
2.一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌培养物，其特征在于，所述培养物采用包括如下步骤的制备方法制得：将权利要求1中所述的黄杆菌Flavobacterium sp.WL-1菌株接种于培养基中，在30-37℃下培养12-20h，即得。
3.一种具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，所述具有降解和乳化原油功能的菌剂中的菌株包括权利要求1中所述的黄杆菌Flavobacterium sp.WL-1菌株。
4.根据权利要求3所述的具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，在所述菌剂中，所述黄杆菌Flavobacterium sp.WL-1菌株的活菌数不低于1×108CFU/mL或1.5×108CFU/g。
5.根据权利要求3或4所述的具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，所述菌剂还包括保护剂和/或添加剂。
...【技术特征摘要】
1.一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌属新物种，其特征在于，所述具有降解和乳化原油功能的黄杆菌命名为黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株，保藏编号为cgmccno.24543，保藏日期为2022年3月18日。
2.一种具有降解和乳化原油功能的黄杆菌培养物，其特征在于，所述培养物采用包括如下步骤的制备方法制得：将权利要求1中所述的黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株接种于培养基中，在30-37℃下培养12-20h，即得。
3.一种具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，所述具有降解和乳化原油功能的菌剂中的菌株包括权利要求1中所述的黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株。
4.根据权利要求3所述的具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，在所述菌剂中，所述黄杆菌flavobacterium sp.wl-1菌株的活菌数不低于1×108cfu/ml或1.5×108cfu/g。
5.根据权利要求3或4所述的具有降解和乳化原油功能的菌剂，其特征在于，所述菌剂还包括保护剂和/或添加剂。
6.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：王璐，宋文枫，吕伟峰，朱友益，张群，田茂章，陈兴隆，徐金波，黄佳，崔庆锋，周新宇，
申请(专利权)人：中国石油天然气集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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