【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药残检测领域，具体涉及一种uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法。
技术介绍
1、植物生长调节剂（plant growth regulators，pgrs）是人工合成或提取的与植物激素具有相似作用的物质，可用于调节农作物的生长发育和改善作物品质。与传统农业技术相比，植物生长调节剂作用面广、应用领域多，在低浓度下就能调节植物生长、发育和代谢过程。根据“中国农药信息网”截至2023 年 5 月登记的数据显示，我国登记的植物生长调节剂类农药品种共有 1474种，涉及的植物生长调节剂有60 多种。另外，不少国标中归类为除草剂的农药，如2，4-d，2，4-d钠盐等，在实际中一直也经常作为植物生长调节剂使用。
2、随着中药材需求量的不断增加，中药材种植品种逐步增加、种植面积不断扩大，为了增加产量，农药施用频繁。植物生长调节剂也被广泛应用于中药材的栽培与种植，对于调控中药材生长发育、提高产量发挥了一定的作用，如麦冬、三七、当归、党参、地黄、黄芪等根茎类药材栽培中普遍使用pgr或含pgr的农肥。但与其他合成农药一样，盲目地使用会造成环境中的高残留，引起人畜的急、慢性中毒和疾病的发生，导致药材的有效成分发生变化，给人类健康造成了安全隐患。我国已经制定了食品中部分植物生长调节剂的最大残留限量标准，但是涉及药材的很少，相关文献报道也不多。目前标准及文献中关于生长调节剂的测定大多是针对水果、蔬菜等食品的检测，有关植物生长调节剂残留的检测方法主要有酶联免疫法(elisa)、气相色谱法(gc)
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于针对现有技术的不足提供一种uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法。该方法操作简单、测定结果准确、快速、且具有极高的灵敏度和专属性，采用该方法可同时筛查与测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂的残留量。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下的技术方案：
3、一种uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，包括以下步骤：
4、（1）对照品溶液的制备
5、对照品储备液制备：分别称取72种植物生长调节剂对照品适量，加乙腈制成每1ml含100μg的溶液，即得；
6、混合对照品溶液的制备：精密量取对照品储备液适量，加乙腈制成每l ml含1μg的混合溶液，即得；
7、（2）供试品溶液的制备：取供试品，粉碎成粉末，取3g，精密称定，置100 ml聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15ml，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15 ml，涡旋使混匀，置振荡器上涡旋混合（1500次•min-1）5分钟；于冰浴中冷却30分钟，再加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末7.5g，立即摇散，于冰浴中冷却30分钟，再转移至均质器上均质2分钟（10000转•min-1），离心5分钟，精密吸取上清液5ml，置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4 ml，加乙腈定容至1 ml，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
8、（3）基质混合对照品溶液的制备：分别取空白基质样品3g，一式7份，同供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4 ml”，分别加入混合对照品溶液5μl、10μl、20μl、50μl、100μl、200μl、400μl、600μl，加乙腈定容至1 ml，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得系列基质混合对照溶液（浓度分别约5、10、20、50、100、200、400 、600ng·ml-1），作为标准曲线测定溶液；
9、（4）测定：精密吸取供试品溶液和基质混合对照品溶液各5μl，注入液相色谱-串联质谱仪，按外标标准曲线法计算供试品中各植物生长调节剂组分的含量；
10、其中uplc色谱条件：色谱柱：agilent advancebio c18(3.0×150mm，2.7μm)，柱温为 35℃，正模式：以0.1%甲酸，含10mm甲酸铵，为流动相a，以0.1%甲酸的甲醇，含10mm甲酸铵，为流动相b；流速为0.4ml/min，进行梯度洗脱，进样体积：5μl；
11、质谱条件：电喷雾电离(esi)离子源，检测方式：多反应（mrm）监测，电喷雾电压：4500 v，雾化气压力，344.8 kpa；辅助气压力：344.8 kpa，气帘气压力137.9kpa；碰撞气压力：48.3 kpa；离子源温度：550℃；扫描时间：10 ms；碰撞室入口电压：10v。
12、所述72种植物生长调节剂为：1,3-二苯基脲、萘乙酸乙酯、萘乙酸甲酯、萘乙酰胺、2,4-滴酸乙酯、3-吲哚丁酸、环丙嘧啶醇、莠去津、苯并咪唑、芸苔素内酯、仲丁灵、香芹酮、异噁草松、调呋酸、烯唑醇、果实增糖剂、吲熟酯、氟节胺、呋嘧醇、增产胺、氟铃脲、抗倒胺、3-吲哚乙酸、稻瘟灵、6-呋喃氨基嘌呤、茉莉酸甲酯、烯腺嘌呤、乙氧氟草醚、多效唑、吡草醚、茉莉酮、嘧啶肟草醚、环酯草醚、抑食肼、西玛津、戊唑醇、噻菌灵、（反式）玉米素、三唑酮、抑芽唑、脱叶磷、抗倒酯、烯效唑、2,3,5-三碘苯甲酸、2,4,5-三氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、5-硝基邻甲氧基苯酚钠、2-萘氧乙酸、4-氯苯氧乙酸、4-氟苯氧乙酸、4-碘苯氧乙酸、脱落酸、灭草松、6-苄氨基嘌呤、苯哒嗪钾、调果酸、坐果酸、环丙酸酰胺、2,4-滴丙酸、地乐酚、氯吡脲、赤霉素3、赤霉素7、伏草胺、4-溴苯氧乙酸、对硝基苯酚钠、噻苯隆、增甘膦、茉莉酸、1-萘乙酸、胺鲜酯、玉米赤霉烯酮。
13、进一步的，上述的uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，步骤（2）中所述的无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末是由无水硫酸镁和无水乙酸钠按质量比为4:1的比例混合得到；所述的离心5分钟时，离心的转数为5000转•min-1。
14、步骤（4）uplc色谱条件中，所述的梯度洗脱是按照下表1中的规定进行梯度洗脱。
15、
16、上述的uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法中，所用的微孔滤膜的孔径为0.22μm。
17、本专利技术的有益效果为：
18、本专利技术公开了一种uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，该方法采用uplc-ms/ms进样分析，采用基质匹配标准曲线法定量；结果72种生长调节剂线性关系良好，检出限为1～20μg本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种UPLC-MS/MS 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末是由无水硫酸镁和无水乙酸钠按质量比为4:1的比例混合得到；所述的离心5分钟时，离心的转数为5000转•min-1。
3.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于：步骤（4）UPLC色谱条件中，所述的梯度洗脱是按照下表1中的规定进行梯度洗脱，
4.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于：所用的微孔滤膜的孔径为0.22μm。
【技术特征摘要】
1.一种uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的uplc-ms/ms 同时测定根茎类中药材中72种植物生长调节剂残留量的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末是由无水硫酸镁和无水乙酸钠按质量比为4:1的比例混合得到；所述的离心5分钟时，离心的转数为5000...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗轶，白桂昌，朱韬，罗永强，覃丽郦，张佳毅，吕轶峰，冯枫，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药品检验研究院广西壮族自治区药品包装材料容器产品检测中心，
类型：发明
国别省市：
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