System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种D-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用制造技术_技高网

一种D-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用制造技术

技术编号:41917379 阅读:8 留言:0更新日期:2024-07-05 14:18
本发明专利技术公开了一种D‑2‑羟基酸脱氢酶在催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸中的应用,本发明专利技术将来自长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)的D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)以pTrc99a质粒为载体在一株生产4‑羟基苯丙酮酸的大肠杆菌中表达,经过摇瓶发酵和产物测定,D‑2‑羟基酸脱氢酶(BlFldH)能够高效催化4‑羟基苯丙酮酸生成4‑羟基苯乳酸。大肠杆菌工程菌株TS5P3积累4‑羟基苯乳酸达1155.05mg/L。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程,具体涉及一种来源于长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)的d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)的应用。


技术介绍

1、4-羟基苯乳酸(4hpl)是一种苯乳酸衍生物,具有同苯乳酸相似的化学性质,具有广谱天然抑菌效果,可有效抑制细菌和真菌繁殖,也可作为肠道致病菌抑菌剂应用于畜禽养殖业,因此在食品、生物和养殖方面有广阔的应用前景。同时,4-羟基苯乳酸也可作为生成丹参素和迷迭香酸的原料。

2、目前关于4-羟基苯乳酸合成的研究报道较少,工程微生物生产的方法主要是酶催化和从头合成,但由于缺乏能够高效催化4-羟基苯丙酮酸转化为4-羟基苯乳酸的酶,极大的限制了4-羟基苯乳酸的合成。2-异构特异性还原酶家族中的酶可以催化这类反应,如2013年,赵广荣团队利用植物乳杆菌(lactobacillus pentosus)中的d-乳酸脱氢酶(d-ldh)催化生成4-羟基苯乳酸,从而构建了从头合成丹参素的工程大肠杆菌;2017年,蔡宇杰团队报道了一种来自发酵乳杆菌(limosilactobacillus fermentum)的d-乳酸脱氢酶具有较好的4-羟基苯乳酸脱氢酶活性;2023年,周景文团队利用植物乳杆菌(lactobacilluspentosus)来源的d-乳酸脱氢酶(d-ldh),构建了从头合成迷迭香酸的工程大肠杆菌。但目前报道的2-异构特异性还原酶家族中的酶对于4-羟基苯丙酮酸底物特异性较差,仍限制了4-羟基苯乳酸合成。随着酶工程的发展,越来越多的酶的结构和功能被人们解析,通过ncbi,uniprot等数据库,可以对相似功能的蛋白质进行筛选,极大的促进了生物
的进步,寻找更高酶活的催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸的酶对于4-羟基苯乳酸生物合成产量的提高十分关键。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足,提供一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。

2、本专利技术的技术方案概述如下:

3、一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。

4、所述d-2-羟基酸脱氢酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

5、有益效果:

6、本专利技术将来自长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)的d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)以ptrc99a(商品)质粒为载体在一株生产4-羟基苯丙酮酸的大肠杆菌中表达,经过摇瓶发酵和产物测定,d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)能够高效催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸。大肠杆菌工程菌株ts5p3积累4-羟基苯乳酸达1155.05mg/l。

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【技术保护点】

1.一种D-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述D-2-羟基酸脱氢酶的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。

【技术特征摘要】

1.一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。

2.根...

【专利技术属性】
技术研发人员:乔建军田道光田贵峰李伟国秦臻赵广荣
申请(专利权)人:天津大学浙江研究院绍兴
类型:发明
国别省市:

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