【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测领域，特别地涉及一种抗dfs70抗体检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
1、自身免疫性疾病(autoimmune disease，aid)是指机体免疫系统对自身成分的免疫耐受被打破，从而攻击自身的器官、组织或细胞，引起损伤而诱发的一类疾病。
2、抗dfs70抗体是一种自身免疫抗体，为晶状体上皮源性生长因子(ledgf)抗原的自身抗体，在健康的受试者中可检测到。在过去的几年里，分离出来的抗dfs70抗体被认为是一种有价值的生物标志物，有助于自身免疫疾病的诊断，临床研究初步明确单独的抗dfs70抗体阳性可作为系统性自身免疫症的排除指标。
3、现有的抗dfs70抗体检测方法主要为间接免疫荧光法、酶联免疫吸附法(elisa)和免疫印迹法，但各有其不足。如间接免疫荧光法结果判断需要丰富的经验，灵敏度较低；elisa方法灵敏度较高，但检测通量低，在自身免疫疾病的诊断应用推广方面存在着极大的局限性。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的技术问题，本专利技术提出了一种磁珠标记dfs70抗原的方法，包括：向磁珠中加入标记缓冲液以及dfs70抗原，并于15-37度混匀放置2-3小时；其中，标记缓冲液包括0.05-0.1m pb以及0.05-0.2％ pvp；优选地，所述标记缓冲液包括0.1m pb和0.1％ pvp，所述标记缓冲液ph约为7.4；加入封闭液，并于15-37度混匀1.5-3小时；去除上清液，加入tris-hcl缓冲液清洗一次或多次；以及去除上
2、如上所述的方法，所述磁珠稀释液包括tris-hcl缓冲液、0.05-0.1m pbs缓冲液、0.4-0.6％ bsa、0.04-0.06％表面活性剂和4-6％ sa01；优选地，所述磁珠稀释液包括tris-hcl缓冲液、0.1m pbs缓冲液、0.5％ bsa、0.05％表面活性剂和5％ sa01。
3、如上所述的方法，所述封闭液包括0.01mol/l pbs缓冲液以及1％bsa。
4、如上所述的方法，所述表面活性剂为：吐温20、吐温80或者曲拉通100。
5、一种根据如上任一方法获得的磁珠标记的dfs70抗原。
6、一种抗dfs70抗体检测的试剂盒，包括：如上任一所述方法获得的磁珠标记的dfs70抗原或者如上所述的磁珠标记的dfs70抗原；荧光标签标记的抗人igg抗体；以及样本缓冲液。
7、如上所述的试剂盒，所述荧光标签标记的抗人igg抗体为吖啶酯-鼠抗人igg偶联物。
8、如上所述的试剂盒，所述样本缓冲液包括0.005-0.02mol/l磷酸盐缓冲液以及0.5-2％bsa。
9、如上所述的试剂盒，进一步包括激发液，所述激发液包括：过氧化氢和硝酸混合溶液以及氢氧化钠溶液。
10、利用如上任一所述的试剂盒检测样本中抗dfs70抗体的方法，包括：将样本、磁珠标记的dfs70抗原混匀，获得复合物；向复合物中加入吖啶酯标记的抗人igg抗体结合反应；向结合反应产物中加入激发液；检测激发光的发光强度；以及获得抗achr抗体的检测结果。
11、利用如上任一所述的试剂盒检测样本中抗dfs70抗体的方法，包括：将样本、磁珠标记的dfs70抗原混匀，获得复合物；向复合物中加入吖啶酯标记的抗人igg抗体结合反应；向结合反应产物中加入激发液；检测激发光的发光强度；以及获得抗dfs70抗体的检测结果。
12、本专利技术介绍了一种能提高抗dfs70抗体检测灵敏度和稳定性的磁微粒化学发光法。使用本申请检测抗dfs70抗体的灵敏度较好、稳定性较好。
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1.一种磁珠标记DFS70抗原的方法，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，所述磁珠稀释液包括Tris-HCl缓冲液、0.05-0.1M PBS缓冲液、0.4-0.6％BSA、0.04-0.06％表面活性剂和4-6％SA01；优选地，所述磁珠稀释液包括Tris-HCl缓冲液、0.1M PBS缓冲液、0.5％BSA、0.05％表面活性剂和5％SA01。
3.根据权利要求1所述的方法，所述封闭液包括0.01mol/L PBS缓冲液以及1％BSA。
4.根据权利要求1所述的方法，所述表面活性剂为：吐温20、吐温80或者曲拉通100。
5.一种根据权利要求1-4任一方法获得的磁珠标记的DFS70抗原。
6.一种抗DFS70抗体检测的试剂盒，包括：
7.根据权利要求6所述的试剂盒，进一步包括：
8.根据权利要求6所述的试剂盒，所述荧光标签标记的抗人IgG抗体为吖啶酯-鼠抗人IgG偶联物。
9.根据权利要求6所述的试剂盒，所述样本缓冲液包括0.005-0.02mol/L磷酸盐缓冲液以及0.5-2％
10.根据权利要求6所述的试剂盒，进一步包括激发液，所述激发液包括：过氧化氢和硝酸混合溶液以及氢氧化钠溶液。
11.利用如权利要求6-10任一所述的试剂盒检测样本中抗DFS70抗体的方法，包括：
...【技术特征摘要】
1.一种磁珠标记dfs70抗原的方法，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，所述磁珠稀释液包括tris-hcl缓冲液、0.05-0.1m pbs缓冲液、0.4-0.6％bsa、0.04-0.06％表面活性剂和4-6％sa01；优选地，所述磁珠稀释液包括tris-hcl缓冲液、0.1m pbs缓冲液、0.5％bsa、0.05％表面活性剂和5％sa01。
3.根据权利要求1所述的方法，所述封闭液包括0.01mol/l pbs缓冲液以及1％bsa。
4.根据权利要求1所述的方法，所述表面活性剂为：吐温20、吐温80或者曲拉通100。
5.一种根据权利要求1-4任一...
【专利技术属性】
技术研发人员：李雁飞，赵强，
申请(专利权)人：北京铂臻生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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