【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，尤其涉及一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖及其制备方法与应用。
技术介绍
1、动脉粥样硬化是一种严重的心血管疾病，发病率和死亡率都很高，其特征是局部动脉壁炎症和脂质沉积。
2、目前治疗动脉粥样硬化的主要手段是控制高血压和高脂血症。临床常用的瑞舒伐他汀或阿托伐他汀进行治疗，虽然能一定程度上减少患者的斑块，但多达三分之一的患者仍有动脉粥样硬化进展。此外，使用他汀类药物伴随着肝脏损伤、消化不良、肌肉疼痛等不良反应。目前尚无有效且安全的治疗动脉粥样硬化的方法。在传统中医中，松杉灵芝经常被用来改善健康、增加活力和延长寿命。由于松杉灵芝多糖，安全无害，毒副作用小，越来越多的科研人员开始致力于利用灵芝多糖开发安全、经济、有效的天然药物。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖及其制备方法与应用，以松杉灵芝子实体为原料，通过提取、分离纯化得到一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，包括如下步骤：
4、(1)松杉灵芝粗多糖的制备：取松杉灵芝子实体干燥、粉碎过筛、浸泡后恒温水浴提取、离心，得到松杉灵芝粗多糖提取液，将提取液旋转蒸发浓缩后，醇沉后收集沉淀，sevag法去蛋白，透析去除有机试剂，冻干得松杉灵芝粗多糖；
5、(2)松杉灵芝
6、(3)初步纯化的松杉灵芝酸性纯化多糖的制备：将步骤(2)得到的松杉灵芝酸性多糖用去离子水溶解，通过hiprep 26/60sephacryl s-400hr色谱柱纯化，以氯化钠溶液洗脱，分管收集，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，收集主峰，旋转蒸发浓缩、透析过夜、冻干得到初步纯化的松杉灵芝酸性纯化多糖；
7、(4)松杉灵芝酸性纯化多糖的制备：将步骤(3)得到的初步纯化的松杉灵芝酸性纯化多糖用去离子水溶解，通过hiload 16/600superdex 200pg制备级色谱柱进行进一步纯化，以氯化钠溶液洗脱，分管收集，采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，收集主峰，旋转蒸发浓缩、透析过夜，冻干得到松杉灵芝酸性纯化多糖。
8、进一步的，步骤(1)所述干燥温度为55-65℃；所述过筛时筛网的目数为100-200目；所述浸泡的料液比为1:40-1:60，在4℃冰箱浸泡过夜；所述恒温水浴提取的温度为70-90℃，时间为5-6h；所述旋转蒸发浓缩至1/15体积；所述沉淀为：4℃环境下用75-80％(v/v)乙醇沉淀过夜；收集沉淀利用sevag法去蛋白，用3500da的透析袋去除有机试剂后，冻干收集粗多糖。
9、进一步的，步骤(2)所述松杉灵芝粗多糖浓度为40mg/ml，加入到二乙胺基乙基纤维素凝胶柱中；氯化钠梯度洗脱浓度为0.1、0.3和0.5mol/l，流速为1ml/min。
10、进一步的，步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)所述旋转蒸发浓缩至1/6体积；所述透析的方法为：将浓缩后的溶液装于3500da透析袋中，温度为4℃。
11、进一步的，步骤(3)、步骤(4)所述松杉灵芝酸性多糖浓度为5mg/ml；氯化钠溶液的浓度均为0.15mol/l。
12、本专利技术还提供了上述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法制备的缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖。
13、本专利技术还提供了上述松杉灵芝酸性纯化多糖在缓解动脉粥样硬化药物中的应用。
14、本专利技术还提供了一种以上述松杉灵芝酸性纯化多糖为活性成分的药物制剂，还包括一种或多种药学上可接受的载体物质和/或辅剂。
15、本专利技术提供的松杉灵芝酸性纯化多糖能有效降低小鼠血清中tc、tg、ldl-c水平，提高hdl-c水平，使小鼠脂肪组织脂滴数量和体积明显下降，改善高脂饮食造成的脂肪组织脂质积累，减少脂质浸润，具有更好的降血脂效果。还有效地减小了动脉粥样硬化中脂质核心和巨噬细胞的数量，降低了厚壁菌门的丰度，逆转了高脂饮食引起的乳杆菌(lactobacillus)丰度下降现象，同时显著增加有益菌嗜黏蛋白阿克曼菌(akkermansia)丰度。
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1.一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述干燥温度为55-65℃；所述过筛时筛网的目数为100-200目；所述浸泡的料液比为1:40-1:60，在4℃冰箱浸泡过夜；所述恒温水浴提取的温度为70-90℃，时间为5-6h；所述旋转蒸发浓缩至1/15体积；所述醇沉为：4℃环境下用75-80％(v/v)乙醇沉淀过夜；收集沉淀利用Sevag法去蛋白，用3500Da的透析袋去除有机试剂后，冻干收集粗多糖。
3.根据权利要求2所述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述松杉灵芝粗多糖浓度为40mg/mL，加入到二乙胺基乙基纤维素凝胶柱中；氯化钠梯度洗脱浓度为0.1、0.3和0.5mol/L，流速为1mL/min。
4.根据权利要求3所述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)所述旋转蒸发浓缩至1/6体积；所述透析的方法为：将浓缩后的溶液装于3500Da透析袋中，温度为4℃。
...【技术特征摘要】
1.一种缓解动脉粥样硬化的松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述干燥温度为55-65℃；所述过筛时筛网的目数为100-200目；所述浸泡的料液比为1:40-1:60，在4℃冰箱浸泡过夜；所述恒温水浴提取的温度为70-90℃，时间为5-6h；所述旋转蒸发浓缩至1/15体积；所述醇沉为：4℃环境下用75-80％(v/v)乙醇沉淀过夜；收集沉淀利用sevag法去蛋白，用3500da的透析袋去除有机试剂后，冻干收集粗多糖。
3.根据权利要求2所述松杉灵芝酸性纯化多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述松杉灵芝粗多糖浓度为40mg/ml，加入到二乙胺基乙基纤维素凝胶柱中；氯化钠梯度洗脱浓度为0.1、0.3和0.5mol/l，流速为...
【专利技术属性】
技术研发人员：李兰洲，张鑫，王迪，王春月，张永锋，刘洋，李玉，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：
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