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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于酶工程,具体涉及一种来源于长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)的d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)的应用。
技术介绍
1、4-羟基苯乳酸(4hpl)是一种苯乳酸衍生物,具有同苯乳酸相似的化学性质,具有广谱天然抑菌效果,可有效抑制细菌和真菌繁殖,也可作为肠道致病菌抑菌剂应用于畜禽养殖业,因此在食品、生物和养殖方面有广阔的应用前景。同时,4-羟基苯乳酸也可作为生成丹参素和迷迭香酸的原料。
2、目前关于4-羟基苯乳酸合成的研究报道较少,工程微生物生产的方法主要是酶催化和从头合成,但由于缺乏能够高效催化4-羟基苯丙酮酸转化为4-羟基苯乳酸的酶,极大的限制了4-羟基苯乳酸的合成。2-异构特异性还原酶家族中的酶可以催化这类反应,如2013年,赵广荣团队利用植物乳杆菌(lactobacillus pentosus)中的d-乳酸脱氢酶(d-ldh)催化生成4-羟基苯乳酸,从而构建了从头合成丹参素的工程大肠杆菌;2017年,蔡宇杰团队报道了一种来自发酵乳杆菌(limosilactobacillus fermentum)的d-乳酸脱氢酶具有较好的4-羟基苯乳酸脱氢酶活性;2023年,周景文团队利用植物乳杆菌(lactobacilluspentosus)来源的d-乳酸脱氢酶(d-ldh),构建了从头合成迷迭香酸的工程大肠杆菌。但目前报道的2-异构特异性还原酶家族中的酶对于4-羟基苯丙酮酸底物特异性较差,仍限制了4-羟基苯乳酸合成。随着酶工程的发展,越来越多的酶的结构和功能被人们解析,通过ncbi,uni
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足,提供一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。
2、本专利技术的技术方案概述如下:
3、一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。
4、所述d-2-羟基酸脱氢酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。
5、有益效果:
6、本专利技术将来自长双歧杆菌(bifidobacteriumlongum)的d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)以ptrc99a(商品)质粒为载体在一株生产4-羟基苯丙酮酸的大肠杆菌中表达,经过摇瓶发酵和产物测定,d-2-羟基酸脱氢酶(blfldh)能够高效催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸。大肠杆菌工程菌株ts5p3积累4-羟基苯乳酸达1155.05mg/l。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种D-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述D-2-羟基酸脱氢酶的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种d-2-羟基酸脱氢酶在催化4-羟基苯丙酮酸生成4-羟基苯乳酸中的应用。
2.根...
【专利技术属性】
技术研发人员:乔建军,田道光,田贵峰,李伟国,秦臻,赵广荣,
申请(专利权)人:天津大学浙江研究院绍兴,
类型:发明
国别省市:
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